李作生
- 作品数：134 被引量：394H指数：11
- 供职机构：成都军区疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目“九五”国家科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>
- H5N1和H9N2禽流感病毒单克隆抗体的制备
- 李作生范泉水邱薇张富强李丽红于福先郑颖黄勇李刚山王双印李江
- 猪瘟DNA疫苗制备工艺研究被引量：6
- 2004年
- 猪瘟DNA疫苗制备工艺的建立是其走向产业化 ,从而在猪瘟防制中发挥作用所需解决的关键问题之一。以猪瘟DNA疫苗质粒pVAXE2IL2转化大肠杆菌后 ,转入发酵罐发酵培养。将菌体悬浮裂解和中和后 ,经澄清和浓缩处理 ,上阴离子交换色谱和体积排阻色谱进行纯化 ,首次提纯出符合药学规格的猪瘟DNA疫苗 ,且整个工艺回收率达 64 5 3% 。
- 程从升李作生余兴龙李素扈荣良江禹李尚波涂长春
- 关键词：DNA疫苗大肠阴离子交换色谱猪瘟防制发酵培养
- 人兽共患传染病-猪链球菌病
- 人们对2003年的非典型肺炎和2004年的禽流感的流行还心有余悸.2005年7月初,一种不明原因的疾病打破了四川省资阳市往日的平静,一些习惯于养猪、卖猪、加工猪肉的农民,突然出现发高烧、周身酸痛甚至休克等病状.7月25日...
- 李作生余永芳范泉水邱薇谢建福蒲永高李享云王双印李江
- 关键词：人兽共患传染病猪链球菌病非典型肺炎
- 文献传递
- 云南军犬犬型钩端螺旋体的分离与鉴定
- 目的：对疑为钩端螺旋体病的军犬病料进行致病性钩端螺旋体分离和鉴定，为钩端螺旋体病的诊断提供理论依据。方法：对病犬进行解剖观察，用犬尿液接种柯索夫培养基进行钩体的分离，然后对分离到的钩体进行菌型鉴定并用钩体外膜蛋白基因引物...
- 范泉水邱薇郑颖张富强李作生李刚山黄勇周卫国叶封平
- 关键词：军犬钩端螺旋体病PCR检测
- 文献传递
- 云南牟定狂犬病病毒株N基因和G基因序列分析被引量：6
- 2008年
- 自英国引进3株荧光素标记的针对狂犬病毒核蛋白的单克隆抗体,建立狂犬病直接免疫荧光诊断技术。根据已知狂犬病毒核蛋白和糖蛋白基因序列,参照已发表文献,设计合成4对PCR引物和2对克隆引物,以弱毒疫苗毒株为阳性对照,建立狂犬病RT-PCR及套式PCR诊断技术。自牟定采集发病犬脑组织样品15份,免疫荧光及PCR诊断结果均为阳性。对病毒N基因和G基因全序列经RT-PCR扩增,克隆至pMD18-T载体进行测序(登录号分别为:EU095330、EU253477),并与已知代表毒株对应序列进行比对及系统发育分析,结果表明:云南牟定狂犬病毒属于基因1型和血清1型毒株,与近年从广西、浙江、江苏、湖北等省分离的毒株遗传关系密切,在系统发育树中形成同一小分支并均属于亚组群Ⅱ毒株。
- 赵焕云金卫华张文东杨斌李朝仓宋建领何晓辉周建国胡媛媛王永贤张应国范泉水李作生高云英张富强
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白基因糖蛋白基因RT-PCR
- 猪IL-6 cDNA的克隆及在大肠杆菌中的高效表达被引量：5
- 2003年
- 运用 RT- PCR方法 ,从经刀豆球蛋白 A(Con A)诱导的猪外周血单核细胞 (PMBCs)总 RNA中扩增得到了猪 IL -6 (porcine IL- 6 ,p IL- 6 )的 c DNA,并将其克隆到 p GEM- T载体上。DNA序列测定表明 ,克隆得到的 p IL- 6 c DNA与国外报道的完全一致 ,包括终止密码子在内其编码区的长度为 6 39bp,编码 2 12个氨基酸残基的蛋白质。将 p IL - 6成熟肽段编码区亚克隆至 p ET- 2 8(a)中 ,构建成原核表达质粒 p ETPIL6。该质粒的 BL2 1(DE3) L ys S转化菌在 IPTG的诱导下可高效表达 p IL- 6 ,表达量占菌体总蛋白的 30 .6 0 %～ 38.35 %。
- 余兴龙涂长春徐兴然李作生张茂林李吉平
- 关键词：白细胞介素6IL-6CDNA克隆大肠杆菌
- 我国CAV-2分子流行病学调查与疫苗选择
- 根据GenBank中已发表的CAV纤突基因序列,设计合成2对4条引物,用已建立的PCR方法,对犬2型腺病毒沈阳分离株第5代强毒(SY-V5)、经蚀斑克隆驯化的第60代毒弱毒(SY-V60)、SY-V60在易感犬体上传5代...
