刘越坚
- 作品数：53 被引量：268H指数：9
- 供职机构：大连医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅课题基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 谷氨酸信号通路调控恶性黑素瘤侵袭与增殖的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨谷氨酸信号通路在恶性黑素瘤发病中的作用机制。方法取对数生长期恶性黑素瘤WM451LU细胞，分为6组，①阴性对照组加入100μl的PBS液；②MK801组加入100μmol／LNM—DAR非竞争性拮抗剂MK801；③CPCCOEt组加入10μmol／L代谢型谷氨酸受体1（mGluR1）非竞争性拮抗剂CPCCOEt；④MAP2组加入腺病毒一微管相关蛋白2a（Ad—MAP2a）；⑤MK801＋MAP2组加入100μmol／LMK801和Ad—MAP2a；⑥CPCCOEt＋MAP2组加入10μmol／LCPCCOEt和Ad—MAP2a。用Western印迹观察转染Ad—MAP2a载体后WM451LU细胞中离子型谷氨酸受体甲基一D-天冬氨酸受体2A（NMDAR2A）的变化。并通过细胞迁移、侵袭实验分别研究上调MAP2表达与MK-801、CPCCOEt分别或共同作用下，肿瘤细胞的迁移及侵袭性的变化。同时进行了裸鼠恶性黑素瘤动物模型的体内研究，比较上述药物的体内抑瘤作用。结果Western印迹发现，转染Ad—MAP2a的WM451LU细胞NMDAR2A表达降低。体外迁移实验结果显示，MAP2组发生迁移的细胞为（117．04±2．76）个／高倍视野（HP），MK801组（107．64±6．50）个／HP，CPCCOEt组（97．36±4．79）个／HP，MK801＋MAP2组（43．28±3．02）个／HP，CPCCOEt＋MAP2组（30．76±3．97）个／HP，与阴性对照组（152．3±5．75）个／HP比较，P值均〈0．01。体外侵袭实验结果显示，MAP2组发生侵袭的细胞数为（102．56±3．81）个／HP，MK801组（98．21±5．52）个／HP，CPCCOEt组（118．23±7．96）个／HP，与阴性对照组（178．43±8．75）个／HP相比，P值均〈0．05；MK801＋MAP2组（43．89±5．08）个，HP，CPCCOEt＋MAP2组（58．45±6．88）个／HP，与阴性对照组相比，P值均〈0．01。裸鼠体内研究发现，用药第15天时，MAP2组肿瘤体积为（224．02±46．19）mm^2，MK801组（160．33±33．91）mm^2，MK801＋MAP2组（91．49±21．48）mm^2，CPCCOEt组（202．30±52．37）mm^2，CPCCOEt＋MAP2组（111．13±69�
- 李丽丽单路娟张媛高船舟高海芹高文婷刘越坚宋智琦
- 关键词：黑素瘤细胞系细胞运动
- 大鼠重症急性胰腺炎时急性肺损伤的实验研究被引量：13
- 2003年
- 目的 研究内毒素 (endotoxin ,ET)、细胞因子 (cytokine,CK)、氧自由基 (oxygenfreeradi cals ,OFR)等在重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis,SAP)时急性肺损伤 (acutelunginjury ,ALI)发病机制中的作用。方法 采用胰管逆行注射 1 5 %去氧胆酸钠制成大鼠重症急性胰腺炎时ALI模型。选用纯雄性健康Wistar大鼠共 4 0只 ,体重 2 2 0～ 2 5 0g,随机分成两组 :假手术对照组 (Sham ,n =10 ) ;SAP模型组(SAP ,n =30 ) ,分别于造模后 2 4h活杀。测定动脉血气 ,血清淀粉酶的含量 ,血清内毒素及血清和肺组织匀浆中的TNF α、IL 6、MDA、SOD的含量 ,肺湿 /干系数以及肺组织病理学改变。结果 SAP组血清内毒素 ,血淀粉酶 ,血清及肺组织匀浆中TNF α、IL 6、OFR均较Sham组明显升高 (P <0 0 1) ;动脉血气显示肺损伤严重 ,肺湿 /干比值较Sham组明显升高 ,肺通透性明显升高 ,肺病理学形态改变加重。结论 ET、TNF、IL 6。
