康宁
- 作品数：7 被引量：27H指数：3
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 敲减SOX9基因对骨髓间充质干细胞表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:构建小鼠S0X9基因干扰的慢病毒载体,体外转染小鼠骨髓间充质干细胞,观察小鼠SOX9基因在小鼠间充质干细胞中的表达影响。方法:针对小鼠SOX9基因序列,设计RNA干扰靶点序列,合成含干扰序列的双链DNAoligo连入酶切后的RNA干扰载体上,构建Lenti-SOX9-siRNA-EGFP载体,鉴定扩增。利用SOX9基因沉默载体体外转染小鼠骨髓间充质细胞,利用倒置荧光显微镜观察转染是否成功,并通过流式细胞仪测定转染效率。同时利用RT-PCR和Western Blot检测小鼠SOX9基因的表达。结果:成功构建了Lenti-SOX9-siRNA-EGFP,SOX9基因沉默慢病毒载体,能高效转染小鼠骨髓间充质细胞。RT-PCR和Western Blot检测显示经SOX9基因转染的小鼠骨髓间充质细胞基因表达沉默。结论:利用慢病毒结合RNA干扰技术敲减小鼠SOX9基因成功地转染小鼠骨髓间充质干细胞,且SOX9基因在小鼠骨髓间充质干细胞中发生了沉默,这为SOX9修复软骨损伤的进一步研究奠定了基础。
- 梁大川白洁玉杜少华程鹏王震康宁杨自权
- 关键词：SOX9慢病毒属转染
- 膝关节前叉韧带损伤早期与延期手术疗效分析
- 康宁
- 小鼠间充质干细胞三系分化中SOX9与Ⅱ型胶原mRNA的定量
- 2013年
- 背景:研究表明,软骨中的主要成分Ⅱ型胶原的基因-Col2a1在软骨细胞中的表达与SOX9的浓度呈剂量依赖正相关关系。目的:通过成骨、成软骨、成脂肪诱导干细胞分化,分析3种分化过程及不同时期的SOX9与Ⅱ型胶原mRNA含量的变化,探讨SOX9在不同时空分布的表达规律及与Ⅱ型胶原的相关关系。方法:取4周龄昆明小鼠骨髓间充质细胞,体外培养得到间充质干细胞并传达至第3代,对间充质干细胞进行流式细胞仪鉴定细胞表型,共分3组每组设3个时间段,通过成骨、成软骨、成脂肪3种诱导培养液对3组细胞进行诱导,另设不进行诱导的细胞作为对照组。分别在诱导3,7,14 d后收集提取细胞的总RNA,通过RT-PCR进行SOX9与Ⅱ型胶原的mRNA定量检测,同时对诱导后的细胞进行染色、免疫荧光染色,观察其分化状态及相关统计分析。结果与结论:第3代骨髓间充质干细胞生长良好,流式细胞仪鉴定细胞表型证实为干细胞,对诱导后细胞进行染色、免疫荧光染色结果证实细胞分化为骨、软骨、脂肪细胞。经RT-PCR检测,在3组诱导分化细胞中SOX9 mRNA含量由高到低分别是成软骨、成骨、成脂肪,Ⅱ型胶原mRNA含量由高到低分别是成软骨、成脂肪、成骨。在成软骨分化中SOX9在3,7 d表达不断升高,14 d呈下降趋势。Ⅱ型胶原在3,7,14 d均逐渐升高。在成骨分化中SOX9 mRNA含量随着时间推移而增加,而Ⅱ型胶原则随着时间推移而不断降低。在成脂肪分化中SOX9 mRNA表达与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05);而Ⅱ型胶原的表达没有规律可循,时间点的延伸及检测未观察到。结果提示,SOX9在软骨分化中作用优于成骨、成脂肪组,且软骨分化中SOX9与Ⅱ型胶原存在相关性,可能在软骨分化的早期Ⅱ型胶原随着SOX9的变化而变化;且软骨分化和成骨分化过程中SOX9可能起到了一个互相协调促进平衡的关键作用。
- 梁大川白洁玉杜少华程鹏康宁王震黄强开杨自权
- 关键词：干细胞间质干细胞
- 膝关节前交叉韧带损伤的诊疗进展被引量：6
- 2014年
- 随着社会的发展,交通事故以及各类运动所导致的膝关节前交叉韧带损伤（anterior cruciate ligament,ACL）已经成为关节损伤疾病中的常见疾病。在膝关节两端分别有股骨和胫骨构成杠杆,在活动中受到的比其他关节更大的应力,其中ACL是膝关节重要的静力性稳定结构,有着重要的生理功能。ACL损伤可使膝关节的稳定性受到严重影响,为了避免关节稳定性受损所导致的继发性的关节疾病,确保该类损伤能够有较好的预后，正确及时的诊断、恰当的应急处理、适时的手术以及术后全面个体化的康复治疗均是ACL损伤患者全面康复必不可少的程序，任何一个环节的失误都可能影响该疾病的全面治愈，本文将对以上各方面做一综述，以求对ACL损伤的诊疗有所帮助。
- 康宁杨自权
- 关键词：关节稳定性CRUCIATE诊疗进展膝关节间隙静力性
- 膝关节前交叉韧带损伤早期与延期手术疗效分析
- 目的 通过对膝关节前交叉韧带损伤（ACL）早期手术与延期手术的临床数据及是否合并半月板损伤手术疗效的分析，总结得出疗效的差异，指导临床应用。 方法 收集自2010年9月至2013年8月山西医科大学第二医院膝关节前交叉韧带...
