公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

猪戊型肝炎病毒ORF2-62的克隆、表达及间接ELISA方法的初步建立被引量：1: 2012年; 为了获得具有反应原性的重组蛋白,以该蛋白建立初步的间接ELISA检测方法。本研究通过RT-PCR从猪粪便中克隆了戊型肝炎病毒(HEV)ORF2与急性期血清反应的抗原决定簇基因片段,将该片段插入pET-32a表达载体,命名为pET32a-ORF2-62,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用1.0mmol/L IPTG进行诱导表达,通过Western-blotting检测其反应原性,并利用镍柱亲和层析纯化所获目的蛋白。结果,SDS-PAGE显示目的蛋白相对分子质量约为30 600,Western-blotting显示重组蛋白与HEV阳性血清反应,表明该蛋白具有良好的反应原性。经方阵滴定确定最佳包被浓度为7.7mg/L,血清最佳稀释比为1∶40。利用大肠杆菌表达的HEV重组蛋白建立了间接ELISA检测方法,此方法的建立为戊型肝炎早期诊断提供了一种快速简便的血清学诊断方法。; 王永霞郝成武马勋; 关键词：戊型肝炎病毒 ORF2 原核表达间接ELISA

检测猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ抗体乳胶凝集试验方法的建立被引量：4: 2012年; 采用Ni-NTA His.Bind方法纯化pET-28a-ApxⅣ2表达蛋白,以羧化乳胶为载体,经化学交联法致敏乳胶,对致敏条件优化后进行质量检测。结果显示,在pH 4.7的PBS缓冲液中,乳胶浓度为2%、蛋白质量浓度为1.5g/L,偶联8h后制备的致敏乳胶凝集反应最好,致敏乳胶抗原无自凝现象;与副猪嗜血杆菌、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、大肠杆菌和多杀性巴氏杆菌阳性血清不发生凝集;批内重复、批间重复试验很稳定;阳性血清敏感性可达1∶32。对比试验中与ELISA方法的符合率为80%,2种方法检测的结果基本相符。结果表明,试验初步建立了检测猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素抗体的乳胶凝集方法,为猪传染性胸膜肺炎的快速诊断提供了技术支撑。; 郝成武马勋; 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌乳胶凝集试验

戊型肝炎病毒流行病学研究进展被引量：9: 2010年; 戊型肝炎(HE)是由肝炎病毒科(hepeviridae)肝炎病毒属(hepevirus)戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)所引起的一种人兽共患传染病,主要经粪—口途径传播。对食源性戊型肝炎病毒感染的预防与控制、异种器官移植及猪源细胞的使用有重要意义。作者就该病近年的流行病概况、传播途径、动物宿主及人工感染试验进行了综述。; 王永霞郝成武马勋; 关键词：戊型肝炎流行病学

猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ N端基因的克隆、抗原表位的分析及表达被引量：1: 2011年; 参照猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)ApxⅣ基因序列(AF021919),从临床分离株2009JH扩增出1段2 427bp的序列,应用DNAstar等软件进行了序列分析和抗原表位的预测,利用PCR扩增了包含预测抗原位点的3个片段,ApxⅣ1(1～1 503bp)、ApxⅣ2(1 051～2 427bp)、ApxⅣ3(1 051～1 503bp),并构建了原核表达载体pET-ApxⅣ1,pET-ApxⅣ2,pET-ApxⅣ3。将重组表达质粒转入E.coli BL21,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE电泳分析及Western blot检测。结果显示,2009JH分离株ApxⅣN端序列与参考序列(AF021919)的同源性为98.00%,与血清1型、2型和7型的同源性分别为98.23%,99.46%,98.06%。3个片段的重组质粒分别诱导表达出相对分子质量为55 000,50 000,20 000的蛋白,Western blot检测显示除20 000蛋白未检测到特异性条带外,其余有很好的反应原性。; 郝成武王永霞马勋; 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌抗原表位克隆表达

猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣN端基因的原核表达及乳胶凝集方法的建立: 猪传染性胸膜肺炎（PCP）是由胸膜肺炎放线杆菌（APP）引起的一种高度传染性、致死性猪呼吸道疾病，以急性出血和慢性纤维素性胸膜肺炎病变为主要特征，自1957年Pattison等首次报道以来已在世界各地广泛流行。本研究是以...; 郝成武; 关键词：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌原核表达乳胶凝集; 文献传递

淫羊藿多糖提取工艺的优化及对小鼠细胞免疫功能的影响被引量：6: 2009年; 淫羊藿为小檗科淫羊属植物，是传统的补。肾助阳中药。现代药理试验结果表明，淫羊藿能增加心脑血管流量，促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有抗衰老、抗肿瘤的功效。多糖是淫羊藿发挥免疫调节作用的有效成分之一，试验在传统水提醇沉法的基础上运用超声波法提取淫羊藿多糖，通过正交设计优化并建立淫羊藿多糖的最佳提取工艺，并进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬试验和淋巴细胞转化试验，以探讨淫羊藿多糖对小鼠细胞免疫功能的影响。; 罗燕邵永斌谷新利郝成武; 关键词：淫羊藿多糖细胞免疫功能最佳提取工艺小鼠药理试验免疫调节作用

猪胸膜肺炎放线杆菌新疆株的分离鉴定及ApxⅣA基因的克隆与序列分析被引量：1: 2010年; 从新疆北疆4个规模化猪场的20份发病猪病料中分离到1株细菌。经形态染色镜检、培养特性、生化特性和部分生物学特性试验鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。根据猪胸膜肺炎放线杆菌ⅣA毒素基因特异性引物进行PCR扩增,得到1条与预期大小一致的2427bp的条带,将PCR产物纯化后克隆至pMD19-T载体上并测序。结果表明,该片段的碱基序列与GenBank中参考序列的同源性为98%,并与三株标准株比较,同源性分别为98.23%、99.46%和98.06%。; 郝成武王永霞李尚华马勋

全选清除导出

共1页<1>

郝成武