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蔺凌云: 作品数：129 被引量：241H指数：8; 供职机构：浙江省淡水水产研究所更多>>; 发文基金：浙江省公益性技术应用研究计划项目湖州市自然科学基金浙江省科技计划项目更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学环境科学与工程更多>>

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检测沼虾杆套病毒-1的特异性引物、探针及快速检测试剂盒: 检测沼虾杆套病毒‑1的引物探针混合液，由引物组A和Taqman荧光探针B组成，Taqman荧光探针B的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团；所述引物组A包含引物MrRoV‑q119F和引物MrRoV‑q11...; 潘晓艺沈锦玉蔺凌云姚嘉赟尹文林曹铮

黄颡鱼小RNA病毒qPCR检测方法的建立与应用: 2023年; 黄颡鱼小RNA病毒(Yellow catfish Picornavirus,YCPrV)是黄颡鱼重要的致死性病原,本研究旨在建立一种快速、精准的YCPrV检测方法。基于YCPrV 22426⁃8毒株RdRp基因编码区序列设计特异性引物和探针,通过质粒标准品和标准曲线的制作,反应体系和反应条件的优化,灵敏度和特异性的测试,建立一种检测YCPrV的TaqMan荧光定量PCR(qPCR)方法。结果显示,在绘制的qPCR标准曲线中,拷贝数与Ct值具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))为0.9974,扩增效率为88.98%,最高检测灵敏度为5.09×10^(0)拷贝。该方法对来自黄颡鱼、鲫鱼、鲤鱼和虾的其它8种病毒无扩增信号,仅YCPrV具有扩增曲线,对临床样品阳性检出率比普通PCR高12.28%。自然感染黄颡鱼组织中YCPrV检测结果发现,病毒载量从高到低依次为肠、肾、心、肝、脾、鳃和脑。以上结果表明,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法具有良好的特异性、灵敏度和可重复性,临床检测YCPrV时,建议优选肾和心作为检测靶标组织。YCPrV qPCR方法的建立,可为YCPrV的精准定量检测和疾病早期预防提供有利手段。; 穆雪姣潘晓艺周可欣蔺凌云姚嘉赟沈锦玉; 关键词：黄颡鱼小RNA病毒病毒性出血病

淡水鱼虾细菌病诊断与防控技术研究进展被引量：4: 2018年; 本文概述了淡水鱼虾常见的细菌性疾病,包括细菌性败血症、细菌性肠炎、细菌性烂鳃、链球菌病、迟缓爱德华氏菌病、鮰类肠败血症、诺卡氏菌病、急性肝胰腺坏死病和螺原体病等,并对近年来国内外主要淡水养殖细菌性病害检测方法的研究情况进行综述,包括基于病原菌生理生化特征的检测方法、基于分子生物学技术的检测方法(如常规定性PCR检测方法、实时定量PCR技术、环介导等温扩增技术、16S r RNA检测技术、核酸探针杂交法和基因芯片技术等),以及基于免疫学相关技术的检测方法(如免疫酶技术、免疫荧光技术、胶体金免疫层析技术和抗体芯片技术等),提示在防控方面应该注重监测预警、免疫、药物、生态和综合防控等技术。本文为淡水养殖细菌性病害的诊断、检测方法的标准化及推动相应检测产品的商品化提供了参考。; 蔺凌云潘晓艺袁雪梅姚嘉赟徐洋尹文林沈锦玉; 关键词：细菌性疾病防控技术

一种基于重组酶的致玻璃苗弧菌试纸条型恒温扩增检测试剂盒: 本发明公开了一种基于重组酶的致玻璃苗弧菌试纸条型恒温扩增检测试剂盒，属于生物检测技术领域，本发明公开了一种检测致玻璃苗弧菌的组合物，包括检测SpvB的上游引物SpvB‑F1、下游引物SpvB‑R1和探针SpvB‑PB，以...; 袁雪梅姚嘉赟黄雷陈静蔺凌云潘晓艺彭先启焦锦彪

一种基于重组酶的十足目虾虹彩病毒Ⅰ型试纸条型恒温扩增检测试剂盒: 本发明公开了一种基于重组酶的十足目虾虹彩病毒Ⅰ型试纸条型恒温扩增检测试剂盒，涉及生物检测技术领域。所述十足目虾虹彩病毒Ⅰ型试纸条型恒温扩增检测试剂盒包括一种引物对和探针组合，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.4...; 袁雪梅姚嘉赟黄雷蔺凌云潘晓艺陈静

