倪娜
- 作品数：19 被引量：51H指数：4
- 供职机构：滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省医药卫生科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 太平洋牡蛎中Cg-IL-17和Cg-TGF-β的表达及其免疫作用的研究
- 2015年
- 目的:探讨Cg-IL-17和Cg-TGF-β在太平洋牡蛎中表达的组织定位、免疫作用及其可能的机制。方法:采用Real-time PCR、原位杂交和图像分析的方法进行研究。结果:实时定量PCR研究表明,Cg-IL-17和Cg-TGF-β在弧菌感染后的太平洋牡蛎的鳃、外套膜、心包液、唇须、消化道和闭壳肌中表达明显增强。原位杂交实验结果表明,Cg-IL-17和Cg-TGF-β在未染菌组牡蛎的消化道、消化腺、鳃、唇须、外套膜中都有表达;染菌组以上各组织中的Cg-IL-17和Cg-TGF-β表达量均有显著增高,而消化道、消化腺中的表达量明显高于其他组织,闭壳肌中也均有微弱表达;感染弧菌前后两种基因在性腺中均未见表达。相关性分析发现这两种基因表达量在唇须和外套膜中具有明显的相关性。结论:Cg-IL-17和Cg-TGF-β具有多种生物学效应,且都参与了太平洋牡蛎的固有免疫反应;消化道可能是牡蛎主要的免疫反应器官之一;Cg-IL-17和Cg-TGF-β在唇须和外套膜中可能存在调控关系或协同作用。
- 董洪亮刘乃国倪娜李彩玉郑静苗双
- 关键词：太平洋牡蛎
- 产前筛查、无创DNA产前检测与改良的羊水产前诊断比较分析被引量：11
- 2015年
- 目的探讨血清学产前筛查、无创DNA产前检测与改良的羊水产前诊断3种方法在常见的染色体非整倍体疾病方面的临床应用价值。方法首先利用联合血清学筛查检测孕妇血清中的甲胎蛋白(AFP)和游离绒毛膜促性腺素(HCG)β亚基的水平,结合孕妇年龄、孕周、体重等因素,通过Life-Cycle3.2软件计算得出风险系数;筛查高风险孕妇再抽取静脉血,利用无创DNA产前检测方法检测3条染色体(21、18、13)是否有数目异常;对于结果异常的孕妇进一步做改良的羊水产前诊断,以核实无创检测结果的准确性。结果 3557例孕妇中,血清学产前筛查高风险孕妇178例,阳性率为5.00%,其中21-三体和18-三体高风险孕妇共158例;ONTD高风险孕妇20例,阳性率为0.56%。筛查出的21-三体和18-三体高风险孕妇进行无创DNA产前检测,阳性结果为8例,占筛查阳性的比率为4.49%;这8例孕妇均行改良的羊水产前诊断,结果胎儿染色体均为非整倍体,证实21-三体、18-三体和13-三体的符合率均为100.00%。结论无创DNA产前检测可以作为产前诊断21-三体、18-三体和13-三体3种染色体非整倍体疾病的首选,该技术大大减少了侵入性的产前诊断技术对胎儿和孕妇的创伤,是今后发展的必然趋势。
- 郑静卓越李彩玉刘乃国倪娜董洪亮
- 关键词：染色体非整倍体产前筛查
- 巨细胞病毒感染与女性不孕的相关性研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究巨细胞病毒感染与女性不孕的相关性。方法随机选取了300例女性不孕患者作为研究组,300例孕前健康查体患者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的抗HCMV IgM抗体。结果研究组中45例阳性,阳性率为15.0%;对照组中7例阳性,阳性率2.3%,两组比较,差异非常显著(P<0.01)。结论女性不孕症的发生与HC-MV感染有较密切的关系。
- 郑静卓越李彩玉孙大康胡凤爱倪娜
- 关键词：巨细胞病毒不孕酶联免疫吸附试验
- PU.1和IL-9在肺纤维化大鼠周围免疫器官内的表达及其作用研究被引量：1
- 2017年
