蔡永占
- 作品数：7 被引量：19H指数：2
- 供职机构：云南农业大学烟草学院更多>>
- 发文基金：云南省烟草专卖局(公司)科技项目中国烟草总公司科技项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学自动化与计算机技术动力工程及工程热物理更多>>
- 氮饥饿环境中稻瘟病不同致病力菌株分泌蛋白的双向电泳图谱分析被引量：2
- 2010年
- 采用双向电泳技术研究了稻瘟病菌株Y99-63和Y98-16在氮饥饿条件下分泌蛋白群的组成及差异。在稻瘟病菌株Y99-63和菌株Y98-16分泌蛋白的2-DE图谱中分别检测出262±10和253±10个蛋白质点。其中有130个蛋白质点为菌株Y99-63特异表达,121个蛋白质点为Y98-16特异表达,132个蛋白质点为两菌株共同表达。在两菌株共同表达的表达量相差达5倍以上的有38个蛋白质点,其中有25个蛋白质点在菌株Y99-63表达量较大,有13个蛋白质点在菌株Y98-16表达量较大。生物信息学预测稻瘟病菌分泌蛋白的分子量在10～20 kDa以及等电点在5.0～5.5范围内蛋白质点数最多。菌株Y99-63特异表达分泌蛋白的分子量10～20 kDa范围内蛋白质点最多,菌株Y98-16特异表达分泌蛋白的分子量在20～30 kDa范围内蛋白质点数最多,两菌株共同表达的分泌蛋白分子量在10～20 kDa范围内蛋白质点数最多。菌株Y99-63特异表达分泌蛋白的等电点在5.5～6.0范围内蛋白质点数最多,菌株Y98-16特异表达分泌蛋白的等电点在4.5～5.0范围内蛋白质点数最多,两菌株共同表达分泌蛋白等电点在5.0～5.5范围内蛋白质点数最多。稻瘟病菌不同菌株在氮饥饿条件下产生的分泌蛋白有较大差异。
- 蔡永占苏源孔垂思杨静刘林李成云
- 关键词：稻瘟病菌分泌蛋白双向电泳
- 一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法
- 本发明提供一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法。水稻感病品种丽江新团黑谷生长至第4片叶完全展开时接种。选择在接种水稻叶片的中部最宽处，用致伤设备形成直径1mm的压伤斑1个，将稻瘟病菌氮饥饿培养后或致病基因重组表达后得到的蛋白在...
- 苏源李成云朱有勇杨静刘林王云月孔垂思常明蔡永占
- 文献传递
- 不同气候条件对“云烟87”旺长期叶片光合速率及蛋白表达的影响被引量：4
- 2015年
- 为揭示烟草植株对不同气候环境响应的分子机理,采用相同土壤栽培和管理,在云南3个不同气候试验点盆栽烤烟品种"云烟87",测定烟株旺长期农艺性状、SPAD值和净光合速率,以iTRAQ标记技术开展叶片差异表达蛋白分析,并对部分差异表达蛋白基因的转录进行q-RT-PCR验证。结果表明:在不同实验点间农艺性状、SPAD值和净光合速率有显著差异;不同生态点间烟叶差异蛋白富集到碳、氮代谢和逆境响应等途径。与昆明烟叶相比,丽江金庄试验点烟叶中光合光反应相关的蛋白上调表达,而与糖呼吸消耗相关的酶类下调表达;丽江片角试验点烟叶糖合成途径相关的酶类上调表达而与呼吸代谢相关酶类则下调表达。丽江片角和金庄试验点烟叶中,蛋白质和氨基酸等含氮化合物合成酶类下调,而与其分解酶类上调表达。随机选取6个差异表达的蛋白质,用q-RT-PCR进行其转录表达水平的间接验证,表明与iTRAQ分析的差异蛋白在mRNA水平上有相似的表达趋势。本研究初步阐明丽江烟叶通过提高碳含量和降低氮含量来形成高"碳氮比"烟叶的气候因子诱发机制。
