王玉梅
- 作品数：40 被引量：53H指数：5
- 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学社会学经济管理更多>>
- 游离前列腺特异性抗原检测试剂盒质量状况分析被引量：1
- 2018年
- 目的:对肿瘤标记物游离前列腺特异性抗原(f-PSA)检测试剂盒质量状况进行分析评价。方法:采用企业产品标准与行业标准,对国家监督抽验来源的15家22批次国产和7家7批次进口f-PSA检测试剂盒的准确度、线性、检测限、重复性4个性能指标进行评价分析。结果:本次共抽检22批次效期内产品,7批次近效期产品。采用产品标准检测结果显示,22批次效期内抽样产品中,20批次产品达到要求;7批次近效期抽样产品有6批次达到要求。采用行业标准检测结果显示,22批次效期内抽样产品,按校准品的平均效价评价准确度,有21批次产品符合要求;按每个校准品的效价评价准确度,有14批次产品符合要求。对效期内15家国产试剂盒和7家进口试剂盒的性能进行比较,统计学结果显示,国产、进口试剂盒质量无显著性差异(P>0.05)。结论:目前上市的f-PSA检测试剂盒整体质量较好,国产、进口同类试剂盒质量风险差别不大,部分产品尚存在质量标准及质量方面的问题。
- 王玉梅刘艳邵安良杨昭鹏
- 关键词：肿瘤标记物前列腺特异性抗原检测试剂盒性能指标
- 一种高效制备人β2微球蛋白标准物质的方法和应用被引量：1
- 2018年
- 目的构建重组人β2微球蛋白表达体系,高效快速获取β2微球蛋白,为临床实验室检测参考物质的制备奠定基础。方法优化人β2微球蛋白序列,人工合成优化序列片段并与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至pRSF-Duet载体以构建重组人β2微球蛋白表达质粒。使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)对重组质粒进行诱导表达,TEV蛋白酶切除MBP,全自动生化仪测定β2微球蛋白浓度。对重组蛋白在4℃和–20℃储存条件下的稳定性进行检测,对β2微球蛋白纯品与校准品的互通性进行分析。结果成功构建重组人β2微球蛋白表达质粒,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)成功诱导重组蛋白表达,MBP-β2微球蛋白(MBP-β2-MG)浓度可达100 mg/L,β2微球蛋白浓度可达185 mg/L。在4℃和–20℃储存条件下监测64周,β2微球蛋白稳定存在。β2微球蛋白纯品与RANDOX生化校准品互通性良好。结论通过密码子优化,成功构建了重组β2微球蛋白的高效表达系统,β2微球蛋白可溶性高,稳定性好,与国际通用校准品互通性好,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求。
- 邹丽辉王萌黄薇张恩毅肖飞王玉梅
- 关键词：Β2微球蛋白重组蛋白质类
- 5种神经元特异性烯醇化酶检测试剂盒准确性分析被引量：6
- 2014年
- 目的:对国内已上市的5种神经元特异性烯醇化酶检测试剂盒(NSE试剂盒)检测样本的准确性进行评价。方法:分别制备20 ng·mL-1和100 ng·mL-12个浓度的NSE样品,选择方法原理为时间分辨免疫荧光法(TRFIA)、电化学发光免疫法(ECLI)、化学发光免疫法(CLIA)、酶联免疫法(ELISA)等5种NSE试剂盒分别对上述样品进行测定,并对线性、最低检出限、批内精密度、批间精密度和准确性进行分析。结果:5种试剂盒剂量曲线线性、最低检出限和精密度均能满足检测要求,但是准确性指标偏差较大,尤其是低浓度样品的准确性,不同试剂盒对同一样本的检测结果有显著性差异(P<0.01)。结论:行业标准和标准品的缺失给体外诊断试剂产品的市场监管带来困难,应建立NSE国家标准品,并制定产品的质量标准,从而较好的控制试剂盒的准确性,使不同试剂盒的检测结果具有较好的可比性。
- 刘艳孙楠王玉梅高尚先陈鸿波
- 关键词：神经元特异性烯醇化酶体外诊断试剂小细胞肺癌
- 人胱抑素C参考物质制备方法的建立
- 2018年
- [目的]建立重组人胱抑素C(cystatin C)表达体系,获得可溶、稳定、高纯度的胱抑素C。[方法]密码子优化并人工合成人胱抑素C编码序列,与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至PRSF-Duet载体以构建重组人p MBP-CYSC PRSF表达质粒。使用大肠杆菌E. coli BL21(DE3) p Lys S对其进行诱导表达,SDS-PAGE鉴定蛋白纯度和分子量,全自动生化仪测定纯化蛋白浓度及稳定性。[结果]成功构建重组人p MBP-CYSC PRSF表达质粒并诱导表达,胱抑素C蛋白浓度可达500 mg/L,纯度可达90%,在4℃和-20℃储存条件下监测64 w,胱抑素C蛋浓度稳定,均在允许相对偏差5%以内。[结论]通过密码子优化,成功获得浓度为500 mg/L、纯度为90%、存储稳定性至少达到64 w的胱抑素C蛋白,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求。
- 邹丽辉邹丽辉王萌张恩毅黄薇张恩毅肖飞
- 关键词：重组蛋白表达
- 葡萄糖测定试剂盒(酶法）
- 本标准规定了葡萄糖测定试剂盒(酶法)的测定原理、要求、试验方法、标识、标签和使用说明书、包装、运输和贮存等。本标准适用于己糖激酶法和氧化酶法葡萄糖测定试剂盒,该试剂盒在临床检验中用于定量分析血清、血浆、尿液、脑脊液等体液...
