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张先舟: 作品数：60 被引量：207H指数：9; 供职机构：河北农业大学食品科技学院更多>>; 发文基金：河北省自然科学基金国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>; 相关领域：轻工技术与工程农业科学医药卫生化学工程更多>>

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基于G-四链体的PCR-RCA双重扩增技术检测沙门氏菌被引量：4: 2022年; 将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)与滚环扩增技术(rolling circle amplification,RCA)联用,并把G-四链体互补序列嵌入到RCA扩增所需的哑铃环状模板上,通过PCR和RCA的双重扩增及特异性结合G-四链体的硫黄素T荧光信号增强的作用,达到基于G-四链体的PCR-RCA技术检测沙门氏菌(Salmonella)的目的。在优化的检测体系下,确定了沙门氏菌基因组DNA浓度对数与486 nm波长处的荧光信号强度具有良好的线性关系,回归方程为y=2.101x+2.8723(R^(2)=0.9925),线性范围为17 fg/μL~1.7 ng/μL。根据实验的特异性分析,表明此方法适用于沙门氏菌属的检测,对人工污染沙门氏菌牛奶样品进行检测,检出限为4.28 CFU/mL。该方法具有特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,为实现食源性致病菌的快速检测提供新的方法。; 刘健慧张先舟张蕴哲李兰茹王红静高洁耿凤珍檀建新; 关键词：聚合酶链式反应沙门氏菌

食品中沙门氏菌FTA膜结合跨越式滚环等温扩增检测方法的建立被引量：5: 2021年; 为实现食品中沙门氏菌的简便和快速现场检测,本研究采用FTA膜(Flinders technology associates,FTA)结合跨越式滚环等温扩增(Saltatory rolling circle amplification,SRCA)方法(FTA-SRCA)建立一种新型的沙门氏菌检测方法。利用FTA膜快速提取模板DNA,根据沙门氏菌的inv A基因设计及筛选引物,建立FTA-SRCA反应体系。扩增反应在能够实现集约化检测的凹孔板中进行,反应结束后添加荧光染料观察结果。确定了该方法的特异性、灵敏度和人工污染样品的检出限,并对60个实际样品进行检测,评估其敏感性、特异性和符合率。结果表明:检测的17株沙门氏菌均为阳性结果,29株非沙门氏菌均为阴性结果,特异性良好。FTA-SRCA方法的灵敏度为6.81×100 CFU/m L,比PCR方法高100倍,比SRCA方法高10倍。对于人工污染的牛奶样品检测,FTA-SRCA方法的检出限为3.22×100CFU/m L,比PCR方法低1000倍,比SRCA方法低10倍。检测实际样品的敏感性、特异性和符合率分别为100.00%,94.64%,95.00%。本研究建立的FTA-SRCA方法具有操作简便快速、成本低廉、特异性强、灵敏度高、检出限低等优点,可用于食品中沙门氏菌的大批量集约化快速现场检测。; 庄梦晴张先舟卢鑫郭威马晓燕张伟; 关键词：沙门氏菌可视化

甜高粱汁发酵乙醇的培养基优化: 2010年; [目的]优化甜高粱汁发酵乙醇的培养基。[方法]以Co-158酵母菌为试验菌株,通过单因素试验和正交试验研究不同氮源和无机盐对酒精发酵的影响。[结果]适宜的发酵培养基为:硫酸铵6g/L,硫酸镁6g/L,氯化钙10g/L,磷酸二氢钾0.3g/L;在此条件下,酒精体积分数可达9.0%。[结论]为采用甜高粱汁为原料发酵法生产酒精提供参考。; 张先舟马玉青张伟; 关键词：甜高粱汁发酵酒精培养基

小米方便食品的开发研究: 张伟于志彬李慧静张先舟李宁马晓燕刘卫华李慧玲王羽王雪静亢春雨张会彦林扬焦华杰; 为了满足人们对营养和方便的需求，完成了以下两方面的研究：第一方面，方便小米粥的生产工艺。方便小米粥生产的基本工艺路线为："干热处理+蒸煮结合法"：原料米→干热处理→沸水煮→文火加热→热水浸泡→常压汽蒸→凉水离散→沥干→干...; 关键词：; 关键词：方便食品生产工艺

环介导等温扩增技术检测酸奶中嗜酸乳杆菌被引量：1: 2016年; 目的建立环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测酸奶中嗜酸乳杆菌。方法以嗜酸乳杆菌16S r RNA保守区的基因序列为靶序列设计引物,优化建立LAMP反应体系和程序,并研究引物的特异性,同时确定嗜酸乳杆菌的灵敏度和检出限。结果本方法可通过凝胶电泳和离心后焦磷酸镁白色沉淀检测反应结果,检测时间为5.5 h,灵敏度为62 CFU/m L,人工污染酸奶样品的检出限为120 CFU/m L,12株非嗜酸乳杆菌细菌非特异检测结果均为100%。结论该方法灵敏性好、特异性强、操作简单、耗时短,可适合于酸奶中的嗜酸乳杆菌的快速测定。; 张蕴哲张先舟李英军马晓燕张伟; 关键词：嗜酸乳杆菌酸乳

