庞欢瑛
- 作品数：56 被引量：107H指数：7
- 供职机构：广东海洋大学水产学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 溶藻弧菌HY9901摄铁系统相关基因的克隆与原核表达
- 为研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)HY9901摄铁系统相关蛋白作为疫苗候选抗原的可能性,根据已发表的溶藻弧菌HY9901血红素结合蛋白(Periplasmidc Hemin-Binding Pro...
- 薛丽丽庞欢瑛简纪常吴灶和
- 关键词：溶藻弧菌克隆原核表达
- 文献传递
- 三种弧菌交叉抗原的免疫效果研究
- 用石斑鱼抗溶藻弧菌血清对溶藻弧菌、哈氏弧菌、副溶血弧菌的全细菌蛋白进行免疫蛋白质组学研究,分别筛选得到56、58、48种交叉抗原。对三种弧菌的转印图谱进行配对分析,发现6个交叉抗原,分别为外膜蛋白W(OMPW),ABC转...
- 陈立明庞欢瑛鲁义善吴灶和简纪常
- 关键词：弧菌疫苗
- 文献传递
- 溶藻弧菌Ⅲ型分泌系统vscP基因的克隆与生物信息学分析被引量：6
- 2016年
- 根据NCBI上登录的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)全基因组序列,设计一对克隆溶藻弧菌HY9901株Ⅲ型分泌系统"分子尺"蛋白VscP全长基因的特异性引物,PCR扩增获得基因的全长片段。结果显示,vsc P(Gen Bank登录号FR780678)开放阅读框ORF为1 206 bp,共编码401个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测其分子质量约为44.4 ku,等电点为5.72。Signal 4.1 Server和TMHMM Server 2.0预测结果表明,VscP无信号肽与跨膜结构域。Soft Berry-Psite预测结果显示,VscP含有3个N端糖基化位点,2个cAMP及c GMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点,5个蛋白激酶C磷酸化位点,9个酪蛋白激酶II磷酸化位点,2个N端豆蔻酰基化位点,1个酰胺化位点和3个微体C末端靶信号位点。运用MEGA6.0构建的VscP系统进化树显示,溶藻弧菌VscP与副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)聚为一簇。应用SWISS-MODEL软件构建VscP亚基三维结构模型发现,其与鞭毛Fil K蛋白有相似构型。
- 李静庞欢瑛简纪常鲁义善汤菊芬吴灶和
- 关键词：溶藻弧菌基因克隆生物信息学分析
- 温度对溶藻弧菌HY9901株致病性相关蛋白的调控被引量：4
- 2008年
- 将溶藻弧菌HY9901株置于15℃、20℃、28℃、37℃四个温度下培养,18h时分别测定细菌含量,胞外蛋白酶(Extracelluar protease,ECPase)表达量以及胞外产物(Extracellular product,ECP)对动物的致死性。结果表明,随着温度升高,菌液浓度、ECPase的活性以及ECP对小鼠和红笛鲷的致死率先升高后下降。28℃培养的细菌浓度、ECPase的活性以及ECP对小鼠和红笛鲷的致死率均为最大。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析不同温度培养下细菌的ECP和外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP),结果显示,不同温度培养的溶藻弧菌ECP和OMP电泳图谱不同。溶藻弧菌主要ECP的分子量为70kD和62kD。ECP 70kD在20℃时的表达量最大,而28℃时ECP62 kD的蛋白浓度最高。45kD OMP随着温度升高,其合成量增大,28℃时达最大值;而40kD和34kD OMP则随着温度的升高而减弱。通过研究电泳纯化的ECP 62kD和ECP 70kD的酶活性和致死试验,证明ECP 62kD具有很强的酶活性和毒性,而ECP 70kD仅具有弱的酶活性和毒性。
- 庞欢瑛吴灶和简纪常鲁义善
- 关键词：溶藻弧菌胞外产物外膜蛋白胞外蛋白酶温度
- 溶藻弧菌HY9901外膜蛋白OmpH的基因克隆及其生物信息学分析被引量：2
- 2013年
