唐敏
- 作品数：79 被引量：215H指数：7
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- 过表达hepaCAM下调AKT/FOXO信号通路抑制膀胱癌细胞的增殖
- 本文对过表达hepaCAM下调AKT/FOXO信号通路抑制膀胱癌细胞的增殖进行了研究。本研究分为两个部分： 第一部分：hepaCAM和FOXO3在膀胱癌中的表达及相关性。 目的：收集临床标本研究肝细胞粘附分子(hep...
- 唐敏
- 关键词：膀胱肿瘤病理细胞学
- Notch1在BMP9诱导iMEF细胞成骨分化中的作用被引量：6
- 2015年
- 目的研究Notch信号中Notch1受体在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导的永生化小鼠胚胎成纤维细胞(immortalized mouse embryonic fibroblasts,i MEF)成骨分化中的作用。方法利用Notch1受体显性负性突变体(dominant negative mutant,dn Notch1)处理i MEF细胞,首先分别采用细胞化学染色、活性测定和RT-PCR了解Notch1对早期成骨指标碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和晚期成骨指标骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的影响;其次用Western blot、荧光素酶和RT-PCR检测Notch1对BMP9经典信号通路中Smad1/5/8磷酸化和Smad结合元件(smad-binding element,SBE)活性影响;最后用结晶紫染色和流式细胞仪分析其对细胞增殖、周期及凋亡的影响。结果与对照组相比,dn Notch1处理i MEF第3、5、7天后,ALP活性均降低(P<0.05),并呈剂量依赖性,11 d时OPN和OCN表达量也下调(P<0.05);BMP9经典通路中Smad1/5/8蛋白量没有明显变化,而p-Smad1/5/8蛋白及SBE活性受到了抑制(P<0.05);结晶紫染色及流式细胞仪分析结果显示dn Notch1能够抑制BMP9诱导的i MEF早期细胞增殖,但对细胞凋亡无影响。结论 dn Notch1竞争抑制Notch1信号,使BMP9诱导i MEF的成骨分化能力显著下降,其可能通过抑制BMP信号通路的活化和i MEF早期增殖两方面来实现。
- 杨伦韵张晓艳廉静曹俊杰罗进勇唐敏
- 关键词：NOTCH1骨髓间充质干细胞
- Notch信号参与BMP4诱导的间充质干细胞成骨分化及其机制的初步探讨被引量：7
- 2017年
- 目的:探讨Notch信号对骨形态发生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)诱导间充质干细胞成骨分化的影响以及作用机制。方法:(1)DAPT或Ad-dominant-negative mutants of Notch1(Addn Notch1)和BMP4-CM处理小鼠胚胎成纤维细胞,检测早期成骨指标碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP);(2)茜素红S染色实验检测晚期成骨钙盐沉积情况;(3)半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨分化相关基因ALP,Runx2,Col1a1的表达;(4)免疫细胞化学检测p-Smad1/5/8的表达;(5)结晶紫染色和流式细胞术检测细胞的增殖及周期改变。结果:(1)DAPT抑制BMP4诱导的早期成骨分化,且呈浓度依赖性;(2)Delta-like 1(DLL1)促进BMP4诱导的成骨分化,DAPT和dn Notch1抑制BMP4诱导的成骨分化;(3)DLL1促进BMP4诱导的成骨相关基因ALP,Runx2,Col1a1的表达,DAPT抑制这些基因的表达;(4)DLL1促进BMP4诱导的细胞核内p-Smad1/5/8的表达,而DAPT抑制其表达;(5)DLL1促进BMP4诱导的细胞增殖,而DAPT抑制BMP4诱导的细胞增殖。结论:Notch信号通过BMP/Smads信号通路促进BMP4诱导的MSCs成骨分化,在此过程中也有促细胞增殖的作用。
- 曹俊杰李爱芳卫亚琳廉静唐敏
- 关键词：NOTCH信号间充质干细胞成骨分化
- 内参基因GAPDH和β-actin在BMP9诱导的骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达情况被引量：3
- 2015年
- 目的:观察常用内参基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和β肌动蛋白(β-actin)在骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化过程中表达情况,以确定相关研究的内参基因。方法:检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)确定BMP9诱导的MSCs(包括C3H10、C2C12和MEF)向成骨分化;以real-time PCR分别检测0、1、3、5、7 d GAPDH和β-actin的m RNA表达水平;以Western blot检测GAPDH和β-actin蛋白。结果:(1)β-actin在BMP9诱导的MSCs成骨分化过程中m RNA表达水平逐渐升高,0 d与5 dβ-actin的m RNA表达量存在统计学差异(C3H10、C2C12和MEF的P值均为0.000,GAPDH的m RNA表达水平未见明显改变(P>0.05);β-actin蛋白表达量随成骨分化逐渐增加,而GAPDH蛋白表达未见明显变化。结论:在BMP9诱导的MSCs成骨分化过程中,GAPDH比β-actin更适合做内参。
