刘树文
- 作品数：6 被引量：24H指数：4
- 供职机构：南京工业大学化学化工学院材料化学工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划江苏省“青蓝工程”基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 过量表达Bacillus subtilis磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶对大肠杆菌产琥珀酸的影响被引量：8
- 2010年
- 在大肠杆菌厌氧混合酸发酵途径中,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PPC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶(PCK)皆可催化由磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)到草酰乙酸(OAA)的反应。鉴于经由PCK催化的反应伴有ATP的生成,理论上更有利于菌体生长和产酸,本研究以大肠杆菌W3110(△pfl,△ldh)为出发菌株,利用λ-Red同源重组系统构建了其ppc缺陷菌株并在此基础上过量表达了Bacillus subtilispck基因。初步的厌氧发酵实验表明:过量表达pck可在一定程度上恢复初始菌株厌氧代谢葡萄糖的能力。其中又以ppc缺陷株更为明显,其耗糖能力和产酸能力分别为对照菌株的4.2和15.3倍。
- 于丽姜岷马江锋岳方方刘树文
- 关键词：磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶大肠杆菌琥珀酸
- 有氧阶段菌体生长调控对大肠杆菌工程菌厌氧发酵产丁二酸的影响
- 研究了调控工程菌有氧生长的葡萄糖补料策略对既得细胞厌氧发酵的影响。通过摇瓶分批厌氧发酵筛选出最佳转厌氧时机为菌体以比生长速率0.07 h-1生长至OD600=30,此时发酵罐上转厌氧得到丁二酸浓度94.2 g/L,生产强...
- 刘树文姜岷马江峰陈可全于丽岳方方徐冰
- 关键词：大肠杆菌丁二酸发酵调控
- 产琥珀酸大肠杆菌工程菌株的构建被引量：8
- 2010年
- 大肠杆菌在厌氧条件及不额外添加电子受体的条件下可利用葡萄糖进行混合酸发酵,主要产物为甲酸、乙酸和乙醇,丁二酸及乳酸含量较低。为减少副产物的生成,使更多的代谢流流向丁二酸,本研究拟失活厌氧条件下甲酸、乙酸及乳酸主要生成途径相关的酶(乳酸脱氢酶和丙酮酸甲酸裂解酶)。借助Red重组系统和位点特异性重组技术,无痕敲除了野生大肠杆菌W3110染色体上编码2个酶的基因pfl和ldh,构建了1株pfl和ldh双突变重组菌JM130(7△pfl△ldh),并引入PYC前后对比实验表明:JM1307(pTrc99a-pyc)较出发菌株解除了生长抑制,在8g/L初糖条件下,发酵48h,菌体密度可提高至OD6002.5,产物主要为丁二酸(2.8g/L),乙酸含量很低,无甲酸、乳酸生成。
- 岳方方姜岷马江锋于丽刘树文韦萍
- 关键词：大肠杆菌琥珀酸丙酮酸羧化酶RED重组
- 产琥珀酸重组大肠杆菌的发酵性能研究被引量：4
- 2010年
- 研究了重组大肠杆菌JM001(△ppc)/pTrc99a-pck发酵产琥珀酸的性能,结果表明厌氧条件下其耗糖能力和产酸能力分别为对照菌株JM001的4.2倍和15.3倍。进一步优化发酵条件表明:采用接入菌泥的发酵方式比按照10%接种量转接厌氧发酵的效果要好,琥珀酸的对葡萄糖的质量收率提高了约10%,且副产物乙酸的量进一步降低。初始葡萄糖浓度高于60g/L时会对菌株的生长和产酸产生抑制,且浓度越高,抑制作用越明显。7L发酵罐放大实验中,整个厌氧发酵阶段葡萄糖的消耗速率为0.42g/(L·h),琥珀酸对葡萄糖的质量收率为67.75%,琥珀酸的生产强度为0.28g/(L·h)。
- 于丽马江锋岳方方刘树文姜岷
- 关键词：大肠杆菌琥珀酸磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶
- 有氧生长调控策略对大肠杆菌工程菌厌氧发酵生产丁二酸的影响被引量：3
- 2010年
- 研究了调控工程菌有氧生长的葡萄糖补料策略对既得细胞厌氧发酵的影响。通过摇瓶分批厌氧发酵筛选出最佳转厌氧时机,为菌体以比生长速率0.07h-1生长至OD600=30,此时发酵罐上转厌氧发酵得到丁二酸浓度94.2g/L,生产能力1.76g(/L.h),葡萄糖收率105%。
- 刘树文姜岷马江峰陈可泉于丽岳方方徐冰
- 关键词：大肠杆菌丁二酸发酵调控
- 循环利用重组大肠杆菌细胞转化合成丁二酸被引量：4
- 2010年
- 研究了回收丁二酸发酵液中的大肠杆菌进行细胞转化的可行性,以转化率和生产效率为指标,考察了不同菌体浓度、底物浓度、pH调节剂对细胞转化的影响。发酵结果表明大肠杆菌可以在仅含有葡萄糖和pH调节剂的水环境中转化生产丁二酸,并确定了最佳的转化条件为:细胞浓度(OD600)50,底物浓度40g/L,缓冲盐为MgCO3。基于优化好的条件,在7L发酵罐中进行重复批次转化,第1次转化的转化率和生产效率分别达到91%和3.22g/(L·h),第2次转化的生产效率和转化率达到了86%和2.04g/(L·h),第3次转化的转化率和生产效率分别达到了83%和1.82g/(L·h)。
- 徐冰姜岷马江锋刘树文侯顾伟隋姗姗
- 关键词：丁二酸大肠杆菌