- 蔡永占周普雄张柳王铮徐琼华杨焕文毛自朝
- 关键词：气候条件旺长期蛋白质组学ITRAQ
- 稻瘟菌胞外蛋白的提取及电泳方法初探被引量：2
- 2009年
- 利用蛋白质组学研究方法对稻瘟菌的胞外蛋白进行分析，可以更好地了解该病原菌的生物学特性和致病机制。蛋白质样品制备和双向电泳，都是蛋白质组学研究的基础。采用冷冻干燥，透析结合法与三氯乙酸-脱氧胆酸钠沉淀法（TCA-DOC沉淀法）提取液体培养稻瘟菌得到的胞外蛋白，利用17cm pH3.0-10.0与17cm pH4.0-7.0两种pH梯度IPG胶条对同一样品进行第一向等电聚焦，12％ SDS-PAGE凝胶进行第二向电泳，银染后用PDQuest软件（V7.4）对电泳图谱进行分析。结果表明，在上述两种提取稻瘟菌胞外蛋白的方法中，TCA-DOC沉淀法具有较好的提取效果，应用该实验方法得到的蛋白质分布在pH4.0-7.0之间的点数达到621个，因此在双向电泳中，采用pH4.0-7.0的胶条具有较好的分辨率。
- 常明苏源蔡永占孔垂思仓晓燕杨静刘林朱有勇李成云
- 关键词：稻瘟菌胞外蛋白双向电泳
- 不同气候环境中团棵期烟草叶片蛋白质组学分析被引量：12
- 2013年
- 【目的】应用比较蛋白组学策略,在蛋白表达水平揭示团棵期烟草对不同气候环境响应的分子机理。【方法】在相同土壤和大田栽培管理条件下,分别在昆明市云南农业大学农场和丽江市玉龙县金庄两个不同气候环境的生态试验点盆栽烤烟品种云烟87,在团棵期进行农艺性状、SPAD值和净光合速率测定,并运用双向电泳和MALDI-TOF-MS质谱鉴定技术研究烟草叶片蛋白质表达谱的变化。【结果】金庄点烟草具有较高的SPAD值和净光合速率,较大的株高、节间距、茎围、叶宽和叶面积等农艺性状参数。蛋白质组学分析表明,在两个生态点烟草叶片中共检测到39个表达量相差2倍以上的蛋白质点,通过MALDI-TOF-MS质谱鉴定和数据库检索注释了33个蛋白质点,相对于昆明点,金庄点有3个(9.09%)特异表达,7个(21.12%)表达量上调,19个(57.57%)表达量下调的蛋白质点,而昆明点有4个(12.12%)特异表达蛋白质点;功能分类表明,它们分别参与光合作用、防御/抗胁迫、蛋白质合成、矿质代谢等细胞过程。【结论】金庄点烟草具有较高SPAD值,净光合速率,较大的株高、节间距、茎围、叶宽和叶面积等农艺性状参数,这与该点烟草叶片中积累较多高光合效率相关的蛋白质相一致,而昆明点烟草叶片则富集较多的叶绿体蛋白质合成、防御/胁迫以及氮、硫等矿质元素代谢相关的蛋白质。该结果初步阐明了丽江烟区烟叶总糖、还原糖含量较高,总氮、烟碱含量偏低特征的分子机制。
- 蔡永占周普雄李佛琳赵昶灵林春杨焕文毛自朝
- 关键词：烟草团棵期农艺性状蛋白质组气候环境
- 稻瘟病菌分泌蛋白的比较分析
- 蔡永占
- 关键词：稻瘟病菌分泌蛋白双向电泳生物信息学蛋白质组学
- 一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法
- 本发明提供一种检测稻瘟病菌致病蛋白的方法。水稻感病品种丽江新团黑谷生长至第4片叶完全展开时接种。选择在接种水稻叶片的中部最宽处，用致伤设备形成直径1mm的压伤斑1个，将稻瘟病菌氮饥饿培养后或致病基因重组表达后得到的蛋白在...
- 苏源李成云朱有勇杨静刘林王云月孔垂思常明蔡永占
- 文献传递
