韩慧新
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用PCR-SSCP法分析矽肺结核分支杆菌耐药基因突变规律被引量：1
- 2002年
- 李洪敏姜平王巍陈东进李素梅冯柏王金河韩慧新王玉芳
- 关键词：矽肺结核分枝杆菌耐药基因突变PCR-SSCP法
- 建立结核分枝杆菌耐药基因的检测方法
- 2001年
- 目的 了解耐药结核分枝杆菌基因突变情况 ,建立结核分枝杆菌耐药基因的检测方法。方法 1 0 8例临床痰标本分离株均做 PCR- SSCP和传统梯度药敏试验。结果 耐 SM( rpsl)、RFP( rpo B)、INH( kat G)基因突变率分别为 78.5 % ,78.2 % ,70 .5 %。其中高耐 SM、REP、INH分离株突变率分别为86.9% ,89.3% ,84.3%。低耐分离株突变率分别为 2 8.5 % ,1 6.6% ,7.1 %。结论 结核分枝杆菌耐药基因突变与耐药水平联系是密切的 ,且结核耐药分枝杆菌基因突变绝大多数易发生在高耐药株中 ,也有少部分在低耐药株发生突变。
- 李洪敏王薇李素梅韩慧新佟爱华肖漓张宾雷红刘军高杉
- 关键词：结核分枝杆菌药敏试验聚合酶链反应基因
- 结核分枝杆菌Rv3881c突变子的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达
- 2007年
- 目的:融合表达结核分枝杆菌Rv3881c突变子抗原,以便与其他已知的免疫显性抗原联合使用,有效增加结核分枝杆菌感染血清学检验的敏感性和特异性。方法:将克隆的来源于结核分枝杆菌H37Rv株的Rv3881c突变体基因插入原核表达载体pET24b,并在大肠杆菌BL21中获得高效表达;由于重组的Rv3881c突变子抗原片段同C端的6×His标签融合表达,使用Ni-柱进行快速纯化。结果:Western印迹表明,重组的Rv3881c突变子抗原同选取的6例结核病阳性临床血清标本均能发生明显的反应。结论:重组Rv3881c突变体具有较好的特异性,提示该抗原可能成为检测结核的有效抗原之一。
- 李邦印李大伟王臻吴雪琼王仲元王治伟韩慧新
- 关键词：结核分枝杆菌融合蛋白大肠杆菌
- 结核分枝杆菌19-kDa蛋白在大肠杆菌中的表达
- 2006年
- 目的 通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白。方法 应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37 Rv19-kDa DNA序列；以质粒pET24b为表达载体，构建19-kDa重组质粒，然后转化大肠杆菌BL21（DE3）；在异丙基硫代-13-D-半乳糖苷（IPTG）诱导下，分别对不同诱导时间的表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE），凝胶经考马斯亮蓝染色检测蛋白。结果重组质粒pET24b-19-kDa测序表明与报道的序列相同。它在大肠杆菌BL21（DE3）细胞内以可溶性形式表达。不同IPTG诱导时间实验表明重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白诱导3～4h重组蛋白在大肠杆菌中的表达量最高。结论 pET24b-19-kDa大肠杆菌工程株可高表达结核分枝杆菌重组19-kDa蛋白。
- 韩慧新李邦印吴雪琼张灵霞
- 关键词：结核分枝杆菌克隆基因表达
- 快速结核分支杆菌耐药基因的检测方法
- ＜正＞ 目的 本文通过PCR-SSCP技术,建立结核分枝杆菌耐药基因的检测方法,分析108例临床耐药株的基因突变,探讨耐药结核分支杆菌基因突变是否与临床药物的耐受性有联系。 方法 114例临床耐药株源于我院住院患者痰标本...
- 李洪敏李素梅韩慧新佟爱华肖漓张宾
- 文献传递
- 三种结核分支杆菌耐药基因的检测方法被引量：9
- 2002年
- 目的 建立 3种结核分支杆菌耐药基因的检测方法 ,了解耐药基因突变和耐药水平的关系。方法 10 8例临床痰标本分离株均做聚合酶链反应 -单链构象多态性 (PCR -SSCP)和传统梯度药敏试验。结果 耐SM (rpsL)、RFP (rpoB)、INH (KatG)基因突变率分别为 78.5 % ,6 8.2 % ,70 .5 % ,其中 ,高耐SM ,RFP ,INH分离株分别为 86 .5 % ,89.3% ,84 .3% ;低耐分离株分别为 2 8.5 % ,16 .5 % ,7.1%。结论 结核分支杆菌耐药基因突变与耐药水平有密切联系 ,绝大多数结核分支杆菌耐药基因突变发生在高耐药株 ,少部分在低耐药株发生基因突变。
- 李洪敏王巍李素梅韩慧新佟爱华肖漓张宾雷红刘军
- 关键词：结核分支杆菌药物耐受性聚合酶链反应单链构象多态性抗结核药物
- 结核病临床分离株及痰标本中embB基因型的快速测定被引量：2
- 2005年
- 目的建立快速测定结核病耐乙胺丁醇(EMB)分离株和痰标本中结核分枝杆菌EMB耐药基因型的方法,以期为患者提供及时、有效地化验结果。方法应用16SrDNA聚合酶链反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)对11株耐EMB分离株和46例结核病痰标本进行分子菌种鉴定和embB基因突变的部位与性质分析。结果以结核分枝杆菌H37Rv标准株为对照,11株耐EMB分离株和46例临床痰标本经16SrDNAPCR-SSCP分析电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同;限制性内切酶Nla消化embB基因扩增产物显示,11株耐EMB分离株中4株(36.4%)不被Nla消化;46例结核病痰标本中10例(21.7%)不被Nla消化。结论部分结核分枝杆菌耐EMB是由于embB基因突变所致,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP方法可直接快速测定结核病耐EMB分离株和痰标本中结核分枝杆菌耐EMB基因型。
- 张俊仙吴雪琼韩慧新李洪敏梁建琴陆阳
- 关键词：单链构象多态性限制性片段长度多态性乙胺丁醇结核病
