肖静
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 供职机构：广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 一种登革热模型的构建方法
- 本发明公开了一种登革热模型的构建方法，登革热模型的生物是黑腹果蝇或黑腹果蝇胚胎细胞，向黑腹果蝇或黑腹果蝇胚胎细胞内注射登革热病毒；登革热病毒采用白纹伊蚊的C6/36细胞培养得到。本发明首次成功建立DENV感染的黑腹果蝇模...
- 彭涛陈文莉蔡华陈笛肖静
- 文献传递
- 心脏干细胞可通过旁分泌exosome作用于心肌细胞
- 肖静潘宇李晓红吴岳恒姜霖杨翔宇余细勇
- 干扰素γ刺激hUC-MSCs分泌外泌体促进调节性T细胞生成被引量：12
- 2017年
- 目的探讨生理和炎性微环境下人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,h UCMSCs)能否通过外泌体诱导调节性T细胞的生成来发挥免疫抑制功能。方法胶原酶消化法分离h UC-MSCs,应用流式细胞术鉴定h UC-MSCs。IFN-γ模拟体内炎性微环境,以未预处理为对照,分别提取外泌体,得到Nor-h UC-exo和IFN-γ-stimulated h UC-exo,分析其浓度及粒径分布等特征、并鉴定表面标记蛋白CD63的表达。采用h UC-MSCs、Nor-h UCexo、IFN-γpretreated-h UC-MSCs、IFN-γstimulated h UC-exo与人外周血单个核细胞共培养5 d后,流式细胞术检测T细胞的增殖、调节性T细胞的比例变化。结果 h UC-MSCs高表达CD73、CD44等间充质干细胞标志物。IFN-γ刺激前后外泌体粒径无明显变化,但IFN-γ刺激后分泌量和CD63增加(P<0.05)。CFSE染料示踪结果显示,h UC-MSCs来源的外泌体抑制PBMCs增殖(P<0.01),且IFN-γ刺激后明显提高外泌体的免疫抑制能力(P<0.01)。在活化T细胞中,IFN-γ-stimulated h UC-exo组Treg比例(11.53±0.88%)与IFN-γpretreated-h UC-MSCs组(7.54±0.50%)(P<0.05)、Norh UC-exo组(6.60±0.56%)(P<0.01)、对照组(3.87±0.73%)(P<0.01)相比升高。结论 h UC-MSCs可通过分泌外泌体来发挥免疫调节作用,在炎症因子刺激下h UCMSCs分泌的外泌体明显促进调节性T细胞的生成,h UC-exo可能是潜在的免疫抑制载体。
- 杨翔宇李晓红肖静胡洁媚冯娟霍然何国东吴岳恒余细勇
- 关键词：脐带外泌体调节性T细胞
- 聚乙烯亚胺-蛋白纳米复合体转染蛋白进入骨髓间充质干细胞的应用研究被引量：3
- 2015年
- 目的:探索纳米材料聚乙烯亚胺(PEI)携载不同分子量的蛋白质转染进人骨髓间充质干细胞(h BMSCs)的作用及优化其最佳配比条件。方法:利用物理化学作用构建6组PEI-DNase I(DNA酶I)复合体,运用激光散射技术初步摸索其最佳摩尔比,用透射电镜直观复原纳米-蛋白复合体外貌;同时,原代分离培养健康人的骨髓间充质干细胞并进行体外扩增,通过构建成功的4组PEI-GFP(绿色荧光蛋白)纳米蛋白复合体对h BMSCs进行转染,共聚焦荧光显微镜下观察荧光表达情况,再通过MTT法检测该复合体对细胞增殖的毒性影响,并用β-半乳糖苷酶实验验证其转入蛋白的活性表现。结果:当PEI与蛋白质的摩尔比为4∶1时,形成的复合体转染效率最高,β-半乳糖苷酶实验细胞染色变蓝。结论:PEI能与蛋白质形成纳米复合体,并能转染多种蛋白质进入人骨髓间充质干细胞,所转染的蛋白质分子仍具有活性,为细胞重编程技术提供了新途径。
- 姜霖吴岳恒李晓红潘宇肖静杨翔宇冯媛余细勇
- 关键词：聚乙烯亚胺骨髓间充质干细胞
- IFN-γ对人脐带间充质干细胞外泌体免疫抑制能力的影响
- 杨翔宇李晓红肖静姜霖冯娟霍然何国东余细勇
- 衰老对缺氧刺激下心脏干细胞生物学功能的影响
- 2015年
