张永涛
- 作品数：20 被引量：32H指数：3
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金霍英东青年教师基金更多>>
- 相关领域：医药卫生水利工程化学工程更多>>
- 降钙素基因相关肽对人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的影响及机制研究被引量：9
- 2012年
- 目的组织工程骨的神经化能有效促进支架材料内血管生成,修复骨缺损。研究降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖与迁移的作用,进一步揭示组织工程骨的神经化促血管生成机制。方法体外分离获取HUVECs,并通过血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)与CD31抗原鉴定,取第1代细胞用于实验。实验分为6组,分别以0(A组)、1×10—12(B组)、1×10—11(C组)、1×10—10(D组)、1×10—9(E组)、1×10—8mol/L(F组)浓度CGRP干预HUVECs。采用细胞免疫荧光观察HUVECs的CGRP1受体(CGRP1 receptor,CGRP1R)表达情况,AlarmarBlue法动态检测各组HUVECs增殖率,Transwell小室检测各组HUVECs的迁移能力,ELISA法检测HUVECs分泌VEGF的水平,Westernblot法检测其局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达。结果分离的细胞通过形态学及vWF、CD31免疫荧光鉴定为HUVECs,并可见CGRP1R在细胞质和细胞膜表达。CGRP呈时间-浓度依赖性刺激HUVECs增殖;B～F组各时间点细胞增殖能力均高于A组(P<0.05),F组各时间点细胞增殖能力最高。B～F组迁移细胞数均显著高于A组(P<0.05),最大增幅达3倍以上。B～F组VEGF分泌量均显著高于A组(P<0.05);C、D组促进细胞分泌VEGF的能力最强。Western blot检测示,与A组相比,B～F组CGRP刺激HUVECs 3、7、10 d后,FAK表达明显增加(P<0.05)。结论 CGRP对HUVECs的增殖和迁移有直接促进作用,可能作用机制为CGRP能促进VEGF分泌和增加FAK的表达。
- 陀泳华郭小磊张鑫鑫王钊周健张永涛夏立恒文军金丹
- 关键词：降钙素基因相关肽血管生成细胞迁移细胞增殖骨组织工程
- 组织工程骨软骨复合体构建的研究进展被引量：6
- 2011年
- 目的对构建组织工程骨软骨复合体的相关研究进展进行综述,讨论构建中存在的不足。方法广泛查阅近年来国内外有关组织工程骨软骨复合体构建研究的相关文献,并对新进展进行综述。结果构建组织工程骨软骨复合体的体内研究较多,将不同组织来源的MSCs作为种子细胞是研究热点;单相支架的应用受到限制,双相和三相支架的研究是新趋势;生物反应器的设计和性能还需进一步优化。结论构建组织工程骨软骨复合体将有望成为一种治疗软骨缺损的具有潜力的方法。
- 张永涛金丹
- 关键词：MSCS生物反应器
- 骨髓来源富血小板血浆制备的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨BM．PRP制备的可行性并比较BM—PRP与PB-PRP中PLT数量的差异。方法成年新西兰白兔8只，BM组和PB组分别采用骨髓穿刺和耳中央动脉穿刺抽取标本各10ml／只（含1．5m14．7％的枸橼酸钠作为抗凝剂），采用二次离心的方法制备新西兰白兔的BM—PRP和PB—PRP，手工计数其中的血小板数量，采用t检验进行统计学分析。结果BM-PRP中的的PLT数量（2296．76±148．80）X10^／μl是PB—PRP中PLT浓度（1633．26±89．64）×10^3／μl的1．41倍（P〈0．001）。结论骨髓穿刺是获取PRP的一种有效方法，并可获得较PB—PRP更高浓度的PRP。
- 张永涛金丹
- 关键词：外周血骨髓
- 降钙素基因相关肽通过ERK1/2信号通路对人血管内皮细胞增殖的影响
- 目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖的影响,并从ERK1/2信号通路角度初步探讨其可能的机制.
方法:实验分为4组,分别为空白对照组、CGRP组、CGRP+ CGRP...
- 周健陀泳华夏立恒张永涛郭小磊王钊梅刚金丹
- 关键词：脐静脉血管内皮细胞增殖降钙素基因相关肽蛋白激酶信号通路
- 文献传递
- 对小孔径PLGA支架进行软骨细胞接种时方法的选择
- :比较负压法、注射法、振荡法对50-100μm孔径的小孔径PLGA支架进行软骨细胞接种的接种效果. 方法:分离培养新西兰大白兔肋软骨细胞至第2代,使用纤维蛋白原溶液混悬细胞,采用负压法(A组)、注射法(B组)、振荡...
