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吴传湘

作品数:4 被引量:5H指数:2
供职机构:中南大学湘雅医院更多>>
发文基金:湖南省科技厅科技计划项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 4篇医药卫生

主题

  • 4篇细胞
  • 4篇病毒
  • 3篇人肝
  • 3篇人肝细胞
  • 3篇基因
  • 3篇肝细胞
  • 2篇蛋白
  • 2篇乙肝
  • 2篇乙肝病毒
  • 2篇乙型
  • 2篇乙型肝炎
  • 2篇乙型肝炎病毒
  • 2篇质粒
  • 2篇基因转化
  • 2篇肝病
  • 2篇肝炎
  • 2篇肝炎病毒
  • 2篇X蛋白
  • 1篇乙肝病毒X基...
  • 1篇乙型肝炎病毒...

机构

  • 4篇中南大学

作者

  • 4篇吴传湘
  • 3篇谭德明
  • 3篇刘国珍
  • 3篇李涛
  • 2篇刘洪波
  • 1篇郑芳

传媒

  • 2篇生命科学研究
  • 1篇中华传染病杂...

年份

  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 2篇2007
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
乙肝病毒X基因真核表达质粒及细胞模型的建立被引量:4
2007年
采用聚合酶链反应(PCR)方法扩增HBV X基因,定向亚克隆入真核表达载体pRc/CMV2,构建重组质粒pCMV/X;采用脂质体法转染QSG7701细胞,筛选阳性细胞克隆;RT-PCR法检测HBV X mRNA的表达情况,Western blotting法鉴定HBx蛋白的表达.结果表明,构建的真核重组表达质粒pCMV/X中包含有完整的HBV X基因片断,pCMV/X转染的QSG7701细胞中有HBV X mRNA及HBx蛋白的稳定表达.成功建立了HBV X稳定转染的细胞系,为进一步探讨HBx在HCC的发生发展过程中所起的作用,提供了一个有价值的细胞模型.
李涛刘国珍谭德明吴传湘刘洪波
关键词:HBVX蛋白真核表达细胞模型
HBV X基因转化人肝细胞的实验研究被引量:2
2008年
选取已稳定转染HBV X基因的QSG7701细胞(pCMV X/QSG7701),并以稳定转染空质粒pRc/CMV2的QSG7701细胞(pRcCMV2/QSG7701)及未转染的QSG7701细胞为对照,用免疫荧光方法检测pCMV X/QSG7701细胞中HBX蛋白的分布;用RT-PCR方法和免疫细胞化学法分别检测细胞中c-Myc表达;用光镜及电镜观察细胞形态学变化,进一步研究乙肝病毒(HBV)X基因对永生化非瘤性人肝细胞QSG7701的转化作用.研究发现,乙肝病毒X(HBX)蛋白主要分布在细胞膜及细胞浆;c-Myc mRNA及c-Myc蛋白在3种细胞中均有表达,但转染了X基因的细胞中c-Myc的表达水平较其他两组明显升高(P<0.01);光镜和电镜下观察发现pCMV X/QSG细胞的胞核较大,核膜增厚,核仁肥大且增多,核/浆比例失调,可见少量多核巨细胞,pRc-CMV2/QSG7701细胞与QSG7701细胞核浆比正常,染色质分布均匀,胞核大小及形态正常.结果表明,HBVX基因成功转染了QSG7701细胞,HBV X蛋白主要分布于转染细胞的细胞膜和细胞浆中,HBX可能通过上调转染细胞中c-Myc蛋白的表达而使细胞具备恶性化生长的倾向.
吴传湘刘国珍李涛谭德明刘洪波
关键词:乙肝病毒X蛋白人肝细胞
乙型肝炎病毒X基因转化人肝细胞QSG7701的体外观察
2009年
目的观察HBVX基因多功能蛋白(HBx)的表达对QSG770l细胞生物学特征的影响及对其的转化作用。方法采用脂质体法分别将重组质粒pCMV/X及真核表达质粒pRc/CMV2稳定转染QSG7701细胞,分别获得pCMVX/QSG7701、pRcCMV2/QSG7701,设未转染的QSG7701细胞为对照组。Western印迹检测细胞中HBx、c-Myc及Bcl-2蛋白的表达,MTT比色法、流式细胞技术、软琼脂克隆形成率实验检测细胞的生物学活性。结果HBx高表达于pCMVX/QSG7701中。pCMVx/QSG7701中c—Myc蛋白的表达水平较其他两组高,Bcl-2蛋白在3组细胞中均有表达,但表达水平差异无统计学意义。在pCMVx/QSG7701、pRcCMV2/QSG7701及未转染的QSG77013组细胞中,pCMVX/QSG7701组S期细胞所占百分比较后两组明显增加[分别为(28.80±2.32)%、(15.50±2.64)%、(21.50±3.66)%,LSD0.05=3.95%,LSD0.01=5.47%,P〈0.01],其G1期细胞所占百分比较后两组明显减少[分别为(62.30±3.85)%、(78.70±4.12)%、(78.10±4.45)%,LSD0.05=5.63%,I。SD0.01=7.79%,P〈0.01],其凋亡率明显高于后两组[分别为(14.90±1.01)%、(8.91±0.48)%、(4.03±0.47)%,I.SD0.05=0.94%,LSD0.01=1.31%,P〈0.01],其细胞株的倍增时间较后两组明显缩短(分别为14h,29h,38h),其软琼脂克隆形成率明显高于后两组[分别为(19.83±1.96)%,(1.76±0.03)%,(1.33±0.18)%,LSD0.05=1.53%,LSD0.01=2.11%,P〈0.01]。结论HBx能够在体外转化人源性非瘤性肝细胞QSG7701,使细胞具有恶性化生长的倾向。
李涛刘国珍谭德明吴传湘郑芳
关键词:基因转变肝细胞质粒
HBX基因转化人肝细胞的实验研究
目的:乙肝病毒(HBV)的慢性感染与肝细胞癌(HCC)之间存在着密切的联系,然而HBV诱发HCC的确切机制仍不十分清楚。有研究表明,乙肝病毒X基因(HBV X)及其编码的蛋白在HCC的发生中起着重要的作用,为进一步探讨H...
吴传湘
关键词:HBX基因乙型肝炎病毒肝细胞癌基因转化
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共1页<1>
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