- 闻庆平陈海龙关凤林邱阳郭莉刘越坚
- 关键词：重症急性胰腺炎急性肺损伤内毒素细胞因子氧自由基
- 谷氨酸信号通路对黑素细胞树突形态的调节作用被引量：1
- 2010年
- [目的]探讨谷氨酸信号通路在黑素细胞中的作用机制。[方法]培养人原代黑素细胞。采用多巴染色法及透射电镜鉴定细胞;以Western Blot方法测定人原代黑素细胞内NMDAR2A的表达。采用扫描电镜观察谷氨酸受体激动剂N-Methyl-D-aspartic acid(NMDA),Quisqualate(Q-LA)和非竞争性拮抗剂MK-801作用下黑素细胞树突形态的变化。[结果]Western Blot实验发现人原代黑素细胞内有NMDAR2A蛋白的表达。扫描电镜观察发现谷氨酸受体激动剂NMDA及Q-LA作用后细胞树突长度明显变短,树突末端明显变宽,二、三级树突增加;谷氨酸受体拮抗剂MK801作用后细胞树突末端明显变窄,二、三级树突减少。[结论]除神经系统外,黑素细胞内存在谷氨酸信号通路,且该信号通路与细胞形态有关。
- 李丽丽单路娟张媛高船舟刘越坚宋智琦
- 关键词：黑素细胞树突
- 中西医结合治疗功能性消化不良及其与Cajal间质细胞关系的研究进展被引量：5
- 2017年
- 功能性消化不良(FD)是临床常见消化系统疾病,具有持续性和反复发作性的特点。关于FD的病因和发病机制尚不明确,胃肠动力障碍是FD发病的主要病理生理基础。Cajal间质细胞(ICC)是胃肠道起搏细胞,也具有信号传导功能,对胃肠动力的发生和调控起重要作用,深入了解ICC与FD之间的关系将为中西医结合治疗FD提供新思路。
- 邱阳唐旭东邱娟娟郭莉刘越坚万嘉嘉王凤云郭慧淑
- 关键词：中西医结合疗法间质细胞
- 菝葜乙醇提取物对大鼠离体胃肠道平滑肌收缩活动的作用被引量：1
- 2012年
- 目的研究菝葜乙醇提取物对大鼠离体胃肠道平滑肌收缩活动的影响及作用机制。方法以大鼠离体胃肠道平滑肌条作为研究对象,用生物功能实验系统记录和观察20、40和80 mg/mL的菝葜乙醇提取物分别在正常条件下及阿托品作用下对大鼠胃肠道平滑肌振幅的影响。结果菝葜乙醇提取物可显著增强大鼠胃肠道平滑肌条的振幅,且随浓度呈升高趋势;而菝葜乙醇提取物对阿托品引起的胃肠道平滑肌松弛效应具有明显拮抗作用。结论菝葜乙醇提取物对大鼠胃肠道平滑肌条的收缩活动具有显著的加强作用。
- 郭莉邱阳刘越坚郭慧淑
- 流式细胞术检测多发性骨髓瘤免疫表型的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨多发性骨髓瘤(MM)细胞的免疫表型特征,为临床提供早期诊断、治疗及预后判断的依据。方法采用多色流式细胞术,通过CD45/SSC设门的方法。分析118例MM骨髓标本的免疫表型,并选取15例正常人浆细胞作为对照组。结果 118例MM患者中CD138、CD38、CD117、CD56、CD33、CD13、CD9、Lambda、Kappa、HLA-DR的阳性率依次为91.53%、94.92%、44.07%、72.03%、25.42%、17.80%、29.66%、39.83%、30.51%和62.71%,其他抗体阳性率极低或均不表达。结论流式细胞术免疫分型是检测MM细胞的有效方法,MM细胞的免疫分型有助于MM的准确诊断及预后监测。
- 刘越坚张婵郭莉邱阳单路娟郭慧淑
- 关键词：多发性骨髓瘤免疫表型流式细胞术
