王瀚
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卵巢上皮性癌组织和细胞中BRCA1基因的DNA甲基化程度与其mRNA和蛋白表达的关系
- 2007年
- 文献报道，90％的家族性卵巢上皮性癌（家庭性卵巢癌，指有家族史的卵巢癌患者）与BRCA1基因突变有关，而BRCA1基因突变仅发生在极少的散发性卵巢癌（指患者的一级和二级亲属中未发现卵巢癌患者）中，但无论是在家族性还是散发性卵巢癌中，约90％的患者其癌组织中的BRCA1 mRNA和蛋白表达水平下降。除基因突变外，引起肿瘤抑制基因失活的另一个机制就是DNA甲基化。
- 贺小红李敏王瀚王泽华
- 关键词：BRCA1基因突变卵巢上皮性癌组织蛋白表达水平
- 人宫颈癌发生中p16INK4A表达缺陷与其外显子甲基化的关系被引量：1
- 2006年
- 目的研究抑癌基因p16I NK4A在宫颈癌发生中的表达变化,分析这种差异表达与甲基化的关系。方法逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测30例宫颈癌组织标本、48例宫颈上皮内瘤样病变(CI N)组织(CI NⅠ12例、CI NⅡ16例、CI NⅢ20例)中p16I NK4A基因的表达。Western Blot分析P16I NK4A蛋白水平的表达。甲基化特异性的PCR技术(MSP)对p16I NK4A DNA进行甲基化分析。以每例标本相应正常宫颈组织作为对照。结果70%(21/30)宫颈癌组织中p16I NK4A表达下降或缺失,与正常宫颈组织、CI NⅠ和CI NⅡ中的p16I NK4A表达相比,差异具有统计学意义(P<0.05),与CI NⅢ相比差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白的表达检测也得到相似的结果。MSP检测发现宫颈癌组织中有9例p16I NK4A外显子甲基化,甲基化率为30%,其中8例年龄小于40岁,提示甲基化易于出现在年轻患者。而CI N组织中仅CI NⅢ发现1例甲基化,说明甲基化随着宫颈病变的发展而增多。分析甲基化与p16I NK4A表达的关系,发现42.86%(9/21)的宫颈癌组织中p16I NK4A表达下降与甲基化有关,甲基化的宫颈癌组织中p16I NK4A表达均下降。结论p16I NK4A作为一种抑癌基因,它的表达缺失或下降在宫颈癌的发生中起重要作用,外显子甲基化是导致其表达缺陷的部分原因。
- 李敏吴素慧贺小红王瀚李晓艳董卫红王泽华
- 关键词：P16INK4A宫颈癌甲基化
- 卵巢上皮性癌组织中p16INK4A基因表达缺陷的意义及其与甲基化的关系被引量：8
- 2006年
- 目的研究抑癌基因p16INK4A在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织及细胞系中的表达变化,分析其表达变化与甲基化的关系。方法选取7种卵巢癌细胞系、18份卵巢癌组织和10份正常卵巢组织为研究对象。采用甲基化特异性PCR方法检测p16INK4A基因甲基化状态;RT-PCR技术检测p16INK4A基因的mRNA表达;蛋白印迹(western blot)法检测P16INK4A蛋白的表达。5-杂氮-2′-脱氧胞苷对p16INK4A基因甲基化的卵巢癌细胞进行去甲基化处理,再次进行p16INK4A基因的mRNA和蛋白表达的检测,以及p16INK4A基因甲基化的分析。检测5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理前后卵巢癌细胞的生长情况;并将处理前后的细胞接种于裸鼠,观测肿瘤的体积、重量。结果3种卵巢癌细胞系(Anglne、SW626和OVCAR3细胞)、6份卵巢癌组织中存在p16INK4A基因甲基化,卵巢癌细胞和卵巢癌组织中的甲基化率分别为3/7和33%(6/18)。卵巢癌细胞系、卵巢癌组织和正常卵巢组织中,p16INK4A基因的mRNA相对含量的平均值分别为0·34±0·11、0·81±0·13、1·52±0·12,蛋白相对含量的平均值分别为0·56±0·14、1·32±0·12、2·09±0·11,卵巢癌细胞系、卵巢癌组织分别与正常卵巢组织相比,差异均有统计学意义(P<0·05)。有甲基化表现的卵巢癌细胞和组织中p16INK4A基因的mRNA和蛋白表达均下降。5-杂氮-2′-脱氧胞苷处理能使p16INK4A基因甲基化的卵巢癌细胞中的p16INK4A基因的mRNA和蛋白重新表达或表达增高。与去甲基化处理前比较,去甲基化处理后Anglne、SW626和OVCAR3细胞的生长速度均减慢;接种去甲基化处理的OVCAR3细胞的裸鼠中,肿瘤体积和重量明显减小,分别为(0·243±0·022)cm3、(0·035±0·004)g。结论p16INK4A基因的表达下降或缺失在卵巢癌的发生中起重要作用,DNA甲基化是其表达缺陷的原因,去甲基化处理可以恢复p16INK4A基因的表达并抑制卵巢癌细胞的增殖。
- 李敏黄在菊董卫红李晓艳王晓翊贺晓红王瀚王泽华
- 关键词：蛋白质P16基因P16脱氧胞苷
- TMS1/ASC基因启动子甲基化与卵巢癌发生的关系被引量：3
- 2006年
- 目的探讨TMS1/ASC(targetofmethylation-inducedsilencing)基因在卵巢癌细胞株及组织中的甲基化状态及该基因表达在卵巢癌发病机制中的作用。方法选取人卵巢癌细胞株A2780,SKOV3,Angle,CAOV3,OVCAR3,SW626,COC1,以及18例卵巢癌组织和10例正常卵巢组织作为研究对象,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测卵巢癌细胞株以及卵巢癌组织中TMS1/ASC基因启动子区域甲基化的状态,用RT-PCR和WesternBlotting法分别检测其mRNA和蛋白的表达。用去甲基化药物5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理TMS1/ASC甲基化阳性细胞株并分析其mRNA和蛋白的表达的变化。结果4株卵巢癌细胞(A2780,SKOV3,Angle,SW626)和7例卵巢癌组织中检测出TMS1/ASC基因的异常甲基化。发生甲基化的细胞株TMS1/ASC基因的mRNA和蛋白表达较未发生甲基化的细胞株明显下降。10例正常卵巢组织中均未发现TMS1/ASC甲基化,差异有统计学意义(P<0·05)。用去甲基化药物5-Aza-CdR处理TMS1/ASC甲基化阳性细胞株SKOV3后,该细胞株中TMS1/ASC基因恢复表达。结论卵巢癌中存在TMS1/ASC基因甲基化,这可能是导致该基因沉默的重要原因,并在卵巢癌的发病机制中起作用。
- 王瀚李敏贺小红王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤甲基化
