新型冠状病毒肺炎患者IgM抗体与血细胞计数及C反应蛋白的相关性研究 被引量:5 2020年 目的 探讨白细胞计数、C反应蛋白及新型冠状病毒(SARS-CoV-2)特异性IgM抗体在新型冠状病毒感染的肺炎(COVID-19)患者临床诊断中的应用价值。方法 对59例COVID-19确诊患者疾病早期的外周血白细胞、淋巴细胞及C反应蛋白进行检测分析,并采用胶体金免疫层析技术检测不同病程患者血清中SARS-CoV-2特异性IgM抗体的水平。结果①59例确诊患者中,白细胞计数正常或降低者为57例(96.61%),淋巴细胞计数降低为20例(33.9%),C反应蛋白升高者为41例(69.49%)。COVID-19患者与健康人群相比,外周血白细胞、淋巴细胞及C反应蛋白的差异有统计学意义(P< 0.05);②59例确诊患者中,52例(88.14%)患者血清SARS-CoV-2特异性IgM抗体检测为阳性,健康体检者IgM抗体均为阴性。COVID-19患者在病程第(0~6)d、(7~10)d、(11~15)d、(16~20)d血清SARS-CoV-2特异性IgM抗体阳性率分别为25%、81.82%、90%、100%。③IgM阳性组与IgM阴性组比较,外周血白细胞、淋巴细胞及C反应蛋白水平的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 ①机体感染SARS-CoV-2后,外周血白细胞计数一般正常或减低,部分患者出现淋巴细胞减少,常伴有C反应蛋白升高。动态观察白细胞、淋巴细胞和C反应蛋白的变化,对于COVID-19的临床诊断和病情观察具有重要意义。②胶体金免疫层析技术检测患者血清中的SARS-CoV-2特异性IgM抗体可用于SARS-CoV-2感染患者的辅助诊断。 黄琼 徐云云 刘海燕 李宗光 吴萍 胡安群关键词:新型冠状病毒 血细胞计数 C反应蛋白 IGM抗体 Toll样受体信号通路在调控树突状细胞成熟中的作用研究 被引量:2 2014年 目的探讨TLR信号通路在调控树突状细胞(DC)熟过程中的作用。方法用密度梯度离心法从人外周富集血中分离单个核细胞(PBMC),以GM-CSF和IL-4体外诱导成未成熟DC(imDC),用电穿孔法把A549的总RNA转染入imDC,分别用传统细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2)和改良细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN)刺激DC的成熟。实验分为4组,对照组:GM-CSF、IL-4;传统组:传统细胞因子鸡尾酒;改良1组:IL-1β、IL-6、TNF-α、polyⅠ∶C、CpG ODN);改良2组:IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN。用RTPCR法检测RNA的转染效率,流式细胞术检测DC和DC致敏T细胞的表面标志,ELISA法检测IL-12的分泌水平,MTT法检测T细胞的增殖。结果 1)RT-PCR检测:电穿孔法能使A549的总RNA成功转入DC,并使DC表达组织多肽特异性抗原(TPS)、癌胚抗原(CEA)和细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)等肿瘤抗原。2)流式检测:CD83各组表达率分别为(15.17±1.61)%、(64.33±7.58)%、(60.26±4.18)%和(82.89±3.06)%,CD1a表达率分别为(25.74±6.06)%、(69.37±8.16)%、(61.66±5.82)%和(86.07±5.63)%(P<0.05),各组CD8+T细胞比例分别为(36.43±3.15)%、(61.91±2.33)%、(54.81±2.55)%和(66.78±2.74)%(P<0.05)。3)各组IL-12的分泌水平分别为(55.86±14.07)、(1 243.49±57.57)、(744±49.51)和(2 385±128.98)pg/mL(P<0.05)。4)各组刺激指数分别为11.85±2.61、54.14±3.81、47.57±3.14和64.43±5.88,阳性对照组为135.29±5.06(P<0.05)。结论TLR配体polyⅠ∶C和CpG ODN可以促进DC的分化成熟。 周志风 王保龙 魏静 蔡秋妍 潘健 陈家萍 应美爱 沈佐君 李庆 黄琼 罗朋关键词:电转染 CPG ODN 改良的混合细胞因子在诱导树突状细胞中的作用研究 被引量:2 2016年 目的:探讨"改良"的混合细胞因子(cytokine cocktail)在诱导树突状细胞(DC)成熟和提高其迁移能力中的作用。方法:采用密度梯度离心法从人外周血干细胞(PBSC)中分离单个核细胞(PBMNC),以GM-CSF和IL-4体外诱导成未成熟DC(imDC),用电穿孔法把A549的总RNA转染入imDC。分别用"金标准"混合细胞因子和"改良"的混合细胞因子刺激DC成熟。用流式细胞术检测各组DC表面标志(CD11c、HLA-DR、CD80、CD83和CD86)和趋化因子受体(CCR5、CCR7和CXCR4)的表达;RT-PCR检测各组DC趋化因子受体(CCR2、CCR5、CCR7、CXCR3和CXCR4)和趋化因子(CCL2、CCL3、CCL5、CCL19、CCL21、CXCL10和CXCL12)mRNA的表达水平。结果:与"金标准"混合细胞因子相比,"改良"的混合细胞因子DC较高水平表达其表面标志(CD11c、HLADR、CD80、CD83和CD86)、趋化因子受体(CXCR4)和趋化因子(CCL2,CCL3、CCL5、CCL19、CCL21、CXCL10和CXCL12)。