杨丽华
- 作品数：13 被引量：15H指数：2
- 供职机构：华市人民医院更多>>
- 发文基金：金华市科技计划项目国家自然科学基金金华市科学技术研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Isolate密度梯度离心法和上游法对精子DNA碎片率及人工授精结局的影响被引量：6
- 2020年
- 目的比较Isolate密度梯度离心法和上游法对精子DNA碎片指数(DFI)变化及宫腔内人工授精(IUI)结局的影响。方法328例行IUI的患者,按精子优化方法分为Isolate密度梯度离心法(n=164)和上游法(n=164)。精子优化前分为DFI≤20%组(n=200)和DFI>20%组(n=128)。分析两种精子优化前后精子DFI的变化及对IUI结局的影响。结果精子优化前Isolate密度梯度离心法和上游法之间的精子活力和精子DFI差异无统计学意义(P>0.05);处理后Isolate密度梯度离心法和上游法的精子活力均显著提高,且精子DFI显著降低(P<0.05)。处理后的精子活力,上游法显著高于Isolate密度梯度离心法(P<0.05)。处理后的精子DFI,Isolate密度梯度离心法和上游法在DFI≤20%中差异无统计学意义(P>0.05),但在DFI>20%中Isolate密度梯度离心法显著低于上游法(P<0.05)。IUI后的临床妊娠率,在DFI≤20%中的Isolate密度梯度离心法和上游法之间差异无统计学意义(P>0.05);在DFI>20%中Isolate密度梯度离心法显著高于上游法(P<0.05),变化趋势与处理后的精子DFI一致。结论Isolate密度梯度离心法处理精液后降低精子DNA碎片的效果优于上游法,且精子DFI可影响IUI的临床妊娠结局。
- 朱佳余柯达陈晓毛佳婷杨丽华邹立波
- 关键词：宫腔内人工授精
- UTX基因上调对肾癌786-O细胞增殖的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 研究UTX基因过表达对肾癌细胞增殖的影响.方法 通过细胞转染UTX质粒过表达UTX基因,采用实时定量PCR和western blot方法检测转染效率,运用MTT法检测其对786-O增殖的影响.结果 成功构建含有UTX基因的真核表达载体,获得UTX上调表达的786-O细胞,转染UTX质粒后肾癌细胞增殖能力显著降低,上调UTX基因表达的786-O-pCMV-UTX-HA与空白对照细胞786-O相比在24h、48h和72h细胞活力分别降低30.24％、33.88％和48.97％（P＜0.01）.结论 UTX基因上调可以显著抑制肾癌细胞增殖.
- 王旭亮江智茂杨丽华李彩灵桂耀庭蔡志明
- 关键词：肾肿瘤基因
- 剂量敏感的性别反转先天性肾上腺发育不良基因DAX-1的研究现状
- 2016年
- 下丘脑-垂体-肾上腺一性腺轴（HPAG轴）是人体重要的内分泌轴之一，轴上相关基因的功能引起了研究学者们的普遍关注，由于大多数基因表达异常可使青春期发育受损，随后由于下丘脑．垂体对性腺或其基因有重要促进作用的因子缺乏，最终引起生殖系统发育异常。
- 杨丽华桂耀庭
- 关键词：性逆转性腺性腺功能减退症
- DAX-1真核表达载体的构建及其活性的检测
- 2021年
- 目的克隆剂量敏感的性别反转-先天性肾上腺发育不良基因1(DAX-1)的cDNA,构建带HA多肽标签的DAX-1真核表达载体,并检测其在小鼠肾上腺皮质瘤细胞(Y-1)中的转录活性.方法应用RT-PCR法从人睾丸中扩增DAX-1,将测序正确的PCR产物克隆至3'端带HA多肽标签pcDNA3.1(+)真核表达载体中,以脂质体方式将该质粒或pcDNA3.1(+)-3'HA空载与类固醇激素灵敏调节蛋白(StAR)启动子荧光素酶报告基因载体共转染至Y-1细胞中,24 h后利用双荧光素酶报告系统检测DAX-1对StAR表达的影响.结果RT-PCR获取编码DAX-1基因的全序列cDNA,大小为1413bp;DNA测序和PCR方法证实DAX-1基因成功克隆到pcDNA3.1(+)-3'HA真核表达载体中;瞬时转染Y-1细胞,经报告基因检测结果显示DAX-1与StAR共转染组(实验组)的荧光素酶活性是空载组(对照组)的1/3.结论成功构建人DAX-1真核表达载体,并在Y-1细胞中初步活性分析得知所克隆的DAX-1存在转录活性,为进一步研究DAX-1功能及调控机制奠定实验基础.