- 康宁
- 关键词：前交叉韧带关节镜
- 文献传递
- 股骨近端防旋髓内钉置入修复老年股骨转子间骨折被引量：8
- 2015年
- 背景:虽然股骨近端防旋髓内钉具有良好的生物力学基础,在治疗老年股骨转子间骨折方面具有明显优势,但是临床上因材料匹配、手术细节等问题处理不当,仍然出现许多问题,影响治疗效果及功能恢复。目的:分析股骨近端防旋髓内钉治疗60岁以上老年股骨转子间骨折的效果及出现的问题。方法:自2011年7月至2012年7月采用股骨近端防旋髓内钉治疗老年股骨转子间骨折患者56例,建立临床资料库,对治疗过程中出现的问题及治疗后出现的并发症进行统一分析。治疗后1,3,6,9,12个月进行门诊及电话随访,评估治疗效果及髋关节功能恢复情况。结果与结论:4例患者治疗后1年内死亡,7例患者因其他原因1年内失访,其余45例患者随访时间12-24个月,平均随访18.2个月。Harris评分为(85.00±6.75)分,其中优26例,良15例,中3例,差1例,优良率为91%。治疗后骨折断端位置不满意18例,股骨近端防旋髓内钉与股骨近端不匹配9例,螺旋刀片位置及长度不满意7例,并发外侧皮质骨折7例;治疗后并发肺栓塞1例,心脑血管疾病1例,股骨近端局部肿胀9例,髋部疼痛13例,骨折延长愈合5例。结果可见股骨近端防旋髓内钉置入修复老年股骨转子间骨折效果较好,但是对骨折断端分离及减少治疗中、治疗后并发症的发生还有待改善。
- 康宁杨自权张晨冯君宇
- 关键词：植入物股骨近端防旋髓内钉转子间骨折老年髋关节功能
- 慢病毒介导的Sox9基因在兔骨髓间充质干细胞的过表达促进软骨损伤修复被引量：11
- 2015年
- 目的 :明确在体内Sox9基因过表达的兔骨髓间充质干细胞对于关节软骨损伤修复的作用。方法:以慢病毒介导的Sox9基因转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),体外检测软骨特异性分子,将新西兰大白兔24只48个膝关节随机分为3组,动物麻醉后,双侧股骨滑车处的关节面上用直径4 mm的钻头钻孔,深度3 mm,穿透软骨下骨,造成全层关节软骨损伤,将转染后的细胞植入体内用以修复全层关节软骨损伤,实验组植入BMSCs-(Lenti-Sox9-EGFP)-藻酸钙复合物,实验对照组植入BMSCs-藻酸钙复合物,空白对照组只钻孔。术后6、12周分别进行光镜、电镜观察,以及HE、免疫组织化学染色检测软骨的修复程度。结果:经Sox9基因转染后的细胞在3 d时,Sox9基因表达最高,随后下降。转染后3 d,Ⅱ型胶原开始表达,到14 d时达到最高。表明Sox9过表达启动了兔骨髓间充质干细胞的软骨分化。组织学观察显示,实验组术后6周缺损处有透明软骨样组织填充,术后12周缺损处软骨和软骨下骨修复良好。两对照组,缺损处由纤维组织填充。免疫组织化学显示,修复组织内Ⅱ型胶原,免疫组化染色结果阳性强于两对照组。组织学评分结果显示实验组软骨损伤修复各时间点效果明显优于两对照组,差异有统计学意义。结论:Sox9基因过表达的兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)促进软骨损伤的修复。
- 王震梁大川白洁玉康宁冯军宇杨自权
- 关键词：SOX9基因骨髓间充质干细胞软骨