- 根据已发表的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)全基因组序列设计1对特异性引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株外膜蛋白OmpH的全长基因。结果显示,该基因(GenBank登录号:JX855924)全长573 bp,共编码190个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测其分子量约为21.1 kD,等电点为9.02。SignalP 4.0、TMHMM Server 2.0和SofiBerry-Psite预测结果显示,OmpH不存在信号肽与跨膜区,含有1个N-糖基化位点,6个磷酸化位点,1个内质网靶信号位点以及3个微体C末端靶信号位点。利用MAGE5.0软件,以邻位相连法构建OmpH系统进化树,结果显示,溶藻弧菌OmpH与副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈氏弧菌(Vibrio harveyi)等有较近亲缘关系。采用多种参数成功预测了OmpH可能的B细胞抗原优势表位,分别是第5-10、106-110、120-125、158-163和175-180区段。利用SWISS-MODEL软件,模拟了OmpH亚基三维结构模型,且与其同源蛋白大肠杆菌(Escherichia coli)Skp蛋白有相似构型。
- 周泽军庞欢瑛丁燏简纪常吴灶和
- 关键词：溶藻弧菌基因克隆外膜蛋白生物信息学分析
- 溶藻弧菌AcfA基因缺失株构建及相关功能研究
- 溶藻弧菌是我国南方海水养殖中引起弧菌病暴发的主要病原，是一种人、水生动物共感染菌，附件定植因子AcfA 作为溶藻弧菌一种重要毒力基因，能促进鞭毛形成及抑制生物被膜合成，从而调控溶藻弧菌对宿主定植能力。
- 蔡双虎陈海燕庞欢瑛鲁义善简纪常吴灶和
- 关键词：溶藻弧菌
- 溶藻弧菌hutB基因的克隆及其在不同铁源下的表达分析
- 2015年
- 根据已发表的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)血红素结合蛋白(Periplasmic Hemin-Binding Protein,HutB)基因序列设计引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株的hutB基因,序列分析结果显示该基因全长870 bp,共编码289个氨基酸,分子量约为30.59 ku,PI为6.45。细胞定位、SignalP4.0、TMHMM Server 2.0和SoftB erry-Psite预测结果显示,hutB位于外周质中,存在信号肽切割位点,没有跨膜结构域,氨基酸序列含有1个cA MP和cG MP的蛋白激酶磷酸化位点,4个蛋白激酶C磷酸化位点等多个活性位点。系统进化树结果显示,溶藻弧菌hutB与坎氏弧菌(Vibrio campbellii)和哈氏弧菌(Vibrio harveyi)聚为一簇。qR T-PCR技术初步探究hutB在不同铁源下的表达量,结果表明,溶藻弧菌hutB在含有FeC l3的富铁培养基中,表达量与对照组相比差异不显著;在含有血红素的条件下表达量上调;在同时含有2-2'二联吡啶和血红素时上调极显著(P<0.01);在含2-2'二联吡啶的铁限制环境下,表达量下调极显著(P<0.01)。
- 庞欢瑛薛丽丽简纪常蔡双虎鲁义善吴灶和
- 关键词：溶藻弧菌
- 海水鱼致病弧菌外膜蛋白亚单位疫苗的制备和使用方法
- 一种海水鱼致病弧菌外膜蛋白亚单位疫苗的制备和使用方法，提取下列各弧菌的二种或二种以上菌种的外膜蛋白再加入免疫刺激复合物制成，所述的弧菌菌种包括：溶藻弧菌、哈氏弧菌、创伤弧菌、鳗弧菌、副溶血弧菌、拟态弧菌和河流弧菌。制备方...
- 吴灶和庞欢瑛姚绍云简纪常
- 文献传递
- 溶藻弧菌T3SS exsD基因敲除突变株构建及其表型特征被引量：6
- 2021年
- 【目的】构建溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)Ⅲ型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,T3SS)中的调控蛋白操纵子ExsD基因缺失株,研究exsD缺失株表型特征。【方法】采用overlapPCR技术构建缺失株ΔexsD,PCR检测缺失株ΔexsD的遗传稳定性,比较缺失株与野生株之间的生长速度、泳动能力、胞外酶活性、药物敏感性、毒力,分别采用结晶紫和共聚焦电镜方法测定生物膜的差异变化,通过qRT-PCR方法分析exsD的缺失对T3SS效应蛋白Hop转录的影响。【结果】缺失株ΔexsD构建成功;与野生株相比,ΔexsD遗传稳定性和生长速度无显著差别,但泳动能力极显著上升(P <0.01),胞外蛋白酶活性显著上升(P <0.05),形成生物膜能力在24 h时提高(P <0.05);相比野生株,ΔexsD对米诺环素、庆大霉素、卡那霉素、多西环素、新霉素的敏感性从耐药变成中度敏感;ΔexsD缺失株的毒力显著上升,野生株对斑马鱼的半数致死剂量是缺失株的3.68倍。实时荧光定量结果显示,与HY9901野生型相比,exsD基因的缺失增加了效应蛋白Hop的转录表达。【结论】exsD基因对T3SS的致病性起负调控作用,为进一步阐明exsD基因在溶藻弧菌中的作用机理提供一定的理论基础。
- 王俊霖招茵苏茵茵周诗慧曾福源谢妙王娜简纪常庞欢瑛
- 关键词：溶藻弧菌基因敲除表型特征
- 应用免疫蛋白质组学筛选哈氏弧菌免疫反应蛋白质
- 李岩庞欢瑛鲁义善吴灶和简纪常
- 关键词：哈氏弧菌双向电泳