- 杨丽华王芳余柯达邹立波
- 关键词：STAR
- 不同卵子质量下精子DNA碎片对体外受精临床结局的影响被引量：1
- 2021年
- 目的探讨不同卵子质量下精子DNA碎片对体外受精(IVF)临床结局的影响。方法回顾性分析2018年9月至2019年12月在金华市人民医院生殖医学中心接受IVF治疗的896组不孕不育夫妇。促排卵方案根据女方卵巢储备功能制定,正常行促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)长方案(LP,593例),下降行GnRH-a短方案(SP,303例)。根据LP/SP中精子DNA碎片指数(DFI)分为正常组(DFI<10%,300例/150例)、轻度组(10%≤SDFI<20%,206例/104例)和重度组(DFI≥20%,87例/49例),分别比较三组的临床结局。结果在LP中,三组间的受精率、卵裂率、优质胚胎率、胚胎种植率、临床妊娠率和异位妊娠率差异均无统计学意义(P>0.05),重度组的早期流产率比正常组和轻度组高,但三组间差异无统计学意义(P>0.05)。在SP中,三组间的受精率、卵裂率、优质胚胎率和异位妊娠率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。胚胎种植率和临床妊娠率三组间比较,差异具有统计学意义(P<0.05),重度组的胚胎种植率显著低于正常组(P<0.0167),轻度组和重度组的临床妊娠率也分别显著低于正常组(P<0.0167)。早期流产率三组间差异虽然有统计学意义(P<0.05),但两两之间比较,差异无统计学意义(P>0.0167)。结论DFI对IVF临床结局有不利影响,尤其是卵巢储备功能下降的治疗周期,卵子质量可能在DFI对IVF影响中起决定作用。
- 柳祖波余柯达杨丽华师帅刘鸿邹立波
- 关键词：卵子质量体外受精
- 体外授精工作箱
- 本实用新型公开了一种体外授精工作箱，包括带有恒温工作台面的恒温工作台，恒温工作台的内腔中设置有蓄水盘；还包括位于恒温工作台面之上的透明保温罩；恒温工作台面密封的被笼罩于透明保温罩内；在透明保温罩的正面设置与透明保温罩内腔...
- 余柯达毛佳婷杨丽华陈晓师帅邹立波
- 文献传递
- 剂量敏感的性别反转先天性肾上腺发育不良基因1与雄激素受体相互作用的研究被引量：1
- 2014年
- 目的：剂量敏感的性别反转-先天性肾上腺发育不良基因1（dosage-sensitive sex reversal, adrenal hypoplasia critical region, on chromosome X, gene 1, DAX1）和雄激素受体（androgen receptor, AR）在男性生殖系统中均发挥着不可替代的作用，以往研究证明二者之间存在某些联系，本实验主要检测DAX-1和AR蛋白在细胞内的相互作用情况。方法构建人的带HA多肽标签的DAX-1真核表达载体,以脂质体方式将该质粒和雄激素受体真核表达质粒共转染至非洲绿猴肾成纤维细胞（COS-7）中，转染48h后收集细胞提取总蛋白，利用免疫共沉淀技术检测DAX-1和AR蛋白在细胞内的相互作用。结果成功构建了人DAX-1真核表达载体；免疫共沉淀实验结果显示DAX-1和AR蛋白在COS-7细胞内可以相互作用。结论 DAX-1与AR蛋白在细胞内可能存在相互作用，为后续研究DAX-1功能、突变致病及DAX-1与AR的作用机制奠定基础。
- 杨丽华李俞池王旭亮石敏江智茂桂耀庭
- miR-9-5p调控雄激素受体的表达促进卵巢颗粒细胞增殖被引量：2
- 2021年
