孙琼
- 作品数：13 被引量：174H指数：5
- 供职机构：上海市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 一个同时具有β和α珠蛋白基因异常家系的分子诊断被引量：4
- 1996年
- 为对一个同时具有β和α珠蛋白基因变异家系中的成员进行分子诊断，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、多重等位基因特异ＰＣＲ（ＭＡＳ－ＰＣＲ）和双链ＤＮＡ循环测序法等基因分析技术。结果表明：具有中间型β地中海贫血表现型的先证者的基因型为βＩＶＳ－Ⅱ－６５４（Ｃ→Ｔ）杂合子复合αααａｎｔｉ４．２／αα；其父亲为典型的βＩＶＳ－Ⅱ－６５４（Ｃ→Ｔ）杂合子；而母亲的α珠蛋白基因型为αααａｎｔｉ４．２／α－３．７。肽链体外生物合成速率测定结果提示先证者的β珠蛋白肽链的合成速率明显降低（α／β＝２．６３），表明α珠蛋白基因组织的三体型与β地中海贫血杂合子复合存在是导致中间型β地中海贫血的重要分子基础。
- 陈坚刘炜培盛敏陈美珏陈美珏黄淑帧孙琼
- 关键词：中间型珠蛋白基因基因突变
- 124例HbH患者α珠蛋白基因的分析被引量：11
- 1999年
- 目的分析１２４例ＨｂＨ患者的α珠蛋白基因的分子缺陷状况及其分布，为ＨｂＨ的基因诊断和产前诊断提供科学依据。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、限制性内切酶分析ＰＣＲ产物、血红蛋白电泳和ＬｏｎｇＰＣＲ等技术，对受检ＨｂＨ病患者的α珠蛋白基因组织进行了鉴定。结果在１２４例ＨｂＨ病患者中，缺失型患者有８３例，占６６．９％；其中右侧缺失型（α－３．７）４５例，占缺失型患者总数的５４．２％，主要分布于广东、湖北、云南等省区，左侧缺失型（α－４．２）３８例，占缺失型患者总数的４５．８％，主要分布在广西和江西；非缺失型患者４１例，占３３．１％；其中ＨｂＣｏｎｓｔｎｔＳｐｒｉｎｇ（ＨｂＣＳ）患者９例，占非缺失型患者总数的２２．０％，Ｈｂ广西（ＨｂＱＳ）患者３例，占非缺失型患者总数的７．３％，其他α＋地贫突变类型２９例，占非缺失型总数的７０．７％。结论不同地区ＨｂＨ患者的α珠蛋白基因的突变类型有明显的差异，该项研究为ＨｂＨ病的分子遗传学和ＨｂＨ病的基因诊断提供了依据。
- 陈坚孙琼陈美珏陈美珏黄淑帧
- 关键词：Α-地中海贫血Α珠蛋白基因贫血
- 46,XY女性性反转患者SRY基因启动子区一个新的点突变及其功能分析被引量：4
- 1997年
- 通过ＤＮＡ序列测定在一名４６，ＸＹ女性性反转患者ＳＲＹ基因启动子区发现了一个新的突变：ｎｔ．－８１Ｇ→Ａ．该突变不见于正常男性，因此不是ＤＮＡ多态性．为了检测这一点突变对ＳＲＹ基因表达功能的影响，构建了分别由正常或突变的人ＳＲＹ基因启动子区片段调控氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）报告基因表达的两个质粒，寡核苷酸探针杂交证实该启动子片段正常或携带有Ｇ→Ａ突变．这两个质粒分别与ｐＳＶ－β－半乳糖苷酶内对照质粒共转染ＨｅＬａ细胞后，瞬间表达分析显示这一突变对ＣＡＴ酶活性水平无显著影响（０．５０＞Ｐ＞０．２０）．上述正常和突变的ＳＲＹ基因启动子片段与Ｋ５６２细胞核抽提物的凝胶阻滞实验也表明，突变对Ｋ５６２细胞核蛋白与ＳＲＹ基因启动子区的结合影响不大．
- 陈云弟周刚孙琼陆建英曾溢滔
- 关键词：性反转综合征SRY基因点突变
- 性分化异常病人的SRY基因研究
- 1995年
- 性别决定是生物学和医学研究的重大课题,长期以来一直吸引着各国科学家的兴趣,研究焦点集中在对雄性决定因子的研究。1959年,首次阐明了Y染色体是决定人类和其他哺乳动物的雌性表型;1966年,将雄性决定区定位在Y染色体短臂;70年代后,随着分子生物学的迅速发展,雄性决定因子被精确定位在Yp1区,直至1990年发现的SRY基因(sex
- 黄英陈美珏孙琼曾溢滔
- 关键词：性别决定哺乳动物基因序列
- 一个HPFH复合β地中海贫血家系的^Aγ珠蛋白基因分析被引量：2
- 1997年
- 一个ＨＰＦＨ复合β地中海贫血家系的Ａγ珠蛋白基因分析孙琼陈美珏任兆瑞曾溢滔我们已报道过一个β地中海贫血（β地贫）复合遗传性持续性胎儿血红蛋白症（ＨＰＦＨ）的家系［１］。研究结果表明，该家系的β地贫基因为ＩＶＳ－Ⅱ－６５４Ｃ→Ｔ剪接缺陷型突变，来自母系...
