李栋
- 作品数：10 被引量：42H指数：3
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- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金山东省医药卫生科研项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学机械工程更多>>
- 大鼠骨髓基质细胞传代培养中相关基因的差异表达被引量：2
- 2004年
- 目的 :研究大鼠骨髓基质细胞 (BMSCs)体外传代培养中相关基因的差异表达。方法 :取大鼠骨髓 ,分离、培养骨髓基质细胞并传代 ,抽取细胞 (mRNA)并逆转录成cDNA探针 ,用含有 1 1 76个基因片段的cDNA芯片检测相关基因的差异表达 ,整理、分析实验数据。结果 :传至P3代细胞与原代细胞 (P0 )相比有1 0 4个基因的差异表达超过了 3倍 ,其中有 5 3个基因表达量明显上升 ,5 1个基因表达量明显下降 ,主要涉及一些细胞粘附分子及胞外基质、细胞信号与传导、细胞受体和细胞骨架等方面的相关基因。结论 :通过基因芯片技术可以显示BMSCs在体外传代培养中众多基因的差异表达 ,而这些基因的差异表达与细胞的增殖和分化存在一定的关系 。
- 葛汝村白增亮李栋李季邓长江
- 关键词：骨髓基质细胞传代培养CDNA微阵列
- 小鼠胚肝基质细胞在体外培养中的动态演化被引量：1
- 2003年
- 胚肝基质细胞是研究胚肝造血调控的重要工具 ,本实验对小鼠胚肝基质细胞在体外培养过程中的生长、细胞类型组成及其组成比例的演变过程进行了观察 .实验显示小鼠原代培养初期基质细胞是由平滑肌样上皮细胞、巨噬细胞以及成纤维样细胞、树突状细胞、内皮细胞构成的 ,经过多次传代后 ,巨噬细胞等类型的细胞逐渐丢失 ,平滑肌样上皮细胞和成纤维样细胞成为主体 ,表明体外培养的小鼠胚肝基质细胞在 4代以内都能较真实的反映体内造血微环境的构成 ,适用于胚肝造血研究 .此为进一步研究胚肝基质细胞在胚胎期造血过程中的作用奠定了工作基础 .
- 李栋白增亮李慧张辉
- 关键词：上皮细胞成纤维细胞
- 猪抗病毒特异性免疫调节因子的制备及其相关性质的分析
- 2004年
- 通过获取抗人乙肝病毒特异性免疫调节因子并对其有关活性的研究,进一步探索在家畜疫苗接种过程中低分子量抗病毒免疫调节因子的特异性功能基础及免疫效应机制。用乙肝疫苗接种幼猪,致其产生特异性免疫应答,然后从其脾脏淋巴细胞中制备抗病毒免疫活性调节因子进行理化鉴定。MTT法活性检测和氨基酸组分及其含量的对比分析结果表明,制备的免疫调节因子为低分子量多肽与核酸复合物;具有特异性粘附抑制活性;在氨基酸组成上与非特异性免疫调节因子相同,但在所含氨基酸的百分含量上却有一定差异。检测结果提示,这种差异是决定其抗病毒特异性功能的化学基础。
- 张辉白增亮李慧时永香李栋李丽莉
- 关键词：猪免疫氨基酸分析
- OCT技术在发育生物学中的应用被引量：6
- 2005年
- 基于光学低相干反射测量而发展起来的光学相干层析技术(Optica1CoherenceTomography,OCT)是一种新型的成像技术,它可以对强散射介质如生物组织实施非侵入性的快速活体成像。与传统的组织切片相比,OTC可以大大减少对发育形态成像所需的时间、复杂程度及成本。非接触和非侵入式的成像方式有助于研究个体发育中由基因变异所引起的形态和功能变化,因而在发育生物学的研究当中有着广阔的应用前景。概述了OCT技术在发育生物学当中诸方面的应用情况。
- 李剑平李栋
- 关键词：OCT发育生物学非侵入性组织切片OTC
- 大鼠骨髓基质细胞分化为成骨细胞相关基因表达谱分析被引量：1
- 2005年
- 目的:利用cDNA微阵列技术研究大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化中基因表达谱的变化。方法:分离、培养大鼠骨髓基质细胞,以地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C诱导分化,抽提细胞mRNA并逆转录成cDNA探针,用含有1176个基因片段的cDNA芯片检测相关基因的差异表达。结果:经诱导后的细胞可见有钙化结节,与正常传代的细胞相比有292个基因的差异表达超过了3倍,而参与转录、翻译、糖基化修饰和调节细胞外基质、信号分子形成及参与代谢的相关基因表达均有不同程度的上调。结论:cDNA微阵列技术可显示细胞在诱导分化中多基因的差异表达,这些差异表达基因是大鼠骨髓基质细胞在增殖和成骨分化诱导中所必需参与的基因。