- 杨伦韵张晓艳廉静罗进勇唐敏
- 关键词：内参基因骨髓间充质干细胞成骨分化
- 分离、鉴定CD133^+人肝癌干细胞以及^(131)I-CD133mAb对其生物学效应的影响被引量：5
- 2014年
- 目的分离、鉴定CD133+人肝癌干细胞以及131I-CD133mAb对其生物学效应的影响。方法为选择最适的细胞系,流式细胞仪检测Huh-7和HepG2细胞中CD133表达率;磁珠分选Huh-7细胞,流式细胞仪检测分选后CD133表达率;体外成球、克隆形成实验及体内成瘤实验验证干细胞特性;氯胺T法制备131I标记CD133单克隆抗体(131ICD133mAb)并鉴定;取分选后的CD133+-Huh-7细胞、Huh-7细胞和HepG2细胞进行实验,将每种细胞分成4组(131ICD133mAb组、131I组、CD133mAb组、131I+CD133mAb组);MTT法检测各组对CD133+-Huh-7细胞生长抑制的最适剂量和各组在最适剂量作用后24、48、72 h对3组细胞生长抑制率;流式细胞仪检测131I-CD133mAb作用3组细胞72 h时细胞凋亡和细胞周期的变化。结果 Huh-7和HepG2细胞系CD133表达率分别为18.8%和5.2%,故选用Huh-7细胞进行分选;磁珠分选后CD133+-Huh-7细胞CD133的表达率为99.28%,与分选前比较差异有统计学意义(P<0.01)。CD133+-Huh-7细胞相对于CD133--Huh-7细胞具有更强的体外成球能力、克隆形成能力和体内成瘤能力。131I-CD133mAb标记率为87.92%,放射化学纯度为97.54%,具有较好的稳定性和免疫活性。当131I 4.8 MBq/100μL、CD133mAb 4.8μg/100μL时对CD133+-Huh-7细胞抑制率最高(P<0.05),取此放射性浓度进行实验。24、48、72 h时各组对CD133+-Huh-7细胞的抑制作用明显高于Huh-7和HepG2细胞组,131I-CD133mAb组对3种细胞生长抑制率明显高于其余各组,抑制率随时间的增加而升高(P<0.01)。131I-CD133mAb作用CD133+-Huh-7细胞72 h后凋亡率为31.21%,明显高于其余2组(P<0.05)。细胞周期检测结果显示CD133+-Huh-7细胞G0/G1期减少54.77%,明显高于其余2组(P<0.05)。结论 CD133+细胞具有肿瘤干细胞特性,131I-CD133mAb能特异性结合CD133+-Huh-7细胞,调控细胞周期和诱导细胞凋亡。
- 侯妍利唐敏陈兴月段丽群康强强舒锦李少林
- 关键词：CD133肝癌干细胞^131I
- DLL1在骨形态形成蛋白9诱导骨髓间充质干细胞成骨分化中的作用被引量：3
- 2016年
- 目的探讨Notch配体Delta-like1(DLL1)在骨形态形成蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)诱导的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化中的作用及机制。方法利用DLL1重组腺病毒上调永生化小鼠胚胎成纤维细胞(immortalized mouse embryonic fibroblasts,i MEF)中DLL1 mRNA的表达,分别采用细胞化学染色、活性测定对早期成骨指标碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和晚期成骨指标钙盐沉积的影响;其次裸鼠皮下异位成骨实验进一步了解DLL1的体内成骨作用;最后用qRT-PCR、Western blot和荧光素酶检测DLL1对BMP9经典信号通路中Ⅰ型受体、Smad1/5/8磷酸化和Smad结合元件(smad-binding element,SBE)转录活性影响。结果与对照组相比,DLL1在体外能明显促进BMP9诱导的MSCs早期成骨指标ALP活性和晚期成骨指标钙盐沉积的生成;同时也能明显促进BMP9诱导的MSCs裸鼠皮下异位成骨作用;BMP9信号通路中ALK2表达明显增加,而对ALK1则没有影响;Smad1/5/8蛋白量没有明显变化,而p-Smad1/5/8蛋白及SBE活性明显增加(P<0.05)。结论 DLL1可以促进BMP9诱导的MSCs成骨分化,可能通过影响BMP9信号通路来实现其促成骨作用。
- 廉静杨伦韵曹俊杰罗进勇何百成唐敏
- 关键词：间充质干细胞NOTCH信号通路
- Notch信号通过MAPK途径参与BMP9诱导的间充质干细胞C2C12成骨分化被引量：3
- 2013年