- 王玉梅刘艳高尚先
- 关键词：葡萄糖试剂盒酶法医药
- 总IgE定量标记免疫分析试剂盒行业标准的验证
- 2014年
- 目的对总IgE定量标记免疫分析试剂盒行业标准可行性进行验证。方法按照拟定行业标准的要求,选择不同免疫分析方法的试剂盒,进行验证。结果外观、空白限、线性、准确度、精密度、稳定性等指标符合要求,特异性项目中有个别试剂盒对IgM、IgG的测定结果高于行业标准要求。结论总IgE定量标记免疫分析试剂盒行业标准制定合理,有助于规范此类试剂盒的技术要求和实验方法,从而提高此类试剂盒的产品质量,并为其监管提供依据。
- 孙楠于婷刘艳王玉梅高尚先
- 关键词：总免疫球蛋白E
- 一种活病毒快速检测方法及其应用
- 本发明涉及一种活病毒快速检测方法及其应用，属于生物检测技术领域。该检测方法，包括以下步骤：转染：将待测病毒接种于预先在细胞培养板培养得到的单层宿主细胞，转染培养；检测：在待测病毒接种后进入宿主细胞但未扩增的收样时间点收样...
- 徐丽明魏慧慧段晓杰张羽陈亮邵安良魏利娜张乐李天任王玉梅
- 甘油三酯测定试剂盒（酶法）
- 本标准规定了甘油三酯测定试剂盒(酶法)的测定原理、要求、试验方法、标识、标签和使用说明书、包装、运输和贮存。本标准适用于甘油三酯测定试剂盒(酶法)的质量控制,该产品用于体外定量测定人体血清或血浆中甘油三酯(TG)的量。
- 王玉梅黄杰刘艳高尚先
- 关键词：甘油三酯试剂盒酶法医药
- 人丙氨酸转氨酶高效重组表达体系的构建
- 2014年
- 目的：构建人丙氨酸转氨酶（ ALT）高效重组表达体系，为ALT相关参考物质的原料制备奠定基础。方法利用生物信息学方法优化编码人ALT核苷酸序列中的密码子，合成人ALT新的基因，并将其克隆至pRSF-Duet表达载体中。重组表达质粒pRSF-Duet-ALT转化大肠埃希菌BL21，以2 mmol/L的异丙基硫代半乳糖苷（ IPTG）诱导目的蛋白的表达，并通过改变诱导剂浓度、振摇速度及诱导温度优化表达条件，以产生可溶性蛋白。可溶性蛋白经镍离子柱亲和层析及分子筛层析纯化，以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（ SDS-PAGE）及蛋白质免疫印迹（ Western blot）鉴定蛋白的性质，并对重组蛋白的活性、不同储存条件下在血清基质中的稳定性进行检测。结果经过优化的ALT核苷酸密码子在大肠埃希菌中的使用频率均在10％以上；经表达优化，在IPTG 终浓度为2 mmol/L、25℃、150 rpm振摇8 h诱导条件下，可增加可溶性蛋白的产率；纯化后的目的蛋白经电泳及免疫印迹鉴定为谷丙转氨酶，活性可达80000 U/L。重组ALT在2～8℃、25℃均可稳定2～8 d，相对偏差均在5％以内。结论通过密码子优化，成功构建了重组ALT的高效表达系统，本重组蛋白可以达到作为参考物质原料的要求。
- 王玉梅徐超刘艳高尚先杨昭鹏
- 关键词：丙氨酸转氨酶重组蛋白质类密码子
- 肺炎衣原体IgG抗体检测试剂用国家参考品的制备和标定
- 2019年
- 目的:制备肺炎衣原体(Chlamydia pneumonia,CP)IgG抗体检测试剂的国家参考品。方法:利用国内外9个厂家ELISA试剂和免疫印迹法试剂对候选血浆样本进行筛选和确认,确定肺炎衣原体检测试剂国家参考盘。通过5家试剂生产厂家的协作标定最终确定国家参考品的质量标准,用一种试剂盒对确定的参考品盘的均匀性和稳定性进行全面考察。结果:参考品由10份支阴性参考品、10份阳性参考品、5份最低检测限参考品和1份重复性参考品组成。质量标准为:阴性参考品符合率至少为9/10;阳性参考品符合率至少为9/10;检出下限样本稀释度不低于1∶4;连续检测重复性参考品10次,其A值的RSD不高于10. 0%。该参考盘均匀性较好,-20℃长期保存稳定性较好,37℃保存影响其稳定性。结论:建立一套适用于ELISA方法的肺炎衣原体IgG抗体检测试剂用国家参考品,可用于该类试剂盒的质量评价。
- 刘艳周海卫沈舒田亚宾白东亭王玉梅张春涛
- 关键词：肺炎衣原体IGG抗体诊断试剂国家参考品酶联免疫分析法
