刘玲丽
- 作品数：9 被引量：31H指数：3
- 供职机构：吉林大学第一医院更多>>
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- ALB<Sub>SIN</Sub>/IL－18<Sub>MAT</Sub>杂交细胞因子
- ALB<Sub>SIN</Sub>是人血清白蛋白的信号肽，IL－18<Sub>MAT</Sub>为人IL－18的成熟肽。本发明采用基因重建方法，获得ALB<Sub>SIN</Sub>与IL－18<Sub>MAT</Sub...
- 谭岩刘力华方艳秋段秀梅许淑芬姜艳芳宋艳刘玲丽时阳
- 文献传递
- 人心肌型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）在大肠杆菌中的表达和纯化
- 目的获得重组人心肌型脂肪酸结合蛋白,为进一步开发应用奠定基础。方法根据己报道的心肌型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）基因序列,采用R T-P C R的方法获得心肌型脂肪酸结合蛋白基因。将所得的PCR产物插入原核表达载体pQ...
- 侯巍许淑芬刘玲丽杨晓虹
- 文献传递
- 流式细胞术检测细胞毒方法的建立被引量：17
- 2004年
- 目的 :建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法 :用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞 ,再用碘化丙碇 (PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为 10 0∶1～ 6 2 5∶1,共孵育时间为 1～ 6小时 ,流式细胞仪收集 10 0 0个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果 :CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料 ,18小时后也能很好地区分效靶细胞 ;靶细胞的自然死亡率低于 5 % ;杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为5 0∶1～ 2 5∶1,共孵育时间为 2～ 4小时。结论 :CFSE PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点 :避免放射性试剂的应用 ,敏感性增强 ,单细胞水平的分析。
- 王晓祺谭岩段秀梅刘玲丽方艳秋姜艳芳许淑芬刘力华
- 关键词：靶细胞细胞毒CFSE流式细胞术百分率自然死亡
- 氮末端脑利钠肽前体的免疫胶体金的快速定性检测盒
- 一种氮末端脑利钠肽前体的免疫胶体金的快速定性检测盒，涉及一种对血液进行检测的方法。本发明采用高亲和力特异性单克隆抗体，按照免疫化学方法和免疫层析技术的原理制备的氮末端脑利钠肽前体的免疫胶体金的快速定性检测盒。本发明具有灵...
- 方艳秋谭岩刘力华段秀梅许淑芬姜艳芳宋艳刘玲丽时阳
- 文献传递
- 获得重构基因的简捷方法——重叠延伸PCR被引量：11
- 2004年
- 目的 :构建 IFN- β信号肽序列与白细胞介素 18(IL- 18)成熟肽的重组嵌合分子。方法 :从 BAL B/ c鼠基因组 DNA扩增 IFN- β信号肽序列 ;由小鼠 Pro- IL- 18真核表达质粒获得 IL- 18成熟肽序列 ;以非对称 PCR技术得到IFN- β信号肽编码区的反义链和 IL- 18成熟肽正链 ;采用重叠延伸 PCR(SOE- PCR)产生具有 IFN- β信号肽与 IL- 18成熟肽的嵌合编码序列 ;定向连方式构建嵌合 IL- 18的表达质粒并测序。结果 :连续胶 PAGE表明非对称 PCR可分别扩增出两个靶序列的特异性单链 ,大小符合预期。IFN- β信号肽对称 PCR产物与 IL- 18非对称 PCR产物混合作为模板 ,进行重叠延伸 ;电泳分析可见清晰的嵌合片段 ;测序显示重组质粒的表达框由两个设计的靶序列构成 ,且无移码。结论 :重叠延伸 PCR是一种获得重构基因的简捷方法。
- 刘玲丽谭岩刘力华张琨时阳许淑芬方艳秋段秀梅姜艳芳王晓祺
- 关键词：重叠延伸PCR
- ALB<Sub>SIN</Sub>/IL－18<Sub>MAT</Sub>杂交细胞因子
- ALB<Sub>SIN</Sub>是人血清白蛋白的信号肽，IL-18<Sub>MAT</Sub>为人IL-18的成熟肽。本发明采用基因重建方法，获得ALB<Sub>SIN</Sub>与IL-18<Sub>MAT</Sub...
- 谭岩刘力华方艳秋段秀梅许淑芬姜艳芳宋艳刘玲丽时阳
- 文献传递
- 人心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：3
- 2005年
- 目的获得重组人心肌型脂肪酸结合蛋白,为进一步开发应用奠定基础。方法根据已报道的心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因序列,采用RT-PCR的方法获得心肌型脂肪酸结合蛋白基因。将所得的PCR产物插入原核表达载体pQE30中,得重组质粒(pQE-H-FABP)并转化大肠杆菌(E.coli)M15,通过IPTG诱导表达出带有六个组氨酸的融合蛋白。经镍固定金属亲和层析纯化。结果序列分析表明:H-FABP基因成熟肽编码区含有396bp,编码132个氨基酸;与GenBank(NM004012)中已报道的H-FABP分离物的核苷酸序列有99·9%同源性。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析显示,表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的27%,分子质量约为15kDa并与商品化的H-FABP单抗(Clone6B6)呈特异性反应。经Ni+2-NTAagarose纯化获得SDS-PAGE电泳下单一条带。结论在大肠杆菌中获得了人心肌型脂肪酸结合蛋白的高效表达,为研究其生物学功能和制备单克隆抗体奠定了基础。
- 侯巍许淑芬刘玲丽杨晓虹谭岩
- 关键词：心肌型脂肪酸结合蛋白大肠杆菌
- MAGE－1与IL－18共表达基因疫苗及其构建方法
- MAGE－1基因的表达产物是一种肿瘤排斥抗原，该基因在多种恶性肿瘤中高度表达，而在除睾丸外的正常组织中不表达。因此，以MAGE－1为靶点的基因治疗具有广泛的应用前景。IL－18是新近发现的一种具有多种生物功能的细胞因子，...
- 谭岩刘力华时阳方艳秋段秀梅许淑芬姜艳芳宋艳刘玲丽
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- 试剂盒
- 谭岩刘力华方艳秋段秀梅许淑芬姜艳芳宋艳刘玲丽谢七一时阳