- 目的探讨肺纤维化大鼠周围淋巴器官内PU.1和IL-9的表达以及1,25-(OH)_2D_3对其表达的影响。方法 150只雄性SD大鼠随机分为2个大组:预防组(对照组Ⅰ、模型组Ⅰ、给药组Ⅰ,n=30)和治疗组(对照组Ⅱ、模型组Ⅱ、给药组Ⅱ,n=20)。大鼠气管内注射博来霉素建立肺纤维化模型,给药组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3进行预防和治疗。用Real-time PCR和免疫组化方法研究了肺纤维化大鼠淋巴结节和脾脏内PU.1和IL-9的表达状况。结果在建模14、21、28 d 3个时间点,模型组Ⅰ/Ⅱ的淋巴结和脾脏内IL-9蛋白质表达都明显高于对照组Ⅰ/Ⅱ中的表达(P<0.05)。建模21 d时,模型组Ⅰ的脾内PU.1蛋白质表达明显高于对照组Ⅰ(P<0.05);建模28 d时,模型组Ⅰ/Ⅱ的淋巴结和脾脏内PU.1 mRNA和蛋白质表达都明显高于对照组Ⅰ/Ⅱ(P<0.05)。而给药组Ⅰ/Ⅱ的淋巴结和脾脏内IL-9和PU.1的表达与模型组Ⅰ/Ⅱ相比,在各时间点都没有统计学差异(P>0.05)。结论在肺纤维化大鼠的外周淋巴器官中,IL-9较早出现高表达(14 d),并一直维持,而PU.1在较晚时期出现高表达(21 d),提示这2种细胞因子在大鼠肺纤维化发生发展中可能都具有一定的作用。1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠外周淋巴器官中的IL-9和PU.1表达没有明显的影响,说明其治疗作用可能与IL-9和PU.1无关。
- 刘乃国董洪亮倪娜许梦婷郑静王楠李新静
- 关键词：肺纤维化SD大鼠IL-9淋巴结
- 组蛋白H3Ser10磷酸化对猪卵母细胞减数分裂的影响被引量：1
- 2020年
- 目的组蛋白磷酸化修饰在卵母细胞减数分裂过程中作用机制的研究较少。文中旨在探讨猪卵母细胞中组蛋白H3的磷酸化模式及对卵母细胞减数分裂过程的调控。方法首先采用免疫组化法鉴定组蛋白H3Ser10(H 3S10)磷酸化在猪卵母细胞减数分裂过程的表达情况,随后体外成熟猪卵母细胞,将卵丘卵母细胞复合体(COCs)分为4个组,一组正常培养作为对照组,另外3组分别添加5、10、30μmol/L ZM447439的成熟液,体外培养27 h,分别为5、10、30μmol/L ZM447439处理组。统计卵母细胞在减数分裂各个时期所占的比例,并进一步检测猪卵母细胞组蛋白H3S10磷酸化的表达模式及蛋白激酶Aurora B基因表达的情况。结果与GVBD期组蛋白H3S10磷酸化水平比较,MI期和AI期明显升高(P<0.05),AI期较MⅡ期明显升高(P<0.05)。与对照组相比,10、30μmol/L ZM447439处理组GVBD期卵母细胞比例[(32.14±0.51)%、(95.34±0.59)%]较对照组[(2.56±0.03)%]增加(P<0.05),MI[(66.88±0.13)%、(4.66±0.04)%]较对照组[(87.42±0.14)%]明显下降(P<0.05)、AI期[(1.01±0.03)%、(0.00±0.00)%]较对照组[(10.02±0.21)%]明显下降(P<0.05)。与对照组卵母细胞发生H3S10去磷酸化修饰比例(0)比较,10μmol/L、30μmol/L ZM447439处理组[(35.2±0.39)%、(95.4±0.65)%]明显升高(P<0.05)。与对照组相比,10、30μmol/L ZM447439处理组Aurora B基因的相对表达量显著降低(P<0.05)。结论组蛋白H3S10磷酸化修饰在哺乳动物卵母细胞成熟过程起着一定作用。Aurora B激酶抑制剂ZM447439处理引起组蛋白H3S10磷酸化水平及Aurora-B激酶的表达降低导致卵母细胞成熟障碍。
- 田明明孙大康孟玮王楠倪娜李清春王雁林孙洪亮
- 关键词：猪卵母细胞组蛋白减数分裂
- 大鼠肺纤维化和活性维生素D_3干预后P32和PKD1的表达及作用研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨大鼠肺纤维化发生发展中透明质酸结合蛋白(P32)和蛋白激酶D1(PKD1)的表达及相互作用,以及活性维生素D_3(VD_3)干预后这2种因子表达的变化。方法90只清洁级雄性SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组通过气管内注射博来霉素(BLM,5 mg/kg)的方法复制大鼠肺纤维化模型,对照组经气管注射等体积的生理盐水(500μl/kg)。术后第2天,治疗组腹腔注射VD_3(2μg/kg),模型组腹腔注射等量的VD_3的溶剂(99.9%丙二醇和0.1%乙醇),对照组腹腔注射等量的生理盐水,各组均注射1次/2 d。各组分别于术后第14、21、28天处死10只大鼠。通过检测大鼠肺组织羟脯氨酸含量来验证肺纤维化,应用实时聚合酶链反应(real-time PCR)和免疫组织化学技术分别检测大鼠肺组织中P32和PKD1的表达水平。结果纤维化早期(14 d),治疗组中P32和PKD1 m RNA和蛋白质表达量与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组均高于模型组;相关性分析发现这2种基因的m RNA和蛋白质表达量具有相关性。结论在大鼠肺纤维化过程中,活性VD_3可能在纤维化早期促进P32和PKD1的表达,通过P32和PKD1在线粒体内的相互作用来实现抗氧化作用,进而抑制肺纤维化的发生发展。
