赵振岭
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 酵母双杂交系统筛选与HCMV pUL23蛋白相互作用的蛋白质被引量：7
- 2009年
- 将UL23基因的ORF序列克隆到酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒pGBKT7-UL23,用酵母双杂交技术筛选人胚肾cDNA文库中与人巨细胞病毒pUL23相互作用的宿主蛋白分子,再通过回复酵母双杂交再次确认两者之间的相互作用.结果表明:酵母双杂交,回复酵母双杂交试验证明宿主蛋白分子eIF3e(eukaryotic trans-lation initiation factor3,subunit E interacting protein)能够与人巨细胞病毒UL23蛋白相互作用.宿主蛋白分子eIF3e能够与人巨细胞病毒UL23蛋白相互作用,这为进一步研究pUL23蛋白在HCMV生活周期中的作用机制提供依据.
- 赵振岭李实骞姚火旺周天鸿李弘剑
- 关键词：人巨细胞病毒酵母双杂交蛋白质相互作用
- 利用噬菌体展示技术强化药用链激酶血栓特异性的研究
- 赵振岭
- 关键词：噬菌体展示链激酶血栓溶栓
- 人干细胞生长因子在大肠杆菌中的高效表达、纯化和活性鉴定
- 目的:用高表达菌株BL21（DE3）表达重组人干细胞生长因子-α（rhSCGF-α）蛋白并初步纯化和检测其活性。方法:针对SCGF基因的高GC含量,采用PCR2步法从人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）cDNA文库中获得...
- 彭鑫磊韩波陈伟赵振岭刘秋英王一飞
- 关键词：生物工程干细胞生长因子包涵体
- 文献传递
- 人TRAP1基因的克隆、原核表达及表达条件优化被引量：2
- 2011年
- 应用RT-PCR技术,从人白血病多药耐药细胞株K562/ADR中扩增出肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(tumor nec-rosis factor receptor-associated protein1,TRAP1)基因的cDNA。选择NdeⅠ和XhoⅠ分别作为上下游引物的酶切位点,将TRAP1基因克隆到带有6×His标签的pET-28a(+)的载体上。重组质粒转化大肠杆菌DH5α中,涂布于含卡那霉素的LB琼脂培养基上,经双酶切鉴定后的阳性克隆送去测序。测序成功的重组质粒pET28a(+)-TRAP1转化大肠杆菌BL21(DE3)中,在IPTG的诱导下,成功表达重组蛋白TRAP1。通过改变诱导温度、诱导时机、IPTG浓度及诱导时间,找出最佳表达条件,使重组蛋白TRAP1表达量最高。结果表明,在39℃条件下,OD600达到0.8时,经终浓度为0.1 mmol/L的IPTG诱导6 h,目的蛋白的表达量最高。该研究为纯化出TRAP1蛋白,进一步研究该蛋白的结构和功能奠定了基础。
- 张嘉萱卢嘉欣王蕊赵振岭韩波彭鑫磊陈伟刘忠任哲王绍祥马岩岩刘凯胜王一飞
- 关键词：克隆原核表达BL21
- 人干细胞生长因子-α基因的克隆、表达及其协同rhGM-CSF对人脐带间充质干细胞的增殖作用被引量：2
- 2011年
- 为了研究hSCGF-α对人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)的作用,采用基因工程技术获得重组人干细胞生长因子-α(Recombinant human Stem Cell Growth Factor-α,rhSCGF-α)。针对SCGF基因的高GC含量,采用PCR两步法获得hSCGF-α基因,插入pET-28a(+)载体质粒,构建重组质粒pET-28a-SCGF-α,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达菌株。低温20℃诱导24 h,目标重组蛋白人干细胞生长因子-α以可溶性表达为主。通过Ni2+-NTA柱纯化,获得目标重组蛋白,电泳谱带扫描分析蛋白纯度可达90%以上。以巨噬细胞/粒细胞(Granulocyte/macrophage,GM)集落形成实验鉴定重组蛋白的生物学活性,并协同重组人巨噬细胞/粒细胞集落刺激因子(Recombinant human GM-colony stimulating factor,rhGM-CSF)研究其对人脐带间充质干细胞的影响。结果显示,纯化的重组蛋白rhSCGF-α具有生物学活性;hSCGF-α及rhGM-CSF对hUCMSCs均有刺激增殖活性,但协同作用效果最强。
- 彭鑫磊马岩岩荣靖赵振岭韩波陈伟向阳飞刘秋英王一飞任哲周向荣陈海佳
- 关键词：干细胞生长因子人脐带间充质干细胞集落
- 中草药艾草的综合开发利用研究
- 目的:艾草作为传统中草药在我国有着悠久的应用历史和广泛的影响，被誉为“医家之草”。艾草的提取物，尤其是艾叶精油，是其主要的活性成分，具有抗菌，抗炎、抗过敏、抗氧化、抗肿瘤、镇静、止血、止咳平喘、抗虫等多种生物活性和一定的...
- 赵振岭
- 关键词：中草药精油提取聚乙二醇
- GST-NDPK-A融合蛋白的原核表达及体外互作蛋白的检测
- 2013年
- 旨在了解核苷二磷酸激酶A(NDPK-A)的功能,通过GST-Pull down技术寻找与其存在体外相互作用的蛋白。以含有目的片段的质粒pBV-NDPK-A为模板,扩增出相应的目的基因片段,将其插入带有GST标签的原核表达载体pGEX-4T-2,构建重组表达质粒。双酶切及测序鉴定正确后,转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,Glutathione Sepharose 4B亲和纯化,通过SDS-PAGE电泳及Western blot确定融合蛋白的表达,并与高表达细胞系A549孵育,进行GST-Pull down试验,并通过LC-MS/MS质谱鉴定体外与NDPK-A相互作用的蛋白。结果显示,成功构建GST-NDPK-A的原核表达载体;在大肠杆菌BL21中诱导表达出可溶性融合蛋白;经Glutathione Sepharose 4B纯化后,获得了有生物活性的GST-NDPK-A融合蛋白,GST-Pull down试验和质谱鉴定结果发现NDPK-A与Fussel-18、Rrp12体外存在相互作用。
- 吕芬刘忠银兴峰赵振岭陈妙娟张嘉萱陈伟钱垂文熊盛
- 关键词：表达纯化相互作用