结论:与"金标准"混合细胞因子诱导相比,"改良"的混合细胞因子诱导能更好地诱导DC的成熟并提高其迁移能力。 许伟 王保龙 黄琼 周志风 罗鹏关键词:树突状细胞 趋化因子受体 趋化因子 改良细胞因子鸡尾酒诱导肺腺癌细胞总RNA转染树突状细胞疫苗抗肿瘤效应的体内研究 被引量:1 2015年 目的探讨不同细胞因子鸡尾酒诱导的树突状细胞(DC)疫苗对裸鼠移植瘤的抗肿瘤作用。方法从38名外周血干细胞移植术供者的外周血中分离单个核细胞(PBMC),诱导成未成熟DC,将人肺腺癌细胞A549总RNA电转染入DC,分别用传统细胞因子鸡尾酒(IL-6、IL-1β、TNF-α、PGE2)和改良细胞因子鸡尾酒(IL-1β、IL-6、TNF-α、PGE2、polyⅠ∶C、CpG ODN)刺激DC成熟。致敏DC与自体T细胞混合培养,诱导产生抗原特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),用流式细胞术鉴定T细胞表型,ELISA法检测IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-5和IL-10的分泌。建立肺腺癌A549荷瘤裸鼠模型,随机分为空白对照组、未成熟组、传统组和改良组(n=5),于肿瘤接种d15、d22、d29给予相应CTL治疗,测量肿瘤体积和重量,免疫组化法和Western blotting检测肿瘤组织COX-2、VEGF、Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果1)CD3+CD8+T细胞表达率(%):未成熟组、传统组和改良组分别为35.00±3.24 vs 57.10±2.69 vs 63.98±1.96(P<0.05);2)IFN-γ浓度(pg/mL):3组分别为160.12±42.01 vs 263.17±55.30 vs 1 034.30±253.07(P<0.05);TNF-α浓度(pg/mL):3组分别为72.72±9.13 vs 65.20±8.03 vs 295.89±123.80(P<0.05);IL-10浓度(pg/mL):3组分别为7.26±1.76 vs 31.06±4.19 vs 44.01±12.12(P<0.05);3组IL-4、IL-5含量均未检测出,可见改良组T细胞分泌Th1型细胞因子IFN-γ和TNF-α的能力较未成熟组和传统组明显增强;3)经CTL免疫治疗后,裸鼠肿瘤体积(mm3):3组分别为512±33 vs 345±63 vs203±52(P<0.05),且改良组抑瘤率最大,为69.62%;4)改良组DC诱导的CTL明显上调Bax的表达,下调COX-2、VEGF和Bcl-2的表达。结论改良细胞因子鸡尾酒诱导肺腺癌细胞总RNA转染的DC疫苗能诱导Th1型免疫应答及产生有效的抗原特异性CTL,对肺腺癌裸鼠移植瘤具有良好的抑制作用。 黄琼 胡安群 王保龙关键词:树突状细胞疫苗 细胞毒性T淋巴细胞 抗肿瘤效应 肺腺癌 裸鼠 COVID-19与普通病毒性肺炎的临床特征分析 2020年 目的观察新型冠状病毒肺炎(COVID-19)和普通病毒性肺炎的血液炎症标志物、影像学检查、以及临床症状的差异,以选出更便捷的指标辅助诊断COVID-19。方法选取2020年1月23日~2月18日在安徽医科大学附属安庆医院住院的COVID-19患者83例作为实验组,另选择同期在安庆市立医院住院的普通病毒性肺炎患者14例为对照组,比较两组一般情况、临床症状、肺部CT特征,C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)和淋巴细胞计数(LY)等指标结果。结果实验组中发热、有痰、畏寒比例分别为72.29%、37.35%、30.12%,低于对照组的100.00%、50.00%、57.14%,差异有统计学意义(P<0.05);实验组肺部CT特征呈斑片状高密度影比例为13.25%,低于对照组的35.71%,差异有统计学意义(P<0.05);两组肺部CT呈磨玻璃样、索条状、磨玻璃+索条、斑片状+索条、磨玻璃+实变、正常、磨玻璃+斑片比例比较,差异无统计学意义(P>0.05);ROC曲线显示,各指标诊断COVID-19的曲线下面积顺序为0.641(LY)>0.544(WBC)>0.521(NEUT)>0.395(PCT)>0.296(CRP)。结论新型冠状病毒肺炎的临床特征与普通病毒性肺炎相似,两者CT表现也较为一致,PCT、CRP对诊断2019新冠肺炎感染的诊断价值低,WBC、NEUT对诊断2019新冠肺炎感染的诊断价值略低,LY对诊断2019新冠肺炎感染的诊断价值较高。 丁雪 刘海燕 胡安群 徐云云 黄琼关键词:炎症标志物 C反应蛋白 香烟暴露与戒烟对大鼠支气管肺泡灌洗液IL-8、GSH和肺组织HDAC2的影响 研究背景: 慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)作为一种慢性炎症性疾病,以气流受限不完全可逆为特征,呈进行性发展,与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症... 黄琼关键词:戒烟 支气管肺泡灌洗液 白细胞介素-8 肺组织 改良细胞因子鸡尾酒诱导肺腺癌细胞总RNA转染树突状细胞疫苗抗肿瘤效应的体内研究 目的:针对目前研制的树突状细胞(dendritic cell,DC)疫苗不能有效地诱导抗肿瘤免疫应答的现状,利用Toll样受体(TLR)配体在传统细胞因子鸡尾酒的基础上进行改良,制备出更有效的DC疫苗应用于临床。建立荷瘤... 黄琼关键词:肺腺癌 树突状细胞疫苗 抗肿瘤效应 免疫应答 文献传递