- 孙琼陈美珏任兆瑞曾溢滔
- 关键词：地中海贫血Γ珠蛋白基因分析
- 试管牛和试管羊胚胎性别的鉴定被引量：56
- 2000年
- 奶牛和山羊的卵母细胞经过体外成熟、体外受精和体外发育至桑椹期 ,在显微操作下 ,吸取4～6个胚胎细胞 ,应用巢式PCR技术对其DNA进行SRY基因的测定以进行胚胎性别鉴定。共有27枚转有外源基因的试管牛胚胎和207枚转基因试管羊胚胎进行了SRY基因检测。选取10枚经过性别鉴定的牛胚胎移植于8头受体母牛和124枚已知性别的羊胚胎移植于44头受体母羊 ,移植后妊娠率分别为37 5% (牛 ,3/8)和61 4% (羊 ,27/44)。最后产生1头分娩牛犊和2头流产胎牛以及14头分娩羊羔和2头流产胎羊 ,它们的性别与胚胎性别鉴定的结果完全相符。
- 黄淑帧陈美珏黄英孙琼陆建英任兆瑞曾溢滔
- 关键词：体外受精性别鉴定早期胚胎转基因家畜
- 应用多重等位基因特异PCR技术进行β地中海贫血的基因诊断被引量：16
- 1995年
- 在等位基因特异ＰＣＲ及多重ＰＣＲ的基础上建立了多重等位基因特异ＰＣＲ技术（ＭＡＳＰＣＲ），对中国人常见的－２８Ａ→Ｇ，ＣＤ１７→０，ＣＤ４１－４２（－４ｂｐ）和ＣＤ７１－７２（＋Ａ）等β地中海贫血基因突变进行检测，应用该技术对２１例β地中海贫血患者或携带者进行基因诊断和２例高风险胎儿进行产前诊断诊断，诊断结果与ＰＣＲ／ＡＳＯ探针点杂交或ＤＮＡ测序的结果完全一致，证实多重等位基因特异ＰＣＲ技术具有简便、快速、可靠和经济等优点。
- 毛跃华孙琼李峥盛敏黄淑帧曾溢滔
- 关键词：Β地中海贫血多聚酶链反应基因诊断产前诊断
- 反义核酸对β-地中海贫血基因(IVS-2-654C→T)剪接缺陷抑制作用的研究被引量：2
- 1997年
- 应用体外转录和体外剪接系统，以体外转录产生的特异性反义RNA封闭IVS－2－654→T突变基因中3’隐匿剪接位点和5’异常剪接位点，使之失去活性，以减少异常加工的mRNA，且部分恢复了正常剪接途径，其正常剪接mRNA的水平［β／（β十β）］从处理前的0．25上升到处理后的0．46—0．61。研究结果提示了应用反义核酸临床治疗β－地贫（IVS－2－654C→T突变）的可能性。
- 宫澜孙琼任兆瑞黄淑帧曾溢滔
- 关键词：反义核酸地中海贫血基因治疗
- 山羊β-酪蛋白基因启动子指导的转基因小鼠乳汁高效表达人凝血因子Ⅸ被引量：53
- 2002年
- 为探讨应用转基因动物乳腺生物反应器高效表达人凝血因子IX(humanclottingfactorIX ,hFIX)的可行性 ,构建了包括山羊 β 酪蛋白基因启动子和外显子 1、内含子 1、外显子 2共约 6 .7kb片段以及hFIX全长cDNA序列和部分经改造的内含子 1的乳腺表达载体 ,通过转基因技术获得 12个原代转基因小鼠 (9♀ ,3♂ ) ,整合率为 11.2 %。经ELISA和Westernblot鉴定 8只转基因母鼠乳汁中有hFIX的表达并拥有很高的凝血活性 ,其中一只的表达量高达5 2 .9mg/L ,其凝血活性亦高达 2 79.2 %。FISH实验表明不同的转基因小鼠外源基因整合于小鼠的不同染色体上。结果证明所构建的山羊 β 酪蛋白基因启动子乳腺表达载体能有效指导hFIX基因在小鼠乳腺中高效表达 ,并能保持hFIX的生物活性。
- 黄赞颜景斌黄缨孙琼肖艳萍黄英曾溢滔
- 关键词：山羊转基因小鼠
- βIVS-Ⅱ-1 G→A复合三联α基因所致的韩国人中间型β地中海贫血家系的基因诊断被引量：5
- 2000年
- 目的 研究中间型 β地中海贫血的分子机制 ,为中间型 β地中海贫血的基因诊断提供科学依据。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)、Southern印迹杂交和双链DNA循环测序等技术 ,对在韩国首次发现的中间型 β地中海贫血家系的α和 β珠蛋白基因进行分析。 结果 基因分析表明 ,该家系属典型的中间型β地中海贫血 ,它的分子病因是 β珠蛋白基因的第 2内含子 5′端的第 1个碱基G→A(IVS Ⅱ 1G→A)突变和三联α珠蛋白基因 (αα/αααanti3 .7)的复合体。结论 β地中海贫血基因杂合子复合α珠蛋白基因组织增多是导致该家系中间型 β地中海贫血的一个重要分子病因。
- 陈美珏Jin Yeong Han孙琼In-Hoo Kim任兆瑞黄淑帧曾溢滔
- 关键词：Β地中海贫血珠蛋白基因诊断
