聂玉春
- 作品数:16 被引量:38H指数:4
- 供职机构:北京大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家攀登计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 陆龟疱疹病毒对中华鳖不致病
- 1999年
- 用在龟心细胞系(TortoiseHeartCellLine,THC)上增殖的陆龟疱疹病毒(Testudoherpesvirus,THV),分别腹腔接种巴西彩龟(Trachemysscriptasliders)和中华鳖(Trionyxsinensis)。水温21~28℃,饲养82d。感染彩龟出现明显的呼吸道症状及眼睑肿胀,继而死亡,取死亡彩龟内脏匀浆,用THC分离病毒,出现与接种THV完全一致的CPE。接种THC冻融液的对照彩龟正常。中华鳖饲养115d,对照及感染鳖均无异常。
- 聂玉春陆承平
- 关键词:中华鳖
- 猪瘟病毒的形态结构及侵染机理的研究被引量:4
- 2002年
- 聂玉春王镇周海霞邓宏魁丁明孝
- 关键词:猪瘟病毒CSFV
- SARS冠状病毒的假病毒及其制备方法和用途
- 本发明涉及SARS冠状病毒的假病毒及其制备方法和用假病毒进行SARS冠状病毒中和抗体及药物筛选研究方面的用途。所述假病毒是将SARS病毒的囊膜蛋白SPIKE参与到带有报告基因的缺损型病毒基因组的包装中而得到的。所述假病毒...
- 邓宏魁丁明孝聂玉春史萱铃王葳凌晨王在于翔任立晨
- 猪瘟病毒中国标准强毒株——F114株全长cDNA的构建被引量:19
- 2001年
- 应用RT PCR技术 ,分段克隆了猪瘟病毒中国标准强毒株F1 1 4株的全基因组 ,经测序验证 ,用DNAman软件比较分析与其它几个代表毒株的同源性 ,发现与Brescia、Alfort及C株核苷酸序列同源性分别为 96 80 % ,86 0 3%和 95 70 % ,氨基酸序列同源性分别为 98 54% ,93 33%和 97 41 %。将各段cDNA连接到pGEM T和pBluescriptⅡsk+质粒 ,得到两个亚克隆sk 0 1 64(即sk+质粒中插入片断为 1~ 6441nts,依次类推 )和sk 641 2 2 ,再将两个亚克隆连接成sk 1 2 2 97,即CSFV全长cDNA克隆。
- 聂玉春柯叶艳陈建国丁明孝
- 关键词:猪瘟病毒全长CDNA序列同源性
- 由标准强毒F114株全长cDNA克隆恢复猪瘟病毒被引量:11
- 2003年
- 通过RT-PCR获得猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)强毒株cF114株(中国标准强毒F114株经PK-15细胞增殖)全长基因组cDNA并测序. 与已知其他几株CSFV代表毒株F114, Brescia, Alfort和C株的核苷酸同源性分别为99.41%, 96.80%, 86.03%和95.70%; 氨基酸同源性分别为99.28%, 98.54%, 93.33%和97.41%. 将获得的各基因片段按病毒基因组顺序连接成全长cDNA, 插入pMC18质粒SalⅠ/ XbaⅠ之间, 得到含病毒全长基因组的重组质粒pMC12297. 用T7 RNA聚合酶进行体外转录, 转录出的RNA转染PK-15细胞, 细胞上清液经扩增后, 测定上清液中病毒滴度. 质粒来源的CSFV(vM12297)在抗原反应性和复制能力方面与父代病毒相似. 将疫苗毒C株囊膜蛋白基因E01和E2分别替换到pMC12297相应位置, 获得嵌合体基因组质粒pM/CE01和pM/CE2, 体外恢复获得嵌合体病毒vM/CE01和vM/CE2. 两种嵌合体病毒均能感染PK-15, SK-6和原代猪睾丸细胞, 间接免疫荧光检测显示较vM12297弱, 在PK-15细胞上滴度达到8×105 F-PFU/mL. 这一工作为进一步研究和探讨CSFV增殖与致弱的机理提供了重要的实验和理论资料.