- 倪娜刘乃国高海洋郑静董洪亮王楠
- 关键词：SD大鼠肺纤维化活性维生素D3
- 1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠中PI3K、AKT、mTOR表达的影响及其机制研究被引量：7
- 2018年
- 目的观察1,25-(OH)_2D_3对特发性肺纤维化(IPF)大鼠中PI3K、AKT、m TOR表达的影响,并探讨其对IPF的作用机制。方法90只雄性SD大鼠随机分为模型组、治疗组及对照组,每组30只。模型组和治疗组按5 mg/kg的剂量气管内注射博来霉素,复制肺纤维化模型,对照组注入无菌生理盐水(200μl/只)。注射后第2天起,治疗组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3(2μg/kg),模型组和对照组分别腹腔注射1,25-(OH)_2D_3溶剂(200μl/只)和无菌生理盐水(200μl/只),均隔天1次。各组于第14、21和28天分别处死10只,检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量,实时聚合酶链反应(real-time PCR)和免疫组织化学方法分别从m RNA水平和蛋白质水平检测肺组织中PI3K、AKT、m TOR的表达。结果模型组和治疗组大鼠肺组织羟脯氨酸的含量,PI3K、AKT、m TOR 3种基因的转录表达和蛋白质表达量,在第14、21和28天均高于对照组(P<0.05),且治疗组中的上述指标,在各时间又均低于模型组(P<0.05)。结论IPF的发生发展过程中,PI3K-AKT-m TOR通路具有重要作用,1,25-(OH)_2D_3对IPF有一定的治疗作用,其机制可能是通过抑制PI3K-AKT-m TOR通路发挥其治疗作用。
- 董洪亮刘乃国苗双郑静倪娜王楠成苗青
- 关键词：1,25-(OH)2D3特发性肺纤维化
- 活性维生素D3对大鼠肺纤维化中蛋白激酶D1介导的抗氧化通路的影响被引量：3
- 2016年
- 目的：探讨肺纤维化发生发展中蛋白激酶D1（PKD1）介导的线粒体抗氧化通路的作用以及活性维生素D3在纤维化过程中对该通路的影响。方法：雄性SD大鼠随机分成对照组、模型组和治疗组。应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学分别从mRNA和蛋白质水平检测大鼠肺组织中PKD1、核转录因子（NF-κB）和锰超氧化物歧化酶（MnSOD）的表达。结果：在第14天，治疗组和模型组中PKD1、NF-κB和MnSOD的表达量都显著低于对照组，而治疗组中3种因子的表达量又明显高于模型组；在第21天，3种因子在模型组和治疗组中的表达量明显高于对照组。在第28天，3种因子在模型组和治疗组中的表达量与对照组相比两两之间均没有差异。结论：PKD1-MnSOD线粒体抗氧化通路在博莱霉素引起的大鼠肺纤维化早期发挥重要作用，活性维生素D3能够上调这一抗氧化通路，具有一定的抗氧化作用，对大鼠肺纤维化的发生发展具有一定的抑制作用。
- 倪娜刘乃国高海洋董洪亮郑静王楠
- 关键词：肺纤维化活性维生素D3锰超氧化物歧化酶核转录因子-ΚB
- 1,25-(OH)_2D_3对肺纤维化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca^(2+)浓度和PI3K/AKT/mTOR通路的影响被引量：10
- 2016年
