李志
- 作品数：43 被引量：43H指数：5
- 供职机构：中国科学院水生生物研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学文化科学农业科学医药卫生更多>>
- 外源精子基因组整入雌核生殖银鲫卵子创制异源八倍体的有效方法被引量：3
- 2020年
- 银鲫(Carassius auratus gibelio Bloth)具有将其他鱼类精子的染色体组、染色体片段并入到卵核中协同发育的能力,但通过异精雌核生殖自发形成异源八倍体子代的概率极低。研究采用0.25%、0.5%、1%、2%和4%胰蛋白酶溶液处理白鲫精子10min后以及1%胰蛋白溶液处理白鲫精子5min、10min、15min、20min和25min后,分别与异育银鲫A+系成熟卵子受精;接着通过比较对照组和不同处理组合中精子结构和活力的变化,兼顾受精率、孵化率、成活率等繁育指标与较高的子代八倍体率,建立了一种将外源精子基因组整入雌核生殖银鲫卵子创制异源八倍体的有效方法。即采用1%胰蛋白溶液处理白鲫精子15min后与异育银鲫A+系成熟卵子受精,子代的平均存活率为(2.4±0.7)%,平均八倍体率可达(16.3±0.5)%。批量处理并结合流式细胞术筛选6月龄子代,获得57尾融入有白鲫精子染色体组的异源八倍体成鱼。研究为创制异育银鲫优异异源八倍体种质提供了一个简单易行的方法,创制的异源八倍体可作为后续培育生长快、抗病能力强的银鲫新品种的核心育种材料。
- 李志李志周莉周莉王忠卫汪洋张晓娟汪洋
- 关键词：银鲫白鲫多倍体育种胰蛋白酶
- 一种高效创制不育合成新多倍体鲫鱼的方法
- 本发明涉及一种高效创制不育合成新多倍体鲫鱼的方法，包括S1.父本双二倍体红鲫与母本双三倍体银鲫繁殖获得子代G1，从G1中筛选可育双四倍体雄鱼；S2.以可育双四倍体雄鱼为父本，与双二倍体红鲫雌鱼回交获得新双三倍体子代G2；...
- 桂建芳鲁蒙周莉汪洋王忠卫李志张勤灿朱子域李熙银张晓娟
- 一种玉兔百褶裙泰狮金鱼的创制方法
- 本发明涉及鱼类分子设计育种技术，尤其涉及一种玉兔百褶裙泰狮金鱼的创制方法。该方法包括靶点设计、显微注射、受精孵化步骤。本发明基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术，对色素基因oca2进行敲除后在F0代金鱼上即产生了具有...
- 余鹏桂建芳汪洋周莉李志李亮亮杨小丽
- 文献传递
- 一种百褶裙泰狮金鱼的批量繁育方法
- 本发明涉及鱼类繁殖技术，尤其涉及一种百褶裙泰狮金鱼的批量繁育方法。该方法包括苗种培育、亲本培育、人工授精和雌核生殖步骤。本发明建立了泰狮金鱼的高效繁育方法，实现金鱼的连续产卵，且不受季节控制，为依靠鱼卵进行的实验研究提供...
- 余鹏桂建芳周莉汪洋李志李亮亮杨小丽
- 文献传递
- 一种高效创制银鲫新多倍体雌核生殖克隆系的方法
- 本发明涉及一种高效创制银鲫新多倍体雌核生殖克隆系的方法，包括S1.创制可育双四倍体鲫：母本双三倍体银鲫与父本双二倍体红鲫繁殖获得子代G1，从G1中筛选可育双四倍体雄鱼；S2.创制新双三倍体群体：以可育双四倍体雄鱼为父本，...
- 鲁蒙桂建芳周莉李志王忠卫汪洋李熙银张晓娟
- 银鲫转录调控因子lbh-b cDNA克隆与表达分析
- 2018年
- Lbh(Limb-bud and heart)基因是脊椎动物中高度保守的转录调控因子,在早期胚胎发育及某些人类疾病的发病过程中发挥着重要作用。我们前期在银鲫(Carassius gibelio)垂体转录组中筛选到一个在垂体中大量表达的基因lbh-b。为了进一步研究lbh基因在银鲫的表达特征,首先采用RACE方法克隆了银鲫lbh基因家族的成员lbh-b基因(Cglbh-b)。Cglbh-b的c DNA全长1526 bp,开放阅读框549 bp,共编码182个氨基酸。生物信息学分析表明Cg Lbh-b蛋白与其他脊椎动物的Lbh蛋白同源性在68%以上,可能也是无序蛋白质家族的成员之一。成体组织RT-PCR分析表明Cglbh-b仅在银鲫的垂体、端脑、卵巢及眼睛中表达。不同胚胎发育时期的表达分析表明,在受精卵至原肠胚中Cglbh-b转录产物是以母源形式存在的m RNA,其合子转录起始于尾芽期。胚胎整体原位杂交结果显示从受精后2d到受精后3d,Cglbh-b大量表达于脑和眼睛。此外,随着卵子成熟Cglbh-b在银鲫垂体中的表达上调。这些结果暗示,Cglbh-b可能在调控银鲫脑和眼睛的发育以及卵子成熟过程中发挥着重要作用。
- 李文华汪洋李志桂建芳周莉
- 关键词：银鲫胚胎发育
- 一种高效创制黄河鲶mstn基因突变体的方法
- 本发明属于鱼类遗传育种领域，具体公开了一种高效创制黄河鲶mstn基因突变体的方法。本方法针对黄河鲶<I>Myostatin‑</I>肌肉生长抑制素基因设计靶位点，合成gRNA，与<I>Cas9</I>蛋白共同显微注射到黄...
