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可溶性重组hTRAIL蛋白抑制U251细胞生长: 2011年; 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)是TNF超家族中的成员,能够广泛诱导肿瘤细胞凋亡,对正常细胞无明显毒副作用.TRAIL已成为肿瘤治疗领域的研究热点.人脑胶质瘤是神经系统肿瘤中最常见类型,占颅内肿瘤50%～60%,5年存活率为20%～30%.本研究探讨可溶性TRAIL蛋白对人脑胶质瘤细胞(U251)的抑制作用.由大肠杆菌表达系统表达的TRAIL多为包涵体,为获得可溶性的蛋白,将hTRAIL95～281功能区基因片段插入到pHisSUMO表达载体,经IPTG低温诱导表达,Ni-NTA Agarose纯化后获得可溶性SUMO-hTRAIL,经SUMO ProteaseⅠ切去SUMO融合标签后获得成熟可溶hTRAIL蛋白.以U251细胞为靶细胞,通过MTT法检测TRAIL对肿瘤细胞的抑制作用.结果证明,TRAIL对U251细胞的抑制呈剂量依赖关系,最大抑制率为53.9%.流式细胞仪检测TRAIL诱导U251细胞凋亡实验中,对照组细胞存活率为92.2±0.8%,实验组细胞存活率为35.5±1.2%,证明重组蛋白具有生物学活性,并在体外能明显诱导U251肿瘤细胞发生死亡.本研究结果为TRAIL蛋白在临床上应用于肿瘤治疗奠定了基础.; 颜世君吴云舟高振秋叶贤龙张巧何金娇任桂萍李德山; 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 SUMO 肿瘤治疗

人抵抗素基因表达与白血病发病的相关性研究被引量：1: 2009年; 抵抗素(resistin)自2001年被发现以来,人们对其生物学功能尚不清楚。本研究目的是通过抵抗素的组织表达分布以探讨人抵抗素的生物学功能、表达及与白血病发病的相关性。选择152例无炎症并发症的白血病病人作为实验组,100例健康志愿者作为对照组,采集静脉血血样,采用半定量PCR方法检测抵抗素在组织中的表达分布并比较抵抗素与内参基因表达的相对值,进行统计学分析。结果表明:抵抗素在正常人骨髓、胎儿肝脏,脐带血以及外周血细胞中有高水平表达,而在脂肪、脐带、胎盘以及成人肝脏组织中尚没有扩增出目的基因。实验发现,实验组抵抗素表达率为21%,对照组抵抗素表达率为27%,经卡方检验,χ2=0.84,差异不显著。对实验组与对照组抵抗素表达水平比较结果进行了统计学分析,差别无统计学意义(p>0.05)。结论:抵抗素在正常人骨髓、胎肝、脐血及外周血细胞中有高表达,此结果表明人抵抗素的表达与正常造血相关,但其表达率和表达水平与白血病无明显相关性。; 吴桐任桂萍徐彤张薇高振秋颜世君洪珞珈赵红丽李德山; 关键词：抵抗素造血系统白血病

重组新城疫病毒Anhinga株与TRAIL蛋白协同杀伤肿瘤细胞被引量：5: 2011年; 将新城疫病毒(Newscastle disease virus,NDV)Anhinga株的全长基因组cDNA克隆质粒、pTM1-L、pTM1-P、pTM1-NP表达质粒共转染稳定表达T7 RNA聚合酶的BSRT7/5细胞,得到拯救NDV病毒.通过PCR、酶切法、测序证明拯救病毒中存在引入的分子标签.通过血凝实验、蚀斑测定证明成功拯救病毒.并研究了该重组病毒对4种不同人肿瘤细胞的体外杀伤效果.首次证明重组Anhinga株对SMMC-7721细胞、A549细胞、HepG2细胞和SH-SY5Y细胞均有杀伤作用.该重组病毒主要诱导SMMC-7721细胞和A549细胞凋亡,诱导HepG2细胞和SH-SY5Y细胞坏死.TNF家族成员TRAIL蛋白可以显著增强NDV杀伤肿瘤细胞的效果.本实验为进一步研究重组NDV用于肿瘤治疗奠定基础.; 郝景波王文飞吴云舟刘铭瑶高振秋张巧颜世君李德山; 关键词：新城疫病毒肿瘤治疗

重组新城疫病毒NDV-rAnh//EGFP的构建及其抑制肿瘤效果的研究: 癌症是人类死亡的主要病因。在临床癌症治疗中,传统的化疗和放疗治疗疗效有限,并具有强烈的毒副作用,促使科研学者寻找新的肿瘤治疗手段。应用溶瘤病毒治疗肿瘤是近年来发展非常迅速的一种肿瘤治疗策略。新城疫病毒/(Newacstl...; 颜世君; 关键词：重组新城疫病毒反向遗传操作技术肿瘤细胞; 文献传递

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颜世君