- 夏立恒张永涛周健梅刚金丹
- 关键词：聚乳酸-羟基乙酸共聚物软骨细胞接种方法
- 神经肽Y促进大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中成骨特异性蛋白的表达
- 王钊金丹陀泳华郭小磊文军夏立恒周健张永涛
- 一种用于细胞接种的离心管
- 本实用新型涉及一种用于细胞接种的离心管。本实用新型所述离心管包括：圆柱形管体，具有逐渐缩小直径的底部，该底部设有细圆柱形的底管；顶帽，可开启地连接在所述管体的顶部；以及底帽，可拆卸地套接在所述的底管上，并具有容纳接种细胞...
- 金丹张永涛
- 文献传递
- 降钙素基因相关肽通过ERKl/2信号通路对人血管内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2013年
- [目的]探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖的影响,并从ERK1/2信号通路角度初步探讨其可能的机制。[方法]实验分为4组,分别为空白对照组、CGRP组、CGRP+CGRP8-37组、CGRP+PD98059组。AlarmarBlue法检测各组人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的增殖变化情况;免疫印迹技术观察CGRP诱导后ERKl/2的磷酸化,及CGRP8-37、PD98059对ERK1/2磷酸化的影响。[结果](1)CGRP可诱导HUVECs细胞增殖,该作用可被CGRP8-37和PD98059阻断;(2)CGRP可时间依赖性地诱导HU-VECs细胞ERKI/2的磷酸化,CGRP8-37和PD98059可减弱其作用。[结论]CGRP可诱导HUVECs细胞增殖,ERK1/2信号通路参与其调控机制。
- 周健陀泳华夏立恒张永涛郭小磊王钊梅刚金丹
- 关键词：降钙素基因相关肽细胞增殖ERK1/2通路
- 降钙素基因相关肽促进大鼠BMSCs迁移及VEGF的表达被引量：11
- 2011年
- 目的观察外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在大鼠BMSCs迁移中的作用及对VEGF、血管黏附分子1(vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)表达的影响,探讨CGRP通过BMSCs促进血管生成的作用机制。方法全骨髓法分离、培养SD大鼠BMSCs,采用Western blot法于传代培养1、2、3周时检测BMSCs中CGRP受体(CGRP receptor,CGRPR)蛋白的表达。使用浓度为1×10-8 mol/L的CGRP作用于BMSCs作为实验组,单纯BMSCs作为对照组,在培养72 h时采用细胞趋化实验检测CGRP对BMSCs迁移的影响;在培养1、3、5、7 d采用实时荧光定量PCR检测CGRP作用后VCAM-1 mRNA的表达变化,采用免疫细胞化学染色、Western blot法检测CGRP作用后VEGF的表达变化。结果 Western blot检测示BMSCs稳定表达CGRPR,2周时表达最高。细胞趋化实验显示,实验组CGRP刺激后穿膜迁移细胞数(3.20±1.77)个/HP,较对照组(1.11±0.49)个/HP明显增多(t=4.230,P=0.001)。实时荧光定量PCR检测示,实验组VCAM-1 mRNA表达随时间延长逐渐增加,7 d时最高;实验组3、5、7 d的VCAM-1 mRNA表达量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学染色示,培养1、3 d两组均无阳性染色;培养5、7 d实验组VEGF染色呈阳性,对照组无阳性染色。Western blot检测示,培养1、3 d两组均未检测到VEGF蛋白表达;培养5、7 d实验组VEGF蛋白表达量均明显高于对照组(P<0.05);实验组5 d的VEGF蛋白表达量明显高于7 d(P<0.05)。结论 CGRP能促进BMSCs迁移及VEGF表达,这可能是CGRP调节骨内部血流变化而影响骨代谢的机制之一。
- 王钊金丹陀泳华郭小磊文军周健夏立恒张永涛
- 关键词：降钙素基因相关肽BMSCS细胞迁移VEGF
- 一种富血小板血浆制备用离心管
- 本实用新型涉及一种富血小板血浆制备用离心管。本实用新型所述的离心管包括：圆柱形管体，具有倒圆锥形底部以及水平封闭的顶部；移液管，贯穿所述管体的顶部；所述移液管突出于所述顶部之上的端口是由橡胶塞密封，所述移液管插入所述顶部...
- 金丹张永涛
- 文献传递