- 范泉水邱薇张富强李作生郑颖王双印王意银郑均峰周卫国黄勇
- 关键词：犬2型腺病毒
- 文献传递
- 超广谱Β内酰胺酶SHV-4型基因克隆表达与纯化研究
- 2006年
- 楼永良王震郑颖吕建新陈秀枢尹惠琼邱薇李作生范泉水高国辉陆永绥
- 关键词：超广谱Β内酰胺酶基因克隆表达微生物学诊断食品监测药物生产耐药菌
- 猪瘟病毒E2蛋白重复多表位基因的融合表达及其兔体免疫保护研究被引量：4
- 2005年
- 目的 :研究猪瘟病毒 (CSFV)E2蛋白重复多抗原表位基因的融合表达及其免疫攻毒保护作用。方法 :应用PCR方法扩增猪瘟病毒E2蛋白重复多抗原表位基因 ,构建重复多表位基因的原核重组表达质粒PGEX-3E ,进行融合蛋白的表达和纯化。ELISA和Westernblot方法测定单表位融合蛋白GST-E和多表位融合蛋白GST-3E与猪抗CSFV的阳性血清和兔抗E2阳性血清的反应性 ,并进行融合蛋白的兔体免疫及免疫攻毒保护的比较研究。结果 :分子克隆和构建了原核重组表达质粒pGEX-3E ,表达和纯化了融合蛋白GST-3E ;单表位融合蛋白与重复多表位融合蛋白均能够与猪抗CSFV的阳性血清反应和兔抗E2的阳性血清产生免疫反应。在刺激兔体产生抗体方面 ,单表位融合蛋白刺激兔体产生抗体的能力较弱 ,而多表位融合蛋白则能够使兔体产生高效价的抗体。接种 10 0MID50 剂量猪瘟兔化弱毒 (HCLV)进行的兔体免疫攻毒保护试验表明 ,空白对照组和载体蛋白GST免疫组无保护作用 ,单表位融合蛋白免疫组具有一定的免疫保护作用 ,而重复多表位融合蛋白免疫组则完全能够抵抗猪瘟病毒的攻击。结论 :猪瘟病毒E2蛋白重复多表位的融合表达具有免疫保护作用 。
- 刘思国涂长春余兴龙张茂林刘伯华李作生
- 关键词：猪瘟病毒E2蛋白
- 犬联合多价核酸疫苗的实验免疫研究
- 犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)是引起犬传染病的主要病原体,严重危害犬的健康,基因疫苗具有安全和克服幼犬母源抗体对主动免疫干扰的优点。本研究根据CDV的H基因、CPV的VP1基因、犬2型腺病...
- 郑颖邱薇李丽红聂福平龙贵伟李作生张富强李江范泉水
- 关键词：基因免疫
- 文献传递
