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洪莹芬
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中山大学中山医学院
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何江
中山大学中山医学院
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文娅
中山大学中山医学院
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中国汉族人群apoB VNTR等位基因的多态性分析及其分型标准物的克隆制备
2015年
目的对中国汉族人群的apoB VNTR等位基因进行分布频率、序列结构等多态性分析,并通过分子克隆技术制备apoB VNTR等位基因分型标准物。方法通过PCR扩增并结合电泳、测序等方法分析人群apoB VNTR等位基因的多态性,并将该人群中得到的所有类型等位基因片段插入pUC重组质粒,经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后,制备出apoB VNTR等位基因分型标准物。结果所检测人群中共检测出16种apoB VNTR等位基因,发现核心序列存在变异体,并成功制备出分型标准物。结论对apoB VNTR的多态性分析应结合等位基因的分布频率与核心序列的结构,所制备的apoB VNTR等位基因分型标准物使apoB VNTR电泳法分型更加准确。
骆晓枫
洪莹芬
何江
单翼龙
黎扬斯
林建勋
谢金卫
周俊宜
周俊梅
关键词:
APOB
生育酚结合蛋白基因重组腺相关病毒的制备及抗癌作用
2011年
目的制备生育酚结合蛋白(TAP)重组腺相关病毒,并探讨其对前列腺癌生长的作用。方法构建重组腺相关病毒质粒pSNAV-TAP-EGFP,酶切、聚合酶链反应(PCR)、测序。225cm2细胞培养瓶中,接种293T细胞,以重组质粒转染。扩增、纯化病毒,并转染DU-145细胞,噻唑蓝(MTT)比色法观察第2、4、6天的细胞增殖。结果成功构建pSNAV—TAP—EGFP质粒,并制备滴度6.4×10^11vg/ml、纯度95%的rAAV2-TAP。该病毒转染DU-145细胞后TAP表达量明显上升。转染后第4天,TAP转染组的细胞吸光度(A值)0.546±0.072,对照组以及空载体转染组的A值分别为0.673±0.015、0.638±0.051,生长明显受到抑制(P〈0.05)。至第6天各组细胞生长差异更显著。结论成功制备高滴度的rAAV—TAP—EGFP病毒,并可抑制前列腺癌细胞的生长。
李小娟
王喻
朱宝益
叶春伟
杨钦泰
黄振华
洪莹芬
文娅
温星桥
关键词:
重组腺相关病毒
前列腺癌
增殖
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