- 聂玉春陈建国丁明孝
- 关键词:猪瘟病毒全长CDNA克隆转染体外转录氨基酸核苷酸
- 抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的多肽类药物
- 本发明涉及抑制SARS冠状病毒侵染宿主细胞的多肽类抗病毒药物,所述药物的通式为:X-SEQ-Z,其中SEQ表示SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.21所示的21个氨基酸序列。经药效学实验测试,本发明的多肽类药物可...
- 邓宏魁丁明孝袁克湖庆婷婷陈坚熊梓锴聂玉春王在易凌江鹏飞任立晨
- 猪瘟病毒全长cDNA构建及其感染机理的研究
- 猪瘟是严重影响养猪业生产的烈性传染病之一,猪瘟病毒(classical swine fevervirus, CSFV)是引起猪瘟的致病原.CSFV是单股正链RNA病毒,属于黄病毒科、瘟病毒属.但CSFV的致病机理至今尚不...
- 聂玉春
- 关键词:猪瘟病毒水疱性口炎病毒疫苗
- 特异寡聚核苷酸对猪瘟病毒在细胞中增殖抑制作用的研究被引量:4
- 2001年
- 本实验探讨了寡聚核苷酸对CSFV复制的影响以及作为抗CSFV新型药物的可行性。实验结果表明针对CS FV 5’端非编码区NS3蛋白丝氨酸蛋白酶功能区的寡聚核苷酸对CSFV复制均有显著的抑制作用 ,而针对CSFV 3’端非编码区寡聚核苷酸仅有轻微抑制作用 ,5′端寡聚核苷酸具有最佳抑制作用 ,同时发现相应序列中正义聚核苷酸的作用要优于反义寡聚核苷酸 ;脂质体介导转染能显著提高寡聚核苷酸对CSFV复制的抑制作用。这些初步结果也提示 ,CSFV 5’端和 3’端非编码区对CSFV复制的重要性和作用有所不同。
- 周鹏程聂玉春曹圻陈建国丁明孝
- 关键词:猪瘟病毒寡聚核苷酸抗病毒
- 水疱性口炎病毒L蛋白N端存在新的定位信号
- 2003年
- 水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)L蛋白是该病毒复制酶的主要成分,分子量约为241kD。通过构建L蛋白缺失突变体与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因的方式,将融合蛋白置于T7启动子或CMV启动子下游,在多种动物细胞中瞬时表达了重组的融合蛋白。荧光显微镜观察结果显示,仅保留N端96个氨基酸残基或缺失N端120个以上残基时,融合蛋白均匀分布于整个细胞质中,而含有N端120个以上残基时,融合蛋白呈点状或局部分布于核周围部位。截取L蛋白96~120氨基酸片段,连接到GFP蛋白氨基端,同样融合蛋白亦特异性地分布到核周围局部区域.进一步研究含定位信号的25个残基片段发现,仅13个残基的肽段QGYSFLHEVDKEA(108~120)就具有定位功能,缺失D或V均导致定位信号完全丧失。含有这13个残基的GFP融合蛋白,在多种细胞和不同表达模式下均显示了同样的分布规律,表明L蛋白N端这种定位信号具有独立的定位功能,并且在不同细胞中是保守的。
- 聂玉春柯叶艳王在于翔邓宏魁丁明孝
- 关键词:水疱性口炎病毒L蛋白复制酶转染
- 不能离体增殖病毒的鉴定及分类
- 1997年
- 不能离体增殖病毒的鉴定及分类聂玉春陆承平(南京农业大学动物医学院,江苏210095)关于病毒的分类,多年来一直是困扰微生物学的难题,特别是不能离体增殖病毒,通过常规的分类方法很难得到满意的结果。随着基因克隆、载体表达及PCR技术等的发展,使得这一难题...
- 聂玉春陆承平
- 关键词:病毒