- 目的 探讨衰老对缺氧损伤刺激下心脏干细胞（CSC）生物学功能的影响.方法 原代分离小鼠干细胞抗原1 （Sca1）＋ CSC,培养6代后采用衰老β半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色鉴定细胞衰老情况.比较正常培养和缺氧培养第1代和第6代Sca1＋ CSC增殖速度,血管内皮生长因子（VEGF）、血小板衍生生长因子（PDGF）-A、PDGF-B mRNA水平,及VEGF和PDGF-BB分泌水平.将12只青年小鼠和12只老年小鼠各均分为心肌缺血组和假手术组,心肌缺血组采用冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血模型,术后3d取心脏分离细胞,采用流式细胞仪检测Sca1＋ CSC水平.结果 第6代Sca1＋ CSC与第1代Sca1＋ CSC比较体积明显增大,SA-β-Gal蓝染,第1代Sca1＋ CSC未见SA-3-Gal蓝染细胞.第6代Sca1＋ CSC增殖率明显低于第1代Sca1＋ CSC[（18±5）％比（103±27）％]（P＜0.01）.缺氧培养后,第1代Sca1＋ CSC增殖率[（58±11）％]明显降低（P＜0.05）,第6代Sca1＋ CSC增殖率[（26±8）％]无明显改变（P＞0.05）.缺氧培养与正常培养比较,第1代CSC中VEGF、PDGF-A和PDGF-B mRNA水平明显增加,第6代Sca1＋ CSC中VEGF、PDGF-A和PDGF-B mRNA水平无明显变化,第1代Sca1＋ CSC中VEGF和PDGF-BB分泌水平明显增加[（150±37） μg/L比（18±6）μg/L、（288±37） μg/L比（35±6）μg/L],差异有统计学意义（均P＜0.01）,第6代Sca1＋ CSC中VEGF和PDGF-BB分泌水平无明显变化,差异无统计学意义（均P＞0.05）.心肌缺血组老年和青年小鼠Sca1＋ CSC水平均明显高于假手术组[（13.2±4.2）％比（1.5±0.4）％、（31.7±6.5）％比（5.0±0.6）％]（P＜0.05）,2组老年小鼠Sca1＋ CSC水平均明显低于青年小鼠（P＜0.05）.结论 衰老可致缺氧损伤刺激下Sca1＋ CSC增殖能力、分泌能力以及损伤后的动员能力下降.
- 潘宇肖静李晓红蔡飒余细勇
- 关键词：衰老心脏干细胞缺氧
- 外泌体在心血管疾病中的研究进展被引量：5
- 2014年
- 人体诸多生理功能的发挥是通过细胞间的信息交换来完成的。目前细胞之间的信息交换涉及的机制较为复杂，其中比较重要的有分泌生长因子、各种小分子物质（多肽类、生物活性脂类和核苷酸）、细胞间接触和分泌到胞外的基质成分等。
- 肖静余细勇
- 关键词：外泌体心血管疾病信息传递
- 心脏干细胞可通过旁分泌exosome保护心肌细胞发生凋亡
- 心脏干细胞移植在心肌梗死治疗中具有广泛应用,外泌体(exosome)被认为是细胞旁分泌的重要介质.本研究拟建立心脏固有干细胞(CPCs)的成熟分离方法,并初步探索CPCs 分泌的exosome 在体外保护氧化应激状态下心...
- 肖静潘宇李晓红吴岳恒姜霖杨翔宇余细勇
- 心脏干细胞分泌的exosome对氧化应激下心肌细胞的保护作用研究被引量：5
- 2015年
- 目的探索心脏干细胞分泌的外泌体(exosome)对体外氧化应激所致心肌细胞凋亡的保护作用。方法磁珠分选出Sca-1^+CPCs进行培养,流式细胞术鉴定;分离CPCs分泌的exosome,并用Western blot进行表型鉴定和用Nanosight进行粒径分析;免疫荧光法及PKH26标记技术观察心肌细胞H9c2对exosome的摄取作用;通过H_2O_2处理诱导H9c2细胞凋亡,用Western blot检测对照组与CPC-exo处理组凋亡相关蛋白水平,观察exosome对心肌细胞凋亡的保护作用。结果 1磁珠分选出的细胞用免疫荧光检测发现Sca-1呈阳性表达,且纯度可达95%以上。2从Sca-1^+CPCs细胞培养上清中提取出的exosome其表面标记蛋白CD63呈阳性表达,Nanosight结果显示大部分粒子都处于(82.33±3.06)nm(n=3)。免疫荧光显示H9c2细胞中可见大量PKH26标记的exosome在胞质聚集。3Western blot结果显示,与对照组相比,CPC-exo处理组总的caspase-3表达不变,而激活型caspase-3表达水平明显降低(P<0.05)。结论 CPCs分泌的exosome可被H9C2细胞所摄取,可以保护心肌细胞由于氧化应激引起的凋亡。
- 肖静潘宇李晓红姜霖杨翔宇吴岳恒雷和平余细勇
- 关键词：心脏干细胞外泌体磁珠分选旁分泌效应氧化应激
