王轶
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中山大学中山医学院寄生虫学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫组织蛋白酶L1基因在大肠埃希菌中的表达被引量：2
- 2004年
- 目的 在原核表达体系大肠埃希菌中进行日本血吸虫组织蛋白酶L1(SjCL1)基因表达。 方法 通过PCR从质粒pcDNA3 SjCL1中扩增得到SjCL1基因 ,定向克隆至原核表达载体pGEX 4T 1中 ,构建重组质粒pGEX SjCL1,将该重组质粒转化大肠埃希菌JM10 9,转化子经异丙基 β D 硫代半乳糖苷诱导表达 ,采用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹法 (Westernblotting)分析SjCL1基因表达产物。 结果 获得长约 1kb的PCR片段 ,构建了pGEX SjCL1质粒。SDS PAGE和Westernblotting检测表达产物 ,相对分子质量为 62 0 0 0。
- 易冰李卓雅何蔼郑小英郑斌周豪杰王轶张瑞林余南詹希美
- 关键词：日本血吸虫组织蛋白酶类大肠埃希菌原核表达载体
- 广州管圆线虫成虫cDNA文库构建被引量：8
- 2003年
- 目的 构建广州管圆线虫成虫cDNA文库。方法 提取广州管圆线虫成虫总RNA ,用Clontech公司SMARTTMcDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA ,然后通过长距离PCR方法合成双链cDNA并扩增 ;PCR产物与λTripIE× 2载体连接并包装 ,建成未扩增文库 ;检测未扩增文库滴度和重组效率后 ,进行文库扩增及测定扩增文库的滴度。结果 经测定 ,未扩增文库滴度为 9 7× 1 0 6 pfu/ml,重组效率达 99 2 %以上 ,文库扩增后滴度达 9 1 3× 1 0 9pfu/ml。
- 梁瑜王轶何蔼李道宁俞慕华李卓雅张瑞琳詹希美
- 关键词：广州管圆线虫成虫CDNA文库广州管圆线虫病