- SPF和正常鼠下呼吸道菌群多样性研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨SPF和正常鼠下呼吸道菌群多样性区别,为研究洁净环境下呼吸道菌群对免疫耐受形成的影响提供简便的动物模型。方法采用飞行质谱和DGGE的方法检测正常和SPF BALB/c小鼠及Wistar大鼠呼吸道支气管肺泡灌洗液中菌群多样性的区别。结果 SPF BALB/c小鼠下呼吸道菌群丰度小于普通小鼠,下呼吸道菌群丰度小于消化道。SPF Wistar大鼠下呼吸道菌群丰度小于普通大鼠.结论 SPF环境造成鼠下呼吸道菌群丰度减小。
- 于文凯刘越坚唐立袁晓鹏徐星澈谭丽莎李坤戴凤翠刘银辉李明李华军郭燕杰袁杰利文姝
- 关键词：多样性
- 肝细胞生长因子对神经干细胞分化的影响被引量：1
- 2008年
- 目的体外培养获得神经干细胞并初步研究重组人肝细胞生长因子(human recombinant hepatocyte growth factor,HGF)对神经干细胞(neutal steal cells,NSCs)分化能力的影响。方法从胚胎大鼠脑组织中分离得到神经干细胞,并行免疫荧光鉴定。检测不同浓度的HGF(5ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、40ng/ml)对神经干细胞分化的影响。结果体外培养的神经干细胞球巢蛋白(nestin)表达阳性,由神经干细胞球分化的细胞神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)和胶质纤维酸性蛋白(galial fibrillary acidic protein,GFAP)表达阳性。并且不同浓度HGF作用下的神经元细胞分化率不同。结论HGF对NSCs分化及较长时间存活具有重要作用,20ng/ml的HGF可以促进较好的分化效果。
- 单路娟刘越坚邱阳郭慧淑郭莉陈亮元
- 关键词：肝细胞生长因子胎鼠神经干细胞分化
- RNA干涉岩藻糖基转移酶Ⅰ和Ⅳ（FUT1和FUT4）促进A431细胞凋亡作用的研究
- 目的:Lewis寡糖抗原是细胞表面糖复合物/(糖蛋白、糖脂和蛋白聚糖/)中的糖链成分,已经发现其在多种肿瘤中的合成异常增加,与肿瘤增殖、浸润、转移、临床分期及预后密切相关。大量的研究发现,Lewis X/(LeX/)//...
- 刘越坚
- 关键词：LEX细胞凋亡岩藻糖基转移酶RNA
- 文献传递
- 乳腺癌MCF-7细胞体外干细胞培养条件下雌激素受体表达与治疗敏感性初探被引量：4
- 2012年
- 目的通过比较观察激素敏感的MCF-7细胞在体外干细胞培养和常规培养条件下雌激素受体(ER)变化及对内分泌治疗药物的敏感性变化,初步探讨肿瘤干细胞与内分泌耐药的关系。方法分别于常规培养及干细胞培养条件下(悬浮球培养)培养激素敏感的MCF-7细胞株,流式细胞仪检测分子表型CD44+CD24-/low与CD44+CD24+亚群细胞比例变化,免疫细胞化学法测定ERα和ERβ的表达变化,MTT法检测细胞对他莫西芬的敏感程度。分别以t检验、卡方检验、方差分析进行统计分析。结果干细胞培养条件下CD44+CD24-/low亚群细胞的比例为(1.60±0.08)%,比常规培养条件下的(0.27±0.08)%显著增加(t=-12.10,P=0.00),而CD44+CD24+亚群细胞比例由(5.59±0.88)%增至(30.63±4.40)%(t=-5.58,P=0.00)。干细胞培养条件培养下ERα和ERβ表达率较常规培养下调,分别由85.27%和90.53%降至69.43%和73.20%,差异有统计学意义(χ2=214.64,P=0.00;χ2=303.58,P=0.00),且对他莫西芬的敏感性降低,IC50值由(9.82±0.31)μmol/L升至(16.46±0.50)μmol/L,再次诱导分化后ER并未出现上调,对他莫西芬的敏感性仍旧降低(F=113.63,P=0.00)。结论与常规培养相比较,体外干细胞培养条件下可以培养出含高比例具有干细胞特性的CD44+CD24-/low与CD44+CD24+亚群细胞的微球囊,其ER仍为阳性表达,但对他莫昔芬治疗敏感性减低,推测其可能是乳腺癌内分泌耐药的原因。
- 张斌张霞张改容刘越坚张阳
- 关键词：干细胞雌激素受体Α雌激素受体Β
