赖迎迢
- 作品数:88 被引量:95H指数:4
- 供职机构:中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 鳜鱼脑部细胞培养研究
- 本文以本实验室建立的鳜鱼脑部细胞(CPB)系为实验材料,目的是比较该细胞在不同培养条件下的生长状况,通过筛选和优化该细胞培养各种条件,为后续工厂化大规模生产鳜鱼疫苗做基础。通过对不同培养基、不同血清浓度、不同PH值等培养...
- 赖迎迢付小哲陶家发张悠石存斌
- 关键词:鳜鱼病毒疫苗
- 文献传递
- 近海水域病原菌多样性研究进展
- 2008年
- 水产动物病原菌广泛分布于近海,不但影响海水养殖业的发展、海产品的质量安全,甚至还威胁到人类公众健康,因此,开展近海水域病原菌多样性的研究,对于海水养殖业的可持续发展及人类健康都具有重要意义。文章综述了近海水域水产动物病原菌多样性研究主要方法的原理、特点以及局限性,介绍了16S rRNA序列分析、分子杂交、指纹图谱等分子生物学技术,阐述了实时荧光定量PCR、竞争定量PCR等定量研究技术的应用,展望了病原菌多样性研究的发展趋势是原位、快速、高通量、灵敏、多技术联合和准确定量。
- 赖迎迢王颖石存斌吴淑勤
- 关键词:多样性分子杂交指纹图谱定量PCR
- 一种基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统的构建及评价被引量:1
- 2021年
- 为构建一种具有广泛适用性的原核启动子报告系统,以质粒pFLX107为骨架,通过多克隆位点替换和序列改造,构建出基于lacZ基因和pUC复制子的pFGH系列报告载体,然后以lacZ基因缺失株MC4100为宿主菌筛选背景活性最低的质粒作为最终的报告系统,并利用诱导型启动子araBAD和组成型启动子rpsM分别对其进行测试。结果显示,在所构建的pFGH系列质粒中,pFGH06的背景活性显著低于同系列其他质粒,在28℃培养条件下甚至显著低于低拷贝参考质粒pRCL的活性(P<0.01)。进一步的评估测试显示,质粒pFGH06可用于诱导型启动子或组成型启动子的克隆及活性测定,且在模拟应用于启动子筛选时,通过蓝白斑筛选即可实现对目标启动子的完全识别。与已报道的原核启动子报告系统相比,pFGH06具有体积小、克隆位点多、背景活性可调、对启动子筛选识别效率高等优点,具有广泛的应用前景。
- 付立霞付立霞韩先干韩先干赖迎迢赖迎迢黄志斌
- 关键词:报告基因Β-半乳糖苷酶定点突变
- 雅来益畜宝对奥尼罗非鱼生长性能的影响
- 2011年
- 所购奥尼罗非鱼在水温(27±2)℃的小水池中暂养7 d后,选择健康、规格和质量基本一致的小、中和大3种规格罗非鱼,分别分成3组,每组40尾鱼,其中Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲料,Ⅱ组和Ⅲ组为试验组,分别在基础饲料中添加200和500 g/t雅来益畜宝。试验鱼适应环境2周后开始正式试验,试验期为2周。试验结果表明:与对照组相比,500 g/t雅来益畜宝组显著改善了不同规格罗非鱼的增重率和饲料系数(FCR);200和500 g/t雅来益畜宝组的淀粉酶活力和溶菌酶活力均显著高于对照组。这表明,雅来益畜宝可以显著促进罗非鱼生长,提高饲料消化率和机体免疫水平。
- 张辉李玉欣宋春玲谢寿理赖迎迢张銮妫
- 关键词:奥尼罗非鱼酶活力
- 罗非鱼无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗制备及其免疫效果的研究被引量:2
- 2019年
- 为研制比无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)单个蛋白抗原免疫效果更佳的多蛋白重组罗非鱼(Oreochromis sp.)链球菌病口服疫苗,该研究利用同源重组法构建表达无乳链球菌Sip-Pgk融合蛋白的pNZ8148-sippgk质粒,通过电转化乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)NZ9000中获得L.lactis NZ9000 pNZ8148-sip-pgk重组乳酸菌,使用nisin诱导表达并进行Western blot鉴定,制备Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌口服疫苗,通过不同免疫次数隔周免疫的方式灌胃罗非鱼。ELISA检测免疫后的血清抗体水平,在灌胃免疫结束后的第18天通过腹腔注射无乳链球菌攻毒获得相对免疫保护率。结果显示,构建的重组乳酸菌诱导表达的蛋白大小为92 kD,与目的蛋白大小一致。与2次免疫比较,3次免疫该融合蛋白乳酸菌疫苗能显著提高罗非鱼的血清抗体水平和对无乳链球菌的免疫保护效果。3次免疫Sip-Pgk融合蛋白乳酸菌疫苗的血清水平显著高于单一蛋白组和PBS组,其相对免疫保护率最高(45.56%)。