- 目的探讨Notch信号是否通过MAPK通路影响BMP9诱导C2C12细胞成骨分化。方法利用BMP9腺病毒处理C2C12细胞5d后,用PCR和Western blot检测MAPK通路中P38、Erk1/2和JNK总蛋白以及磷酸化水平。用Notch信号特异性抑制剂DAPT阻断Notch信号后,细胞化学染色分析ALP和钙盐沉积,以及早晚期成骨指标Runx2和OCN在RNA以及蛋白水平上的变化。同时检测BMPs靶基因Id1、Id2和Id3 RNA水平的表达和MAPK信号中P38、Erk1/2和JNK总蛋白以及磷酸化水平变化。结果 BMP9能上调Hey1和Notch信号的配、受体表达;BMP9不影响P38、Erk1/2和JNK总蛋白的表达,但能上调其磷酸化水平;DAPT能抑制BMP9诱导C2C12细胞的ALP活性以及钙盐沉积;影响Runx2和OCN成骨标志物的表达;阻断Notch信号后Id1、Id2和Id3表达受到抑制,P38、Erk1/2磷酸化水平下调,而JNK磷酸化水平无明显变化。结论 Notch信号通过MAPK途径参与了BMP9诱导的C2C12细胞的成骨分化。
- 谢佳瑛胥文春张晓艳谌海兰唐敏
- 关键词：NOTCH信号通路MAPK途径成骨分化
- JAG1影响血管生成并促进三阴性乳腺癌细胞的迁移、侵袭和粘附被引量：3
- 2022年
- 目的探究JAG1对三阴性乳腺癌(TNBC)恶性表型的影响,并研究乳腺癌微环境血管生成的机制。方法体外培养人TNBC细胞231和231B,Q-PCR实验检测Notch相关分子的表达水平。动物实验将雌性裸鼠分为231组和231B组,5只/组,乳腺脂肪垫分别注射231和231B细胞1×106/只。4~6周取肿瘤组织进行免疫组化和免疫荧光实验。使用JAG1重组蛋白处理231细胞和DAPT处理231B细胞,实验分4组:231空白对照组;rJAG1处理231组;231B空白对照组;DAPT处理231B组。用CCK-8法、Hoechst 33258染色实验、划痕愈合实验、Transwell小室实验和内皮细胞粘附实验检测TNBC的生物学特性变化。使用Westernblot检测231和231B生物学特性相关蛋白的水平。接下来体外培养血管内皮细胞HUVEC,TNBC条件培养基处理HUVEC,实验分5组:(1)HUVEC阴性对照组;(2)231空白条件培养基处理组;(3)rJAG1处理231的条件培养基处理组;(4)231B空白条件培养基处理组;(5)DAPT处理231B的条件培养基处理组。CCK-8实验和基质胶成管实验分别检测HUVEC的增殖与成管能力。结果与231细胞相比,231B表达更高的JAG1(P<0.05)。231B肿瘤表达更高的VEGFA和CD31。与231空白组相比,rJAG1处理组中231细胞的迁移、侵袭和粘附能力明显受到促进(P<0.05)。Twist1和Snail的蛋白水平均增加(均P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达量增加(P<0.05),而DAPT明显抑制231B的相关现象和指标。JAG1过表达的条件培养基增加了HUVEC的细胞数以及成管数量(P<0.05)。结论JAG1可能影响TNBC的恶性表型,并促进微环境的血管生成。
- 刘俊平石宇彤吴敏敏徐梦岐张凤梅何志强唐敏
- 关键词：三阴性乳腺癌血管生成血管内皮细胞生长因子肿瘤微环境
- 释疑检验热点问题
- 2006年
- 检验医学(Laboratory Medicine)是现代实验室技术与临床医学的结合,是涉及多学科和多种技术的一门综合性学科,随着基础医学的发展,其在整个医疗活动中的地位和作用已经发生了深刻的变化,检验工作已经渗透到临床医疗的每一个环节,为临床疾病的诊断、治疗、病情观察及预后判断提供更直接的科学依据.……
- 唐敏戴勇
- 关键词：循证检验医学临床医生标本采集
- LncRNA SNHG3对宫颈癌细胞SiHa增殖、迁移及侵袭的影响被引量：6
- 2021年
- 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)小核仁RNA宿主基因3(SNHG3)对人宫颈癌细胞系SiHa增殖、迁移及侵袭的影响。方法利用GEO数据库芯片分析lncRNA SNHG3在正常宫颈组织和宫颈癌样本中的表达;通过实时定量PCR检测LncRNA SNHG3、上皮-间质转化标志物N-cadherin、Snail、Vimentin和E-cadherin基因表达水平;通过Western blot检测Ncadherin、Snail、Vimentin和E-cadherin蛋白表达水平;在SiHa细胞中转染siRNA干扰片段来敲低lncRNA SNHG3,并采用qRTPCR验证转染效率;通过CCK8实验检测细胞增殖能力,划痕愈合实验检测细胞横向迁移能力,Transwell小室实验检测细胞纵向迁移及侵袭能力。结果 LncRNA SNHG3在宫颈癌组织及细胞系中高表达;敲低lncRNA SNHG3后,明显抑制SiHa细胞的增殖能力(P<0.001)、迁移能力(P<0.01)和侵袭能力(P<0.001);qRT-PCR和Western blot结果显示敲低lncRNA SNHG3可下调N-cadherin、Snail和Vimentin表达水平(P<0.001),同时上调E-cadherin表达水平(P<0.001)。结论 LncRNA SNHG3可通过激活EMT通路促进宫颈癌细胞SiHa增殖、迁移及侵袭能力。
- 孙子久胡静胡凯唐敏孙恃雷方玉婷余伙梅张彦
- 关键词：宫颈癌长链非编码RNA增殖迁移