GCRV及其细胞灭活苗对草鱼4种酶活性的影响被引量：1: 2014年; 以G1组1×106TCID50/mL、G2组1×103TCID50/mL两种不同浓度草鱼呼肠孤病毒通过腹腔注射感染草鱼,G3组用草鱼呼肠孤病毒细胞灭活苗注射免疫草鱼,并设计对照组:用相同体积的PBS腹腔注射草鱼,分别在注射后1、2、7、14 d取血清及肝脏,测定其酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,通过各项酶活力变化规律来研究病毒感染及疫苗免疫对草鱼非特异性免疫功能的影响。结果表明:ACP活性,与对照组比较血清中各处理组变化不显著,肝脏中大体呈现先降低后升高的趋势;AKP活性,血清中G1组呈现先升高后降低的趋势,G2、G3组呈现持续升高的趋势,肝脏中G1、G2组均呈现先降低再升高再降低的趋势,G3组呈现先升高再降低的趋势;MPO活性,血清中G1组呈上升趋势,G2组呈先升高再下降的趋势,G3组呈现升高再降低再升高的趋势,肝脏中G1组呈现先降低再升高再降低的趋势,G2组与G3组均呈现先升高再降低的趋势;SOD活性,血清中G1组呈现先升高再降低的趋势,G2组呈现升高的趋势,G3组呈现先高再降低再升高的趋势,肝脏中G1组呈现先升高后降低的趋势,G2组呈现降低的趋势,G3组呈现先降低后升高的趋势。结果显示:MPO及SOD两种酶活性在G1、G2及G3血清中变化趋势不一,说明这两种酶活性跟刺激物浓度及种类存在一定关系。; 袁雪梅沈锦玉蔺凌云潘晓艺姚嘉赟徐洋尹文林郝贵杰; 关键词：草鱼草鱼呼肠孤病毒细胞灭活苗酶活性

草鱼呼肠孤病毒生长特性研究被引量：2: 2018年; 以草鱼呼肠孤病毒(GCRV)873毒株为试验材料,建立了GCRV荧光定量PCR检测方法;用GCRV873株感染CIK细胞及草鱼,通过对病毒RNA复制水平、子代病毒含量以及细胞病变等情况进行监测,研究其在CIK细胞及草鱼体内的生长特性。在CIK细胞中,GCRV感染后12 h即可检测到子代病毒,36 h时,所有细胞被感染;72 h时,病毒滴度达到最高,为10^(6.75) TCID_(50)/mL。在草鱼的肝、脾、肾中,均能检测到GCRV RNA,其中肾脏中含量最高,其次是肝脏,脾脏中最少。本试验为研究GCRV致病机理及制备细胞灭活疫苗奠定了试验基础。; 袁雪梅姚嘉赟郝贵杰蔺凌云徐洋潘晓艺尹文林沈锦玉; 关键词：草鱼呼肠孤病毒荧光定量PCR 增殖规律

大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体的制备及初步应用被引量：1: 2022年; 利用饱和硫酸铵盐析法和亲和柱层析法提取制备大口黑鲈血清的免疫球蛋白,进而通过常规方法4次免疫BALB/c小鼠,取脾脏组织细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞进行融合,经杂交瘤细胞筛选和单克隆化细胞培养制备单克隆抗体,并利用酶联免疫吸附法测定其抗体效价、灵敏度以及特异性反应。制备甲醛灭活大口黑鲈虹彩病毒疫苗进而免疫大口黑鲈,利用制备的单克隆抗体检测免疫后的抗体水平。制备获得2株大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞A9E7和C9B9,其腹水抗体效价可达1∶2.187×10^(6)和1∶7.29×10^(5),两者对大口黑鲈免疫球蛋白的灵敏度为20ng和10ng,交叉反应试验结果表明,A9E7和C9B9均能与大口黑鲈免疫球蛋白特异性结合,A9E7与花鲈血清可发生交叉反应,而C9B9可与鳜血清发生交叉反应,且两者与鲫、草鱼、团头鲂、翘嘴鲌、黄颡鱼、光唇鱼、黄鳝、泥鳅等血清免疫球蛋白无交叉反应。免疫大口黑鲈虹彩病毒后,大口黑鲈体内抗体水平显著增加并于35d时达到峰值,其抗体效价可达1∶1280。具有特异性强、灵敏度高的大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体可用于大口黑鲈病害的早期病害监测、免疫应答规律研究和疫苗研发。; 张成赛尹文林李明曹铮蔺凌云潘晓艺沈锦玉王春凤姚嘉赟姚嘉赟; 关键词：大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体抗体效价

一种生物絮团的培养方法及水产养殖方法: 本发明涉及一种生物絮团培养方法及水产养殖方法，其中的生物絮团培养方法包括：向水体中添加有机碳源，有机碳源的添加量满足水体中的C/N比为15～17：1；向水体中加入地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌及干酪乳杆菌，所述地衣芽孢杆菌、...; 王超沈锦玉徐洋蔺凌云尹文林姚嘉赟潘晓艺袁雪梅

一种水生双顺反子病毒的RT-PCR检测方法: 一种水生双顺反子病毒的RT-PCR检测方法，属于病毒检测技术领域。其包括以下步骤：1）用水生双顺反子病毒特异性引物P0对待测RNA样品进行逆转录得到cDNA第一链，cDNA用水生双顺反子病毒通用引物组P1/P0进行PCR...; 潘晓艺沈锦玉袁雪梅蔺凌云郝贵杰姚嘉赟徐洋尹文林; 文献传递

蔺凌云

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