- 李志李熙银汪洋王忠卫周莉王焘韩笑俞兆曦连总强桂建芳
- 文献传递
- 多倍体银鲫F系bmp15不同等位基因的分子特征、基因组结构和表达模式被引量：1
- 2020年
- 为探究骨形态发生蛋白15(Bone morphogenetic protein 15, bmp15)在银鲫(Carassius gibelio Bloch) F系卵巢发育过程中的表达特征,研究采用cDNA末端快速扩增(RACE)方法首先从银鲫F系卵巢cDNA中克隆了2个bmp15部分同源基因(Homeologs),将其命名为Cgbmp15a和Cgbmp15b,它们各自具有3个不同等位基因。不同脊椎动物Bmp15蛋白序列多重比对和系统进化树均表明,银鲫为异源六倍体,在其进化历程中发生了两轮多倍化,其中早期的异源多倍化整合了来自2个原始祖先的染色体组,导致银鲫和鲫的四倍体共同原始祖先基因组中包含bmp15a和bmp15b;随后第二轮同源多倍化最终导致银鲫存在6个bmp15等位基因。bmp15基因及其邻近基因同线性分析表明,银鲫在形成异源多倍体后,其基因组发生了复杂的变化,包括bmp15邻近基因的丢失。Cgbmp15a和Cgbmp15b均主要在卵巢中表达,在皮质泡期卵母细胞中表达量最高;无论是在银鲫成体组织还是不同发育阶段的卵子中, Cgbmp15a的表达水平显著高于Cgbmp15b的表达水平。在孕酮激素DHP体外诱导银鲫F系GV1期卵母细胞6h后, Cgbmp15a开始上调表达,诱导8h后达到最高表达水平,随后下降;而Cgbmp15b在诱导8h后表达水平有微弱上调,随后下降。上述的结果表明, Cgbmp15a和Cgbmp15b在银鲫F系成体组织和不同发育和成熟阶段的卵子中,均表现出偏性表达的特征,暗示Cgbmp15a在银鲫的卵母细胞发育和成熟中起着主要作用。
- 江诗雨汪洋周莉周莉李志桂建芳
- 关键词：银鲫BMP15
- 银鲫卵母细胞体外诱导成熟技术的建立被引量：2
- 2017年
- 研究以银鲫为材料,根据银鲫(Carassius auratus gibelio)卵母细胞生发泡(Germinal vesicle,GV)边移程度及剥离GV中减数分裂前期染色体的凝集状态,将银鲫Ⅳ时相的卵母细胞分为GV0、GV1、GV2和GV3四个时期;并进一步比较了分别处于这4个时期银鲫卵母细胞体外诱导培养的成熟率、卵裂率和孵化率。结果表明,GV1期之后的卵母细胞均可有效进行体外诱导成熟,可正常受精发育,由于GV1期卵母细胞有较长时间用于显微操作,因此GV1期卵母细胞被选为进行体外诱导的最早时期的卵母细胞。以GV1期卵母细胞为研究材料,摸索了银鲫卵母细胞体外诱导成熟的适宜条件:取GV1期的Ⅳ时相卵母细胞,放置于pH 8.5、加有1μg/m L孕酮激素(17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one,DHP)的格氏平衡盐溶液(Gey’s balanced salt solution,GBSS)中,在23℃培养箱中体外诱导12h后,将滤泡膜剥离后再进行人工体外授精,其所获胚胎的孵化率可达55.5%。此外,将体外转录合成的带GFP标签的h2af1o m RNA注射到GV1期卵母细胞,发现经显微操作和体外诱导后不仅可以通过GFP绿色荧光信号活体观察GVBD、受精、卵裂和早期胚胎发育的全过程,而且诱导成熟的卵子仍可正常受精和胚胎发育。研究建立的银鲫卵母细胞体外诱导成熟技术为银鲫和其他鱼类卵母细胞发育过程研究及其相关基因和细胞显微操作提供了技术平台。
- 李志汪洋周莉李熙银张晓娟周剑桂建芳
- 关键词：银鲫卵母细胞成熟体外诱导显微注射
- 处于性腺不同发育阶段斜带石斑鱼垂体的EST表达差异分析被引量：2
- 2007年
- 斜带石斑鱼是重要的海产经济鱼类,在其个体发育过程中存在先雌后雄的天然性反转现象。垂体是调节生长和生殖等生理过程的重要内分泌器官。构建了斜带石斑鱼分别处于卵巢发育起始和性反转后期的垂体SMARTcDNA的质粒文库,并通过测序分别筛选到232个和258个表达序列标签(expressed sequence tags,EST)。将所得EST与GenBank数据库中的序列进行比对,结果表明,处于卵巢发育起始和性反转后期斜带石斑鱼垂体EST中,激素所占比例均为最高,分别为40.5%和34.9%。进一步比较分析了这两个性腺发育时期斜带石斑鱼垂体EST中各种激素相对表达丰度,表明生长/催乳激素家族(GH、PRL和SL)和阿黑皮素原(POMC)表达水平下降;促性腺激素α亚基(GTHα)表达水平急剧上升,促滤泡激素β亚基(FSHβ)、促黄体激素β亚基(LHβ)表达水平上升。
- 李创举周莉姚波夏伟李志汪洋桂建芳
- 关键词：斜带石斑鱼性反转垂体EST
