姜民 作品数:5 被引量:10 H指数:2 供职机构: 复旦大学脑科学研究院 更多>> 发文基金: 国家教育部“985工程” 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 更多>>
一种用于细胞分层培养的玻片 本实用新型属于微生物培养器械技术领域,涉及一种用于细胞分层培养的玻片;所述玻片设有卷折部分,包括卷边玻片和卷盖玻片;所述的卷边玻片由平面和卷边组成,平面的两侧设有卷边;所述的卷角玻片由平面和卷角组成,平面的四角设卷角。所... 周密 姜民文献传递 原代神经元与星形胶质细胞的混合培养方法 被引量:7 2013年 原代培养的海马神经元是研究神经细胞中蛋白运输与亚细胞空间定位的有效研究工具。本文旨在建立海马神经元与皮层胶质细胞混合培养的方法,以期提供状态良好的神经元供研究用。新生2~3 d Sprague-Dawley(SD)大鼠断头处死,从大脑半球表面片取2~3片皮层组织,切碎后用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,种植于25cm2培养瓶内。种植后第四天,采用剧烈敲击培养瓶的方法去除非星形胶质细胞的杂质细胞,继续培养贴壁细胞直至细胞接近铺满瓶底,改用含阿糖胞苷的神经细胞培养液。原代培养的大鼠海马神经元种植在这种预先培养好的皮层星形胶质细胞层上。镜下观察结果显示,本方法培养的原代星形胶质细胞纯度较高,共培养的神经元状态较佳,存活时间长,突触前结构发育良好,可以耐受转染操作。以上结果提示,本文所建立的原代神经元与星形胶质细胞的混合培养方法操作简单,能够可靠地培养出健康的神经元。 石莹 周密 姜民关键词:神经元 胶质细胞 共培养 激光共聚焦同步双扫描技术在斑马鱼前脑神经发育研究中的应用 被引量:3 2013年 随着标记蛋白光转换等实验技术在生物科研领域的开展,对激光共聚焦取图技术也提出了越来越高的要求。本文旨在以斑马鱼前脑神经发育为研究对象,建立应用激光共聚焦同步双扫描系统的实验模式。本实验将36~48h的转基因Tg(lhx5:kaede)斑马鱼胚胎麻醉固定后,以光诱导变色荧光蛋白kaede标记的前脑神经元作为实验观察目标,使用激光共聚焦同步双扫描系统的405nm紫外激光刺激扫描感兴趣区域的同时,进行488nm和559nm激光刺激取图,实时观察kaede蛋白光学信号的转换状态,并在光转换后记录紫外激光刺激区域神经元的投射形态图像。结果显示,激光刺激引起kaede蛋白从绿色转变为红色,其在感兴趣区域的分布变化指示出目标神经元的胞体位置及其轴突投射路径。由上述结果可见,激光共聚焦同步双扫描技术的应用满足了kaede蛋白光转换实验的刺激和扫描同步的要求,该技术在斑马鱼胚胎特定神经元形态发育研究中的应用,可作为神经发育研究的一种实验模式在很多实验设计中进行延伸,也为激光共聚焦双扫描技术的推广提供了一个很好的平台。 石莹 高景霞 彭刚 姜民关键词:斑马鱼 光转换 神经发育 光纤式在体荧光显微成像系统在动态观测活体动物脑内神经元中的应用 2012年 本文旨在利用光纤式在体荧光显微成像系统,建立大鼠脑内神经元的在体显微荧光连续观察的实验方法。将含有绿色荧光蛋白的重组病毒载体(Ubi-GFP)微注射到Sprague Dawley(SD)大鼠大脑皮层区,7天后用微创手术将光纤探头植入动物脑内目标位置,使用在体荧光显微成像技术观察到微注射区GFP标记神经元的特异性荧光信号。随后对大鼠脑组织行冰冻切片,荧光显微镜对切片的观察结果验证了在体荧光显微成像实验中观察到的荧光信号。该方法既保证了在体实验中动物处于生理状态,又满足了体内神经组织荧光显微水平成像的要求,可以用于动物脑内神经元荧光信号的在体追踪记录,为在体神经科学实验提供了有效的技术保障。 石莹 陈露岚 姜民关键词:绿色荧光蛋白 神经元 人类VRK3基因和HSPBAP1基因的克隆与功能研究 大鼠小分子量热休克蛋白结合蛋白1(PASS1,protein associated with smallstress proteins1)是近来发现的一个与hsp27特异性结合调控应激过程的一个蛋白.我们通过大规模测序以... 姜民关键词:表达谱芯片 热休克蛋白 文献传递