- 目的分析微小RNA-9-5p(miR-9-5p)在多囊卵巢综合征(PCOS)中的诊断价值,并探讨对卵巢颗粒细胞(KGN)增殖的作用机制。方法采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析miR-9-5p在50例PCOS患者(实验组)及50例健康女性(对照组)血清中的表达特征。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估miR-9-5p在诊断PCOS中的曲线下面积(AUC)、特异度及敏感度。培养KGN细胞并分为空白组、阴性转染组及转染组,分别采用MTT及流式细胞技术检测干扰miR-9-5p后KGN增殖和细胞周期的变化。利用双荧光素酶报告基因实验检测miR-9-5p对雄激素受体(AR)的直接调节作用。采用western blot技术分析干扰miR-9-5p后KGN中AR蛋白表达水平的变化。结果与对照组相比,miR-9-5p在PCOS患者血清中的表达显著升高(P<0.05)。ROC显示,miR-9-5p在诊断PCOS中AUC为0.76,敏感性为65.43%,特异性为74.09%。与空白及阴性转染组相比,转染拮抗剂后KGN中miR-9-5p表达水平显著降低(P<0.05)。干扰miR-9-5p显著降低KGN增殖(P<0.05),并抑制细胞周期G1到S期的转变,表现为G0/G1期细胞比例增加,而S期细胞比例减少。双荧光素酶报告基因实验显示,AR是miR-9-5p的靶基因,miR-9-5p可直接与AR mRNA 3’-非编码区互补结合而降低KGN中AR蛋白的表达水平。结论miR-9-5p在PCOS患者血清中表达上调,并可能是一种新的PCOS诊断标志物。在机制上,miR-9-5p通过直接调控AR而促进KGN增殖。
- 王芳杨丽华余柯达何健英邹立波
- 关键词：多囊卵巢综合征颗粒细胞增殖雄激素受体
- 女性肿瘤患者卵巢生育力保护策略的研究进展
- 2018年
- 随着放化疗的临床应用,肿瘤患者的生存期得到了明显延长。但放化疗易引起患者卵巢储备功能下降,影响患者生育能力。如何保护女性肿瘤患者的卵巢功能逐渐引起重视。近年来,关于女性生育力保护的相关研究取得了较大的进步,本文就放化疗对卵巢功能的影响、卵巢功能的保护策略作一综述。
- 杨丽华邹立波
- 关键词：放疗化疗冷冻保存
- miR-105-3p在多囊卵巢综合征患者中的表达及对人卵巢颗粒细胞增殖凋亡的影响
- 2020年
- 目的观察microRNA-105-3p(miR-105-3p)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者外周血中的表达特征及其对体外人卵巢颗粒细胞(KGN)增殖和凋亡的影响。方法选择PCOS患者作为PCOS组,同龄健康女性作为对照组,记录临床信息和生化指标,并采用荧光定量PCR(qRT-PCR)分析两组中miR-105-3p的表达量。再将miR-105-3pmimics转染KGN细胞,采用MTT比色法和酶联免疫吸附测定观察miR-105-3p表达改变对KGN细胞增殖和凋亡的影响。结果与对照组比较PCOS组患者体重指数、黄体生成素、雌二醇、催乳素、总睾酮、游离睾酮含量、卵巢体积和卵巢滤泡数均较高,而卵泡刺激素含量和每年月经数较低(P<0.05)。miR-105-3p在PCOS组中的表达量显著低于对照组(P<0.05)。KGN细胞转染后,miR-105-3p mimics中miR-105-3p的表达量显著高于mimics阴性对照(P<0.05)。MTT比色法显示体外转染miR-105-3p mimics至KGN细胞可显著抑制细胞增殖(P<0.05)。miR-105-3p mimics转染的KGN细胞中Caspase-3、Bax显著高于mimics阴性对照(P<0.05),Bel-2反之。结论miR-105-3p在PCOS外周血中表达下调,体外过表达miR-105-3p可显著抑制KGN细胞生长并促进凋亡,捉示miR-105-3p与PCOS病理过程密切相关,并可能作为PCOS诊治的新候选物标志物。
- 王芳余柯达杨丽华何健英毛佳婷邹立波
- 关键词：多囊卵巢综合征细胞增殖
