宋亮
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
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- 白细胞介素1β对大鼠髓核间质干细胞生物学特性的影响被引量：1
- 2014年
- 背景:内源性干细胞并未在椎间盘退变的进程发挥修复作用,作者推测可能与相关致病因素的异常作用有关,导致对髓核间质干细胞功能产生一定的抑制效应。目的:观察炎症因子白细胞介素1β对大鼠髓核间质干细胞生物学特性的影响。方法:取3月龄雄性SD大鼠脊柱腰段椎间盘髓核组织,用胶原酶,胰酶序贯消化法分离并培养髓核间质干细胞。采用流式细胞术检测细胞免疫表型CD24,CD34,CD45,CD90,CD105表达;利用RT-PCR检测干细胞基因SOX2,Nanog的表达。观察髓核间质干细胞成脂、成骨、成软骨分化能力。利用流式细胞术检测白细胞介素1β作用于髓核间质干细胞后的凋亡率,荧光定量PCR检测白细胞介素1β作用于髓核间质干细胞后SOX9,蛋白多糖,Ⅱ型胶原酶,caspase-3基因的表达变化。结果与结论:体外分离培养出的细胞表现为纺锤样长梭形;CD90、CD105表达阳性,CD45、CD34、CD24表达阴性,表达干细胞基因SOX2,Nanog,具有成骨和成软骨分化能力,无成脂分化能力。CCK-8检测白细胞介素1β可以抑制髓核间质干细胞的增殖活性,与作用时间、作用浓度存在一定的依赖关系,最佳作用时间为48 h,最佳作用浓度为50μg/L。流式细胞仪检测白细胞介素1β可以使髓核间质干细胞轻度凋亡;荧光定量PCR结果显示:SOX9,蛋白多糖,Ⅱ型胶原的mRNA表达下调,caspase-3表达上调。结果可见白细胞介素1β具有抑制髓核间质干细胞增殖活性并诱导其凋亡的作用,是导致椎间盘自身干细胞无法发挥修复作用的原因之一。
- 张宁关晓明马迅张丽张辉宋亮
- 关键词：干细胞骨髓干细胞增殖活性
- 不同浓度胎牛血清对大鼠髓核间充质干细胞生物学特性影响
- 目的研究大鼠髓核间充质干细胞（NPMSC）体外培养的最佳血清浓度并探讨椎间盘退变的机制。方法用胶原酶、胰酶序贯消化法从SD大鼠腰部和尾部的椎间盘组织中提取NPMSC，并进行体外培养，将其传代。（1）利用流式细胞仪对第3代...
- 宋亮
- 关键词：椎间盘退行性变
- 文献传递
- 不同体积浓度胎牛血清对大鼠髓核间充质干细胞生物学特性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的研究大鼠髓核间充质干细胞(NPMSCs)体外培养的最佳血清体积浓度并探讨椎间盘退变的机制。方法用胶原酶、胰酶序贯消化法从SD大鼠腰部和尾部的椎间盘组织中提取NPMSCs,并进行体外培养,将其传代。①利用流式细胞仪对第3代传代NPMSCs细胞表型CD29、CD34、CD24、CD90、CD105进行鉴定;②利用普通PCR鉴定体外培养的NPMSCs细胞基因Sox2、Nanog的表达;③在37℃、21%O2、5%CO2的细胞培养箱中用成骨、成软骨、成脂培养液诱导培养第3代传代NPMSCs,2周以后,用染色剂对其染色,观察其成脂、成骨、成软骨能力。④在37℃、21%O2、5%CO2的细胞培养箱中用不同血清体积浓度(0%、5%、10%、20%、30%)的DMEM-F12血清培养液培养第3代传代NPMSCs,72h后利用CCK-8法检测细胞的增殖,并采用RT-PCR检测细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9的mRNA表达,借助流式细胞仪对细胞进行细胞凋亡的检测。结果①大鼠NPMSCs的成骨、成软骨能力强,成脂能力较差,且其细胞表面高度表达CD29、CD90、CD105,低度表达CD24、CD34,细胞基因Sox2、Nanog高度表达。②随着培养液血清体积浓度增加,OD值增大,NPMSCs的凋亡率降低,细胞蛋白多糖、Ⅱ型胶原、SOX9基因的mRNA表达增加。结论①大鼠NPMSCs具有间充质干细胞特性;②细胞外营养影响大鼠NPMSCs的增殖、分泌、凋亡。
- 宋亮张宁关晓明陈辉马迅
- 关键词：椎间盘退变凋亡
- 人工颈椎间盘置换术近期疗效和并发症分析被引量：3
- 2014年
- 目的观察PCM人工颈椎间盘置换术治疗颈椎病的近期疗效及相关并发症。方法 2011年12月至2013年2月对33例颈椎病患者的40个节段行PCM人工间盘置换术,男18例,女15例,年龄39~64岁,平均48.60岁;病程8~35个月,平均18.9个月。其中单节段置换20例,连续双节段置换2例,连续3节段置换3例,联合融合和非融合的Hybrid手术7例。术前和末次随访时使用日本骨科学会脊髓功能评分（JOA）、颈椎残障指数（NDI）行神经功能评价并计算末次随访JOA评分改善率。末次随访时使用Odom＇s分级评估临床疗效;术前和末次随访使用颈椎侧位X线片及过伸过屈侧位X线片评估假体位置及置换节段活动度;统计并发症的发生情况并分析其原因。结果术后椎旁血肿形成2例;术后假体松动改行融合术1例;术后随访假移位2例,观察至末次随访,假体位置无变化。所有置换节段平均活动度术前和末次随访比较无统计学差异（P〉0.05）;末次随访患者的平均JOA评分和NDI评分和术前相比有统计学差异（P均〈0.05）。末次随访按Odom＇s标准,很好18例（54.5%）,较好10例（30.3%）,一般3例（15.2%）。结论单节段、双节段、三节段PCM人工椎间盘置换术及一期联合融合和非融合的Hybrid手术治疗颈椎病早期均可取得良好的临床疗效,但手术操作复杂,有其特殊并发症,要严格把握手术适应证,规范化操作,Hybrid手术时必须重视手术策略。
- 陈辉马迅陈晨冯皓宇宋亮
- 关键词：颈椎病人工椎间盘置换术手术后并发症