- 袁玉梅石存斌陶家发张德锋孙承文巩华黄志斌赖迎迢
- 关键词:罗非鱼无乳链球菌融合蛋白
- 大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗生产工艺条件的优化被引量:2
- 2019年
- 目的优化大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗的生产工艺条件。方法通过对大菱鲆鳗弧菌VAM003株培养基(TSB和LB)、培养基盐度(1. 5%、2. 0%、2. 5%、3. 0%、3. 5%NaCl)、接种量(5%、10%、15%)、发酵时间(6~12 h)进行筛选,采用最适发酵条件制备大菱鲆鳗弧菌VAM003株发酵菌液,分别加入不同终浓度的甲醛(0. 1%、0. 2%、0. 3%、0. 4%)灭活24、48、72 h,确定最适灭活条件。采用最适生产工艺制备2批大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗,并进行安全性及效力试验。结果大菱鲆鳗弧菌VAM003株最适发酵培养条件为:用含2. 5%NaCl的TSB培养基,在接种量10%条件下发酵培养10~12 h,活菌量达5×109 CFU/m L以上;最适灭活条件为:甲醛终浓度0. 2%灭活24 h。大菱鲆注射灭活疫苗后,全部健活,未出现临床症状,摄食、游姿及体色均正常,注射部位无红肿,内脏器官无病变;疫苗的免疫保护率达90%以上。结论成功优化了大菱鲆鳗弧菌VAM003株灭活疫苗规模化生产工艺条件,制备的灭活疫苗具有良好的安全性及效力,可用于大菱鲆鳗弧菌病的预防。
- 孙承文李杰赖迎迢江小燕莫照兰黄志斌陶家发
- 关键词:大菱鲆鳗弧菌灭活疫苗安全性效力
- 鳜鱼脑细胞系的构建方法
- 本发明公开了鳜鱼脑细胞系的构建方法,针对鳜鱼脑组织细胞的特征,采用含血清胶原酶消化法分离脑组织细胞,进行原代培养,继而成功构建了鳜鱼脑细胞系,可提供大量的鳜鱼脑来源细胞,且传代细胞能维持良好的生长状态。本发明所构建的脑细...
- 付小哲李宁求吴淑勤罗霞赖迎迢石存斌
- 文献传递
- 微型生物养护剂养殖加州鲈对比试验
- 2022年
- 佛山市土塘养殖加州鲈密度大、产量高,基本在3 000~5 000千克/亩,池塘承载力非常高。同时因为塘租高,卖鱼后很快再放苗,鱼塘得不到有效休整,所以对养殖技术有非常高的要求。最近几年,养殖户越来越认识到不断补充藻类、菌类、营养盐,水质不容易超标且稳定。
- 韦木莲李湘妮常藕琴赖迎迢余家纯黄龙丁成章蒙烽吴雅丽
- 关键词:微型生物养护剂加州鲈承载力养殖户
- 重组外膜蛋白OmpK规模化高密度培养和诱导表达被引量:2
- 2013年
- 目的:为提高重组外膜蛋白Ompk规模化培养得率。方法:利用高密度培养,进行不同时间补料和升温诱导表达,测定不同培养方法的菌体量和蛋白诱导表达效果。结果:经5、50、500 L发酵罐多批次培养效果比较,采用培养4 h开始补料,6 h开始诱导表达培养,工程菌体和外膜蛋白得率效果最佳。在5、50、500L发酵罐菌体得率分别为17.2、14.8、26.6 g/L,均高于普通发酵培养的菌体得率(平均得率不到5 g/L);在50、500L发酵罐外膜蛋白得率分别为61.6、198.0 mg/L,均高于其它批次。结论:初步确定了重组蛋白工程菌高密度规模化诱导表达培养方法。
- 陶家发赖迎迢孙承文任燕
- 关键词:外膜蛋白亚单位疫苗
- 哈维弧菌重组外膜蛋白OmpK疫苗生产工艺初步研究
- 为获得哈维弧菌外膜蛋白Ompk亚单位疫苗工厂化生产技术。利用高密度培养,进行不同时间补料和升温诱导表达,测定不同培养方法的菌体量和蛋白诱导表达效果,获得的外膜蛋白分别选用白油和Montanide ISA 763A为佐剂制...
- 陶家发赖迎迢孙承文任燕李宁求石存斌吴淑勤
- 关键词:外膜蛋白重组疫苗