陈勇
- 作品数：68 被引量：166H指数：9
- 供职机构：蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 间日疟原虫MSP1-19基因的克隆与表达被引量：1
- 2011年
- 目的:构建间日疟原虫MSP1-19(Plasmodium vivax merozoite surface protein-1-19,Pv MSP1-19)基因克隆及表达的载体。方法:将MSP1-19基因克隆入原核表达载体pET28a中,构建重组表达载体。以重组载体转化大肠埃希菌BL21,在IPTG诱导下表达重组Pv MSP1-19蛋白。采用亲合层析纯化重组蛋白,应用SDS-PAG电泳和Western blot对表达产物进行鉴定和分析。结果:成功构建了质粒pET28a/Pv MSP1-19,并在大肠埃希菌中诱导可溶性表达的目的蛋白。表达的蛋白能与间日疟患者血清发生特异性结合反应。结论:成功地原核表达出Pv MSP1-19目的蛋白,为间日疟的疫苗研制提供了实验基础。
- 李光友陈勇夏惠方强刘丹买月琴贺文欣
- 关键词：间日疟原核表达基因表达
- 基于科研能力培养的医学微生物学实验教学改革初探被引量：3
- 2015年
- 在蚌埠医学院微生物教研室原有传统医学微生物实验教学模式基础上,通过增加综合性、设计性和研究性实验等多种手段,采用多种教学方法,以多种方式对改进教学体系的实际教学和应用效果进行考核、调查、分析及客观评价,进一步完善医学微生物实验教学体系建设。试图通过对传统医学微生物实验教学模式的改进,培养适应新时期国家经济建设与社会发展需要、高素质创新型高级医务人才。
- 吕杰刘从森陈勇王天宏孙慧管俊昌
- 关键词：医学微生物学实验教学
- 纯化的结核杆菌多肽抗原刺激人γδT细胞的效应分析被引量：10
- 2004年
- 目的 :探讨从结核杆菌多肽抗原 (Mtb Ag)纯化的多肽 (C主肽 )对人新鲜外周血γδT细胞的促增殖效应以及对已活化扩增的T细胞再次刺激的激活效应。方法 :采用不同剂量的C主肽体外刺激健康人外周血PBMC ,培养 10天时经流式细胞仪检测细胞表型 ;另外以γδT细胞活化标志分子CD6 9的表达为指标 ,分析C主肽对已被Mtb Ag激活扩增 13天的γδT细胞再次刺激的激活效应。同时以MTT法检测C主肽的再刺激对已活化扩增的γδT细胞的促增殖活性。结果 :结核杆菌C主肽对人新鲜的γδT细胞具有显著扩增效应 ;当C主肽再刺激已经活化的γδT细胞时 ,可使其显著表达CD6 9分子 ,同时对γδT细胞具有显著促增殖活性。结论 :结核杆菌C主肽可能是Mtb
- 陈勇吕合作李柏青王伟张海峰
- 关键词：ΓΔT细胞结核杆菌多肽抗原增殖活性CD69
- 间日疟原虫重组蛋白用于检测间日疟患者抗体水平的观察
- 2012年
- 目的观察间日疟原虫重组蛋白PvMSP1-19用于检测间日疟患者抗体水平的效果。方法采用His-tag亲和层析柱对间日疟原虫PvMSP1-19重组蛋白初步分离,再经快速蛋白液相色谱仪(FPLC)XK16/70 Superdex75预装柱进一步纯化和Western blot分析。用纯化后的PvMSP1-19重组蛋白包被ELISA板,检测间日疟现症患者、既往感染者和正常人血浆IgG1、IgG4、IgM、IgD、IgE抗体水平。结果间日疟现症患者血浆中抗PvMSP1-19 IgG1抗体水平明显高于间日疟既往感染者和正常人(t=5.535,P<0.05)。结论间日疟现症患者血浆中含有高水平的抗PvMSP1-19抗体IgG1。
- 李光友陈勇夏惠苏贵灵查争高杰黄亚银王亮
- 关键词：间日疟免疫球蛋白
- 刚地弓形虫缓殖子期特异抗原BSR4的重组表达与免疫特性的初步研究被引量：2
- 2012年
- 目的重组表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)Prugniaud(PRU)株缓殖子期特异抗原(BSR4)基因,并检测其免疫特性。方法将已构建的重组表达质粒pET28a(+)-BSR4转化至大肠埃希菌(E.coli)BL21中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化。分别以慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠血清和健康小鼠血清为一抗,用蛋白质印迹(Western blottting)鉴定BSR4重组蛋白的免疫反应性。用3H-TdR掺入法检测慢性感染PRU株刚地弓形虫小鼠脾淋巴细胞对不同浓度BSR4重组蛋白的特异性增殖水平,计算刺激指数(SI)。以BSR4重组蛋白为抗原,用ELISA法检测急性(抗弓形虫IgG-IgM+)和慢性(抗弓形虫IgG+IgM-)弓形虫病患者血清,以及健康人血清,各20份,评判该蛋白的免疫反应性。结果重组质粒pET28a(+)-BSR4经IPTG诱导后表达重组蛋白BSR4,经变性、复性和纯化后获得相对分子质量(Mr)45 000的可溶性蛋白。Western blotting分析结果显示,该蛋白能被慢性弓形虫感染小鼠血清识别。脾淋巴细胞增殖试验表明,1、5和25μg/ml重组蛋白BSR4刺激感染弓形虫小鼠脾淋巴细胞的SI分别为1.13、0.88和1.17,显著高于未感染组(分别为0.46、0.24和0.49,均P<0.01)。ELISA检测结果显示,BSR4抗原能被慢性弓形虫病患者血清(IgG+IgM-)特异性识别(20/20),而不能被急性弓形虫病患者血清(IgG-IgM+)识别(0/20)。结论重组BSR4蛋白具有特异的免疫原性和免疫反应性。
- 陈兴智郭凯陈勇刘丽丽沈继龙焦玉萌方强孙新
- 关键词：刚地弓形虫免疫原性免疫反应性
- 人γδT细胞TCR分子与结核杆菌多肽抗原特异性结合的证据
- 目的探讨γδT细胞对结核杆菌抗原(Mtb-Ag)识别的分子机制。方法采集人外周血(PB),分别经抗TCRγδ-PE和FITC标记的Mtb-Ag及其纯化的不同组分,结核杆菌高分子量蛋白组分(Mtb-HW-Ag)、低分子量多...
