张赛
- 作品数:2 被引量:11H指数:1
- 供职机构:广东省生物工程药物重点实验室更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化被引量:11
- 2011年
- 运用定向进化-易错PCR方法,提高黄曲霉毒素解毒酶的活力及稳定性,并结合辣根过氧化物酶(HRP)-隐性亮绿(RBG)快速高通量筛选系统,构建了库容约为104的突变体库。经过两轮易错PCR,最终分别获得了耐高温70℃突变酶A1773、pH 4.0稳定性的突变酶A1476,pH 4.0和pH 7.5均表现稳定性的突变酶A2863,其酶活力比野生酶分别提高了6.5倍、21倍和12.6倍。经序列分析表明,发现突变酶A1773发生了Glu127Lys和Gln613Arg突变;突变酶A2863发生了Gly73Ser、Ile307Leu、Val596Ala、Gln613Arg突变;突变酶A1476发生了Ser46Pro、Lys221Gln、Ile307Leu和Asn471Ile突变。结果为进一步了解黄曲霉毒素解毒酶的结构与功能之间的关系提供了参考。
- 张赛邢克克胡亚冬谢春芳刘大岭姚冬生
- 关键词:黄曲霉毒素解毒酶稳定性定向进化易错PCR
- 黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化(Ⅱ)
- <正>黄曲霉毒素广泛存在于污染的食品和饲料中,是对人类危害较为突出的一类强致癌诱变剂。黄曲霉毒素解毒酶(Aflatoxin-detoxifizyme,ADTZ)已经被开发成饲料添加剂,用于污染的饲料中黄曲霉毒素的去毒,成...
- 黎玉凤张赛谢春芳刘大岭姚冬生
- 文献传递