李求春
- 作品数：15 被引量：66H指数：5
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省人兽共患病学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- 鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌基因组消减文库的构建被引量：5
- 2007年
- 为了解鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的基因组差别,筛选鸡白痢沙门氏菌特有的序列,利用SSH对鸡白痢沙门氏菌C79-13(实验方)与鸡伤寒沙门氏菌Sg9(驱动方)基因组进行了比较。选择四碱基内切酶Rsa I将C79-13与Sg9基因组DNA酶切,酶切的C79-13基因组DNA分成两份,分别与接头1和接头2R连接,然后进行两轮杂交和两轮PCR,得到消减混合物,将其与PCR 2.1克隆载体连接,转化感受态E.coli DH5α建立消减文库。结果共获得400个阳性克隆;筛选240个克隆制备质粒进行PCR检测,均扩增出100～2000 bp大小的片段。差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆鸡白痢沙门氏菌特异的未知新基因、建立分子鉴别新体系奠定了基础。
- 徐耀辉焦新安李求春潘志明黄金林
- 关键词：鸡白痢沙门氏菌鸡伤寒沙门氏菌抑制性消减杂交文库
- 大力提升生物工程专业实践能力的做法和思考被引量：6
- 2014年
- 生物工程是以生物学的理论和技术为基础,并结合化工、机械、电子计算机等学科的新兴综合性应用学科和工程技术领域。如何培养学生的实践能力是生物工程专业人才培养中的关键点,应该结合生物工程专业的实践教学,从专业基础实验、专业综合实验、"3+1"卓越人才培养模式和全程实践教学理念等方面进行人才培养的改革与探索。
- 黄金林潘志明陈祥李求春周福才
- 关键词：生物工程
- 鸡白痢沙门菌IpaJ蛋白的抑炎机制研究
- 鸡白痢沙门菌引起的鸡白痢病给多数发展中国家的养禽业造成了严重的经济损失。与鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌引起的急性炎症反应不同,鸡白痢沙门菌主要引起宿主的全身性感染。沙门菌T3SS分泌的效应蛋白在调节和应对宿主免疫应答过程中发...
- 李求春尹超徐黎娟刘子健李扬焦新安
- 关键词：鸡白痢沙门菌NF-ΚB
- CRISPR结构及作用机理研究进展被引量：4
- 2014年
- 成簇的规律间隔的短回文重复序列(clustered regularly interspacedshort palindromic repeat,CRISPR)为原核生物构建了一种抵御外源DNA侵扰的防御机制,近年来成为国内外细菌研究者们的研究热点。在介绍CRISPR系统的研究历史、分布分类、结构特征的基础上,对其作用机制以及应用前景方面进行了综述。
- 谢晓蕾李求春
- 关键词：CRISPR原核生物防御机制
- 沙门菌CRISPR的结构与功能研究进展被引量：5
- 2015年
- 近年发现沙门菌中恒定地存在两个CRISPR位点,沙门菌利用它们不仅能抵御外源质粒和噬菌体的入侵,还能介导自身短期的表型变化及长期亚类的进化。同时由于其结构的多样性,使之广泛应用于沙门菌分型和进化的研究。论文简要综述了沙门菌CRISPR系统的基本结构、作用机制和功能及其在沙门菌分型和进化应用方面的研究进展。
- 蔡银强李求春陶静蒋道军潘志明焦新安
- 关键词：沙门菌
- 鸡白痢沙门菌基因组差异片段的筛选与分析被引量：4
- 2007年
- 采用抑制性消减杂交技术(SSH)对鸡白痢沙门菌C79-13株与鸡伤寒沙门菌Sg9株进行了基因组差异片段分析。结果,从C79-13株中共检出13个特异性差异片段。经同源分析,这些序列可分为3类:噬菌体相关序列、质粒相关序列和已知功能序列。这些差异片段包含一些重要的沙门菌毒力相关基因,如编码大肠杆菌素I、paJ蛋白、尾突蛋白、切除酶的基因。结果表明,鸡白痢沙门菌C79-13株与鸡伤寒沙门菌Sg9株基因组间存在较多差异基因,这些差异片段为确定鸡白痢沙门菌特异性遗传标志,建立分子鉴别新体系提供了基础。
- 徐耀辉焦新安李求春潘志明黄金林
- 关键词：鸡白痢沙门菌抑制性消减杂交
- 鸡白痢和肠炎沙门氏菌抑制差减文库的构建与分析被引量：9
- 2007年
- 应用抑制差减杂交技术(SSH)对鸡白痢沙门氏菌C79-13与肠炎沙门氏菌50041进行基因组片段的差异分析,构建鸡白痢沙门氏菌的差减文库。经Dot-blot筛选,并对部分片段进行测序和同源性分析。结果表明:这些序列主要分为3类,即型分泌系统相关序列、质粒转移相关序列、未知功能序列。其中2个差减片段与编码福氏志贺菌侵入质粒抗原IpaJ蛋白基因的同源性达50%。证明所构建的差减文库可为鸡白痢沙门氏菌特异性致病基因和其致病机理的研究提供重要的依据。
- 李求春焦新安徐耀辉潘志明黄金林
- 关键词：鸡白痢沙门氏菌肠炎沙门氏菌抑制差减杂交
- 优化整合生物工程专业课程实验 建立综合大实验课程体系被引量：4
- 2014年
- 以强化培养生物工程专业学生的工程能力和创新能力为目标,以国家生物医药产业政策为背景,研究提出优化整合我校生物工程专业课程实验体系,建立综合大实验课程以适应当前社会发展的生物工程专业卓越工程师培养,形成科学的生物工程专业课程实验体系,并加以实施,培养出具有扎实工学科学基础和生物工程专业技术能力基础,较强生物工程开发、设计与实践能力,知识更新与自我完善能力、良好沟通与组织管理能力和国际视野的生物工程专业优秀人才。
- 黄金林潘志明李求春陈祥周福才殷月兰
- 关键词：生物工程课程实验
- 鸡白痢沙门菌等位基因特异性PCR检测方法的建立被引量：21
- 2007年
- 根据鸡白痢沙门菌与鸡伤寒沙门菌的rfbS基因在第237和第598位碱基的不同,设计和合成了等位基因特异性PCR引物,建立了快速检测鸡白痢沙门菌的PCR方法,并应用该方法对鸡白痢沙门菌临床分离样品进行了PCR鉴定。结果显示,该PCR方法能够特异性地鉴定鸡白痢沙门菌,检测灵敏度达100 pgDNA。对35个经常规方法鉴定的鸡白痢沙门菌分离株应用等位基因特异性PCR方法进行鉴定,鉴定出33株鸡白痢沙门菌,符合率为94.3%。表明,建立的等位基因特异性PCR方法能够准确而快速地鉴定鸡白痢沙门菌。
- 耿士忠潘志明蒋春红张辉李求春焦新安
- 关键词：鸡白痢沙门菌
- 抑制性消减杂交法筛选鸡白痢沙门氏菌基因组差异片段
- 采用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)对鸡白痢沙门氏菌 C79-13株与鸡伤寒沙门氏菌 Sg9株进行基因组差异片段分析．从 C79-13株中共检出13...
- 徐耀辉焦新安李求春潘志明黄金林
- 文献传递