- 葛汝村白增亮李季李栋张辉
- 关键词：骨髓基质细胞诱导分化基因表达谱CDNA微阵列
- 低强度氦氖激光照射对小鼠胸腺细胞体外增殖的影响
- 2004年
- 目的 :研究低强度氦氖激光对体外培养的BALB/c小鼠胸腺细胞增殖的影响。方法 :采用MTT法检测不同功率密度、不同照射时间对不同起始培养密度小鼠胸腺细胞的增殖作用。结果 :低强度氦氖激光对小鼠胸腺细胞的增值有促进作用 ,当照射功率密度为 3.32 5mW /cm2 、照射时间 1～ 5分钟、起始细胞培养密度 2× 10 6个 /ml时效果最佳。结论 :低强度氦氖激光对小鼠胸腺细胞的增值有促进作用 ,促进小鼠胸腺细胞体外增殖的最佳条件为功率密度 3.32 5mW/cm2 、照射时间 1～ 5分钟、起始细胞培养密度 2× 10 6个 /ml,而照射时间超过 2
- 李剑平王建伟李栋
- 关键词：氦氖激光小鼠胸腺细胞体外增殖
- 特异性低分子量抗病毒免疫调节因子的制备及其组份测定被引量：2
- 2003年
- 目的:探讨5种特异性低分子量抗病毒免疫调节因子的组成差异,及其与抗病毒特异性的关系。方法:用甲肝疫苗、重组酵母乙肝疫苗、灭活流感疫苗、流行性出血热双价灭活疫苗、水痘减毒活疫苗分别接种幼猪,取脾脏制备特异性抗病毒低分子量免疫调节因子,并分析其游离氨基酸及酸水解后总氨基酸的组成。结果:5种特异性低分子量抗病毒免疫调节因子均由相同的17种氨基酸组成,其中GLU、GLY、LYS、SER、ALA含量较高,CYS、MET、ILE含量较低;且GLU、GLY、LYS在5类因子中的百分含量差别最大。结论:在该类因子中相同的17种氨基酸是构成每种因子的化学基础,而氨基酸组成的差异是决定抗病毒特异性的功能基础。
- 李慧白增亮李丽莉李栋宋静郑菁
- 关键词：氨基酸分析
- 小鼠胚胎成纤维细胞的分离、培养及饲养层制备
- 目的：探讨建立小鼠胚胎成纤维饲养层最佳分离培养和丝裂霉C处理的方法,以用于分离培养胚胎干细胞。
方法：取不同胎龄的胎鼠制备小鼠原代胚胎成纤维细胞,观察不同胎龄和培养、分离条件对细胞增殖的影响;用丝裂霉素C对增殖...
- 王国云李栋张辉孔亚玮白增亮
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞胚胎干细胞丝裂霉素C饲养层
- 文献传递
- 小鼠胚胎成纤维细胞饲养层制备条件的研究被引量：16
- 2005年
- 目的:建立小鼠胚胎成纤维细胞饲养层最佳分离培养及丝裂霉素C(MMC)处理的方法,用于培养胚胎干细胞。方法:取不同胎龄的胎鼠分离原代成纤维细胞,观察不同胎龄和培养、分离条件对细胞增殖的影响;观察不同浓度和不同作用时间下MMC对细胞增殖的抑制作用。用MTT法测定细胞增殖的数量。取妊娠3.5d的囊胚在经MMC处理的饲养层上培养,观察胚胎干细胞集落生成情况。结果:制备小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的最佳胎龄是12.5～14.5d;室温条件下,0.25%胰蛋白酶消化时间最好在3～5min之内;原代细胞培养2～4d后即可传代,MMC能抑制胚胎成纤维细胞的增殖,最佳的作用浓度和时间是20μg/ml,2～4h,成纤维细胞饲养层可以维持10d。囊胚在饲养层上能发育成典型的“鸟巢”状干细胞集落。结论:从12.5～14.5d胎龄小鼠胚胎分离培养的胚胎成纤维细胞质量最佳,经20μg/mlMMC处理2～4h后,可以作为饲养层用于胚胎干细胞的分离克隆。
- 王国云李栋张辉白增亮
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞胚胎干细胞丝裂霉素C饲养层
- 昆明鼠胚胎干细胞的分离培养与鉴定被引量：16
- 2004年
- 目的:从昆明系小鼠的早期胚胎分离和培养胚胎干细胞(ES细胞).方法:收集小鼠3.5 d胚龄的囊胚,将其培养在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,5-6d后取隆起生长的内细胞团块分离后再培养,观察集落的生长情况并通过碱性磷酸酶染色、原位杂交、细胞核型分析等对细胞集落进行鉴定.结果:ES细胞集落性生长,符合小鼠胚胎干细胞的一系列特性.结论:昆明系小鼠囊胚在胚胎成纤堆细胞饲养层上可以发育成ES细胞,并能进行传代培养.
- 王国云孔北华李栋张辉白增亮
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞胚胎干细胞