- 目的特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)是一种慢性炎症性疾病,病因不明,缺乏有效的治疗方法。文中旨在探讨肺泡Ⅱ型上皮细胞中Ca^(2+)和PI3K/AKT/mTOR通路在大鼠IPF中的作用,以及1,25-(OH)_2D_3对Ca^(2+)浓度和PI3K/AKT/mTOR通路的影响。方法 150只雄性SD大鼠随机分为:预防组(对照组Ⅰ、模型组Ⅰ、给药组Ⅰ,每组20只)和治疗组(对照组Ⅱ、模型组Ⅱ、给药组Ⅱ,每组30只)。对照组Ⅰ/Ⅱ行气管暴露手术,气管内给以200μL/只的无菌等渗盐水,并分别于第2和14天开始腹腔注射等渗盐水(200μL/只);模型组Ⅰ/Ⅱ气管内灌注博来霉素(5 mg/kg),并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射维生素D3的溶剂(0.1%乙醇和99.9%的丙二醇,1μL/g体重);给药组Ⅰ/Ⅱ气管内灌注博来霉素(5 mg/kg),并分别于手术后第2和14天开始腹腔注射1,25-(OH)_2D_3(2μg/kg体重)。大鼠气管内注射博来霉素建立IPF模型,给药组腹腔注射1,25-(OH)_2D_3进行预防和治疗。检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量,分离肺泡Ⅱ型上皮细胞并用Fluo-3AM荧光负载,激光共聚焦显微镜检测细胞内Ca^(2+)浓度。RT-PCR方法检测PI3K、AKT、mTOR mRNA的表达水平。结果模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中大鼠肺组织中羟脯氨酸的含量、肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca^(2+)浓度以及PI3K、AKT、mTOR mRNA表达,在各时间点与相应对照组Ⅰ/Ⅱ相比均明显升高(P<0.05或P<0.01);给药组Ⅰ/Ⅱ与模型组Ⅰ/Ⅱ相比,上述指标均有显著降低(P<0.05或P<0.01)。模型组Ⅰ/Ⅱ和给药组Ⅰ/Ⅱ中Ca^(2+)浓度与PI3K、AKT、mTOR mRNA表达之间具有显著正相关(r=0.598 8、r=0.623 0、r=0.6603,P<0.01;r=0.7012、r=0.6323、r=0.7403,P<0.01)。结论 PI3K-AKT-mTOR通路在大鼠IPF的发生发展中起重要作用,1,25-(OH)_2D_3可以降低肺泡Ⅱ型上皮细胞内Ca^(2+)的浓度,抑制PI3K-AKT-mTOR通路,进而抑制IPF的发生发展。
- 董洪亮刘乃国苗双倪娜郑静王楠李新静
- 关键词：1,25-(OH)2D3肺纤维化肺泡II型上皮细胞CA^2+浓度
- 1株黄河三角洲来源杂色曲霉A.versicolor BHT-72的次级代谢产物研究被引量：2
- 2023年
- 目的 研究1株黄河三角洲盐碱地曲霉属真菌A. versicolor BHT-72的次级代谢产物及其生物活性。方法 采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析、ODS柱层析、高效液相(HPLC)等色谱方法对该菌株的次级代谢产物分离纯化,并通过核磁共振(NMR)、质谱(MS)等方法,结合相关文献对比鉴定化合物结构;分别采用CCK8法和改良的Ellman法对化合物进行抗肿瘤和抗乙酰胆碱酯酶抑制活性的测试。结果 从A. versicolor BHT-72的大米发酵产物中共分离得到10个单体化合物,分别为diorcinol(1)、12-O-acetyl-sydowinin A(2)、sydowinin A(3)、13-O-acetylsydowinin B(4)、sydoxanthone(5)、3-formylindole(6)、尿苷(7)、zarzissine(8)、6-氨基嘌呤核苷(9)、6-氨基嘌呤脱氧核苷(10)。细胞毒活性测定结果显示,化合物1在质量浓度为30μg/mL时,对鼻咽癌细胞CNE-2的抑制率为65.0%,对非小细胞肺癌H1299和H520的抑制率分别为81.3%和87.0%。化合物2在质量浓度为30μg/mL时对H1299细胞的抑制率为49.8%。在质量浓度为100μg/mL时,化合物1~5对乙酰胆碱酯酶具有一定的抑制活性,抑制率分别为59.4%、60.0%、54.6%、40.0%和66.6%。结论 黄河三角洲盐碱地真菌A. versicolor BHT-72能产生结构多样的活性次级代谢产物,化合物1和2对鼻咽癌细胞CNE-2、非小细胞肺癌H1299和H520具有一定的细胞毒活性,化合物1~5具有一定的乙酰胆碱酯酶抑制活性。
- 司婕倪娜刘孟珊贺倩倩张臻苗双满玉清宫凯凯
- 关键词：黄河三角洲乙酰胆碱酯酶抑制活性