G-四联体与聚合酶链式反应联用可视化检测沙门氏菌被引量：2: 2021年; 建立对沙门氏菌的G-四联体与聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)联用可视化检测方法。以沙门氏菌属特异性基因invH为检测目标,设计5’端含有G-四联体互补序列的上下游引物,通过PCR的特异性识别并扩增目标序列,获得大量含G-四联体的双链DNA,变性后与氯高铁血红素结合生成具有过氧化物酶活性的模拟酶(DNAzyme),并催化H_(2)O_(2)与2,2’-联氮-双(3-乙基-苯并噻唑琳-6-磺酸)二胺盐由无色变为绿色,实现G-四联体与PCR联用对沙门氏菌的可视化检测。在优化的检测体系下,沙门氏菌基因组的质量浓度对数与421 nm处的吸光度具有良好的线性关系,其回归方程为y=0.1299x+0.2179,R^(2)=0.9945,线性范围0.07~771.6 ng/μL,灵敏度为0.07 ng/μL。特异性分析表明:此方法适用于沙门氏菌属的检测,可成功应用于人工污染沙门氏菌牛奶的检测,检出限为1.2×10^(2) CFU/mL。通过检测30种市售样品,发现其结果与国标检测方法结果一致。本研究为食源性致病菌的检测提供了新的策略。; 刘健慧耿凤珍张先舟高浩李聪高洁檀建新; 关键词：沙门氏菌

LAMP检测转基因大豆方法的建立被引量：3: 2010年; 针对转基因大豆的特异基因CP4-EPSPS(GenBank accession numberAY5966948)设计引物,用LAMP引物在线设计软件设计引物。对反应温度、反应时间、镁离子浓度、Bst DNA聚合酶浓度等扩增条件进行优化,建立了LAMP反应体系,检出限为0.01%。; 李琳张先舟何义张伟; 关键词：转基因大豆 LAMP 核酸

黄曲霉毒素B1核酸适配体筛选和检测方法的建立被引量：5: 2020年; 建立一种高灵敏的快速检测黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。基于氧化石墨烯(graphene oxide,GO)通过π-π共轭吸附单链寡核苷酸(single-strand DNA,ssDNA),对已结合靶标的ssDNA吸附能力较弱的特性,设计针对AFB1核酸适配体的筛选方案。经过10轮筛选,共获得45条ssDNA序列。挑选具有代表性的6条序列进行亲和力分析实验,其解离常数Kd分别为16.29、27.88、18.54、23.11、47.94、22.31 nmol/L。选用亲和力较高的AFB-5、AFB-8进行特异性实验,结果显示所筛选的适配体能特异性吸附AFB1。最后利用适配体AFB-8作为识别元件建立了基于纳米金比色检测AFB1的方法。在优化的检测条件下,AFB1质量浓度与A520 nm值有良好的线性关系,其回归方程为y=-0.00709x+0.46142(R^2=0.9979),线性范围为0.025~10 ng/mL,检出限为0.025 ng/mL。通过特异性实验和对大米样品加标回收实验,加标回收率为83.36%~105.74%,证明本方法的可行性。; 张敏张先舟李聪高浩刘健慧田益玲马雯李英军檀建新; 关键词：黄曲霉毒素B1 核酸适配体纳米金

环介导等温扩增技术检测沙门氏菌反应体系的优化被引量：10: 2010年; [目的]建立快速检测沙门氏菌的环介导等温扩增(LAMP)技术。[方法]以沙门氏菌的特异性基因(invA)序列为靶序列设计引物,并对该序列进行等温扩增;对Mg2+浓度、反应温度和反应时间扩增条件进行优化,并对沙门氏菌进行检测和鉴定。[结果]在Mg2+浓度为2.0mmol/L时,62℃反应40min,扩增可达最佳效果,LAMP法检测的灵敏度为7.8cfu/ml。[结论]建立了快速检测沙门氏菌的LAMP技术,该方法灵敏度高、耗时短、方法简便,便于在基层推广,为检测食源性致病菌构建了一个技术平台。; 张胜凯张先舟王羽马晓燕张会彦张伟; 关键词：环介导等温扩增沙门氏菌

跨越式滚环核酸等温扩增目的DNA的引物对、试剂盒及其扩增方法: 本发明公开了一种跨越式滚环核酸等温扩增目的DNA的引物对及含有该引物对的试剂盒，该引物对设计合理，特异性强，应用于跨越式滚环核酸等温扩增时，能实现引物自身不扩增而目的基因扩增的效果；本发明还提供了跨越式滚环核酸等温扩增目...; 张伟马晓燕檀建新张先舟杨倩袁耀武李英军王志岩张蕴哲; 文献传递

张先舟

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