- 陈勇姚春艳吕合作李柏青
- 关键词：ΓΔT细胞结核杆菌抗原激光共聚焦显微镜
- 文献传递
- 刺激人γδ^+ T细胞增殖的结核杆菌多肽抗原的纯化与活性鉴定被引量：14
- 2003年
- 目的:纯化可刺激人γδ+ T细胞增殖的结核杆菌耐热多肽抗 原。方法:采用快速蛋白液相色谱仪(FPLC)S-100分子筛层析柱,对结核杆菌耐热抗原(Mtb-Ag)初步分离。将获得的结核杆菌耐热Mr低的多肽抗原(Mtb-LW-Ag)洗脱峰,分别再经FPLC Mono Q离子交换层析柱进一步纯化,并且采用流式细胞仪对获得的Mtb-LW-Ag进行刺激γδ+ T细胞增殖活性的测定。结果:Mtb-Ag经FPLC S-100柱可分离出1个大分子蛋白峰A和3个M,低的多肽峰(B,C,D)。Mr低的多肽峰分别经Mono Q柱层析,鉴定出B峰含有6个主峰,C峰含有1个主峰,D峰含有8个主峰。对Mtb-LW-Ag及其纯化多肽进行活性检测,发现多肽峰B和C以及纯化多肽B-Ⅲ和C-主肽均可显著刺激γδ+ T细胞扩增。结论:利用FPLC法可快速高效地从Mtb-Ag中纯化出多种Mr低的多肽,而且其中的B-Ⅲ多肽和C-主肽可能是促进γδ+ T细胞活化增殖的主要多肽。
- 陈勇吕合作胡建国候彦强张海峰李柏青何海辉
- 关键词：结核杆菌多肽抗原纯化活性鉴定
- 结核杆菌抗原诱导γδT细胞膜GM1表达的机理探讨
- 近年的研究表明,TCR与APC相互接触的膜区域形成紧密结合的结构,称为免疫突触。参与形成免疫突触的细胞膜区域又与脂筏(Lipid rafts)有密切关系。脂筏募集了GPI-连接的蛋白以及参与信号转导的蛋白分子,因此在T细...
- 吕合作陈勇李柏青
- 文献传递
- 内吗啡肽-1对人树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察内吗啡肽-1(EM-1)对人外周血来源树突状细胞TLR2和TLR4表达的影响。方法从人外周血中提取和分离单核细胞,在含重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4的完全培养基中培养,6 d后未成熟树突状细胞(im DC)分4组,空白对照组(BLA组)、EM-1组、LPS组、LPS+EM-1组。继续培养2 d后,流式细胞术检测各组DC表面TLR2、TLR4蛋白的表达;RT-PCR法检测各组DC中TLR2 mRNA、TLR4 mRNA的表达。结果流式结果显示,TLR2、TLR 4在im DC表达较高,随着DC成熟表达下降。与BLA组相比,EM-1组DC表面TLR2、TLR4的表达下调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+EM-1组DC表面TLR2、TLR4受体均明显下调(P<0.01)。RT-PCR的结果显示,与BLA组相比,EM-1干预后引起DC表面TLR2 mRNA表达明显降低(P<0.01),TLR4 mRNA的变化无差异(P>0.05);与LPS组相比,LPS+EM-1组DC表面TLR2 mRNA、TLR4mRNA均有所下调(P<0.05)。结论 EM-1使DC表面TLR2、TLR4的表达下调,EM-1对DC免疫功能的影响可能与DC表面TLR2、TLR4表达有关。
- 杨丽娟潘治宇陈勇陶志勇夏惠李正红
- 关键词：内吗啡肽-1树突状细胞免疫功能抗原提呈细胞
- 重组结核杆菌热休克蛋白Acr2的原核表达、纯化及鉴定的研究
- 2017年
- 目的原核表达、纯化结核杆菌热休克蛋白Acr2分子,并分析其免疫反应性。方法采用PCR法扩增结核杆菌Acr2基因,并构建重组表达质粒PET22b-Acr2,转化大肠埃希菌BL21(DE3)菌株,并用IPTG诱导Acr2蛋白表达。以及使用镍离子亲和层析柱纯化该表达产物,并通过Western blot检测其免疫反应性。结果 PCR、双酶切和测序结果均表明PET22b-Acr2重组质粒构建成功,其在大肠埃希菌中主要以包涵体蛋白形式进行表达。复性后的包涵体蛋白经镍离子亲和层析柱纯化后,可获得纯化的Acr2重组蛋白,该重组蛋白分子质量约为18.3ku,与结核分枝杆菌Acr2蛋白的理论预测值相符。经Western blot检测显示该重组蛋白能被结核病人血清特异性识别。结论原核表达质粒PET22b-Acr2被成功构建,以及Acr2重组蛋白被有效进行表达和纯化,从而为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 陈勇陈竹张奇声左益亮张灿李子昂陈乔夏惠
- 关键词：结核分枝杆菌热休克蛋白原核表达纯化
