贝维娟
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
- 供职机构:郑州大学药学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 抗癌新药OP46通过升高ROS诱导EC9706细胞凋亡
- 目的探讨抗癌新药OP46体外抗肿瘤活性及诱导癌细胞凋亡的部分作用机制。方法利用MTT法检测OP46对EC9706的细胞活力;活性氧(ROS)试剂盒检测OP46处理EC9706后ROS水平的变化;Western blot检...
- 戴米洋侯桂琴贝维娟马永成石晓静陈冬徐瑞敏刘宏民
- 关键词:抗癌新药EC9706凋亡活性氧
- 文献传递
- 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白小分子干扰RNA对食管鳞癌细胞中mTOR-p70S6K信号通路及裸鼠移植瘤生长的影响被引量:2
- 2011年
- 目的 检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)小分子干扰RNA(siRNA)对食管鳞癌中mTOR-p70S6K信号通路的阻断作用以及对裸鼠移植瘤生长的影响.方法 以食管鳞癌细胞株EC9706为研究对象,采用siRNA干扰、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot、流式细胞术及CCK-8等方法,观察mTOR-p70S6K信号通路被阻断后,通路中各因子蛋白及mRNA表达的变化,及其对细胞增殖和凋亡的影响.进行裸鼠成瘤实验,观察mTOR siRNA对肿瘤生长的影响.结果 与未转染细胞相比,转染mTOR siRNA的细胞中mTOR和磷酸化p70S6K的表达水平降低(P〈0.05),而pTOS6K的表达水平升高(P〈0.05).转染mTOR siRNA后,细胞凋亡增加,细胞增殖能力降低,且对顺铂的敏感性增高,细胞被阻滞在G,期(P〈0.05).mTOR siRNA能明显抑制裸鼠移植瘤的生长,siRNA组和siRNA+顺铂组的肿瘤抑制率分别为50.9%和62.3%.结论 mTOR siRNA能有效抑制mTOR-pTOS6K信号通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,在裸鼠体内能显著抑制肿瘤的生长.mTOR-pVOSSK信号通路在食管鳞癌发生发展中起重要作用.
- 刘明月侯桂琴张艳贝维娟闫爱华
- 关键词:流式细胞术裸鼠
- 雷帕霉素对p70S6K-siRNA转染的EC9706细胞增殖的影响被引量:4
- 2013年
- 目的:观察雷帕霉素对p70S6K-siRNA转染的人食管鳞状细胞癌EC9706细胞增殖的影响。方法:用p70S6K-siRNA转染EC9706细胞,分别作用24、48 h后,采用RT-PCR和Western blot检测p70S6K mRNA及蛋白的表达情况;收集转染p70S6K-siRNA 24 h和未转染的EC9706细胞,加入0、25、50、100、150、250、500和1 500 nmol/L的雷帕霉素处理48 h,采用MTT法检测细胞存活率。结果:p70S6K-siRNA转染后,EC9706细胞中p70S6K mRNA及蛋白的表达均明显降低(mRNA:F=57.825;蛋白:F p70S6K=268.897,F p-p70S6K=35.584,P均<0.05)。随雷帕霉素浓度的增加,未转染和转染组EC9706细胞存活率均降低;与未转染组相比,转染组细胞存活率更低(F剂量=664.919,F组间=1 958.000,P均<0.05。)结论:p70S6K-siRNA能增强雷帕霉素对EC9706细胞增殖的抑制作用。
- 鲁照明杨帅周媛媛贝维娟侯桂琴
- 关键词:P70S6KSIRNA食管鳞状细胞癌EC9706雷帕霉素
- shRNA对EC9706细胞p70S6K表达的影响
- 2011年
- 目的:观察核糖体40s小亚基S6蛋白激酶(p70S6K)特异性短发夹RNA(shRNA)对EC9706细胞p70S6K表达的影响。方法:根据GenBank p70S6K的mRNA序列,设计并合成p70S6K特异性的shRNA序列,退火形成双链后插入pSIREN-RetroQ-DsRed-Express载体,构建表达载体pshRNA-p70S6K,转染EC9706细胞。采用RT-PCR和Western blot方法分别检测转染24、48、72、96及120h后细胞中p70S6K mRNA和磷酸化p70S6K的表达,设未转染的EC9706细胞为对照。结果:各组细胞p70S6K mRNA和磷酸化p70S6K蛋白的表达差异有统计学意义(F=106.343,721.632,P均<0.001)。转染细胞p70S6K mRNA的表达在转染24、48和72h后均较对照组下降(P<0.05),在第48h表达最低;磷酸化p70S6K蛋白的表达在转染24、48、72和96h后均较对照组下降(P<0.05),第48h表达最低。结论:p70S6K特异性shRNA能够下调EC9706细胞中p70S6K mRNA和蛋白的表达。
- 郭三星侯桂琴李杰张艳贝维娟薛乐勋
- 关键词:食管肿瘤EC9706哺乳动物雷帕霉素靶蛋白短发夹RNA
- 食管鳞癌细胞中PTEN基因表达水平及突变位点分析被引量:1
- 2013年
- 目的:探讨PTEN基因在食管鳞癌细胞中的表达水平及突变情况。方法:采用RT-PCR技术检测高分化的Eca109、低分化的EC9706和EC1食管鳞癌细胞株细胞中PTEN mRNA的表达水平,并克隆PTEN基因全长,与野生型PTEN基因序列比对,分析突变情况。结果:EC1、EC9706、Eca109细胞株中PTEN mRNA的表达水平分别为(0.06±0.02)、(0.24±0.02)、(0.41±0.01),3株细胞中PTEN mRNA的表达水平差异有统计学意义(F=306.330,P<0.001),Eca109细胞中PTEN mRNA的表达水平高于EC9706和EC1细胞(P<0.05)。3株细胞中PTEN基因均存在不同程度突变,突变主要集中在外显子5和8。结论:食管鳞癌细胞中PTEN表达水平与细胞的分化程度有关,PTEN基因突变与食管鳞癌的发生发展有关。
- 侯桂琴贝维娟杨帅王琼叶鲁照明
- 关键词:食管鳞癌PTEN基因突变