李珊珊
- 作品数:54 被引量:48H指数:5
- 供职机构:河南省科学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 黑曲霉β-甘露聚糖酶ManA耐热突变体的筛选被引量:3
- 2022年
- 为了改造黑曲霉(Aspergillus niger)来源的β-甘露聚糖酶ManA,获得耐热性高的突变体。利用易错聚合酶链式反应(PCR)技术对构建的表达质粒pGAPZαA-manA进行随机突变,将突变文库转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,表达筛选耐热性高的突变体,并进一步对突变位点进行定点突变,筛选其他耐热性高的突变体。结果表明,ManA的H283R与H283K突变体相对于野生型在耐热性方面有显著提升,75℃加热30 min其相对酶活由26.66%分别提升至76.95%和83.57%;在pH 3.0~9.0的条件下,50℃保存24 h,H283K突变体与野生型的相对酶活均在90%以上,H283R突变体在pH 3.0时的相对酶活下降到了84.72%,两个突变体的最适温度、pH及比酶活与野生型没有明显差异。说明β-甘露聚糖酶ManA的283位组氨酸(H283)对其耐热性较为关键,将该位点突变为精氨酸(R)和赖氨酸(K)时,ManA的耐热性得到显著提升。
- 李珊珊刘德海刁文涛陈晓飞权淑静
- 关键词:甘露聚糖酶易错PCR定点突变
- 霍乱弧菌O139胶体金免疫层析快速检测法的建立被引量:5
- 2012年
- 目的建立一种快速、简易的检测霍乱弧菌O139群的胶体金免疫层析法(GICA)。方法利用胶体金免疫层析技术,采用双抗体夹心法检测霍乱弧菌O139群,对该法进行敏感性、特异性和稳定性分析。与细菌培养法对比检测184份临床标本。结果该法能在10min内完成检测;该试纸条仅与霍乱弧菌O139群阳性样品发生特异性反应;检测霍乱弧菌O139群的最低检出浓度为1×105cfu/mL;与细菌培养法对比检测184份临床标本,特异性和灵敏度均达100%。结论新建立的霍乱弧菌O139群胶体金免疫层析试验简便、快速,特异性和灵敏度较好,适用于现场样品的快速筛查。
- 王玉金杨书豪刘丽庞向宇孙晨阳李珊珊
- 关键词:胶体金免疫层析试验快速筛查
- 沙丁胺醇单克隆抗体的研制及初步应用
- 2017年
- 用沙丁胺醇和牛血清白蛋白的人工偶联物SAL-BSA免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术建立3株分泌抗沙丁胺醇抗体的杂交瘤细胞株,并对抗体进行鉴定.结果表明,3株单克隆抗体对沙丁胺醇的半抑制率分别为1.41、5.53、9.62 ng/m L;单克隆抗体2F7与盐酸克伦特罗、马布特罗、特布他林的交叉率分别为217%、128%、70.5%,与莱克多巴胺、西马特罗、肾上腺素和去甲肾上腺素无交叉反应;3株单克隆抗体均为小鼠Ig G1亚类.用单克隆抗体2F7建立的胶体金免疫层析检测试纸条,对沙丁胺醇标准品的最低检出值达到3 ng/m L.制备的抗沙丁胺醇单克隆抗体有可能应用于沙丁胺醇残留快速检测试剂的研制.
- 杨书豪王玉金李珊珊刘丽杜迅
- 关键词:沙丁胺醇单克隆抗体胶体金免疫层析
- 一株产乳酸的格氏乳球菌WBT0008及其应用
- 本发明涉及产乳酸的格氏乳球菌WBT0008及其应用,可有效解决高产乳酸及制备保鲜剂,抑制有害菌的问题,一株产乳酸的格氏乳球菌WBT0008,分类命名为格式乳球菌(<I>Lactococcus </I><I>garviea...
- 王佰涛刘德海杨文玲雷高权淑静李珊珊刁文涛王继雯陈国参李寒冰
- 一种固态发酵制备饲用β-甘露聚糖酶的方法
- 本发明涉及固态发酵制备饲用β‑甘露聚糖酶的方法,有效解决饲用β‑甘露聚糖酶的生产,满足对β‑甘露聚糖酶的实际需要问题,制备马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基,无菌操作将黑曲霉HKS016菌株接种于PDA斜面培养基上,恒温培养,直...
- 刘德海王佰涛陈晓飞刁文涛李珊珊雷高杨文玲权淑静李亮亮胡虹胡宜亮陈国参
- 文献传递
- 一种利用腐植酸和苏丹草联合修复铅铬复合污染土壤的方法
- 本发明涉及利用腐植酸和苏丹草联合修复铅铬复合污染土壤的方法,有效解决腐植酸降低重金属铅铬的生物有效性,缓解重金属铅铬对苏丹草的毒害,为中、重度污染区域苏丹草生长创造条件,提高苏丹草对铅铬复合污染土壤的修复效率问题,将腐植...
- 杨文玲杜志敏雷高王佰涛李珊珊李磊李亮亮刘德海刁文涛甄静陈晓飞王继雯胡宜亮陈国参
- 抗沙门氏菌O4抗原单克隆抗体的研制及鉴定
- 2018年
- 制备抗沙门氏菌O4抗原单克隆抗体并鉴定其特性.用加热灭活的乙型副伤寒沙门氏菌免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合方法建立分泌抗体的杂交瘤细胞株.用包被沙门氏菌全菌和纯化的乙型副伤寒沙门氏菌LPS的间接ELISA法筛选杂交瘤细胞和鉴定抗体.其中3株杂交瘤细胞分泌的抗体初步判断为针对O4抗原的抗体,分别命名为1E12、2D5和4C2,这3株抗体与肠道正常细菌及常见的致病性细菌无交叉反应;单克隆抗体的免疫球蛋白类型分别为IgG1κ和IgMκ.获得的单克隆抗体具有较高的特异性,有可能用于B群沙门氏菌免疫学检测方法的建立.
- 杨书豪李珊珊王玉金刘丽杜迅周伏忠胡宜亮
- 关键词:沙门氏菌单克隆抗体脂多糖
- 抗沙门氏菌O8因子单克隆抗体的研制及初步应用被引量:2
- 2018年
- 制备抗沙门氏菌O8因子单克隆抗体,建立C2、C3亚群沙门氏菌酶联免疫吸附分析检测方法.用加热灭活的纽波特沙门氏菌免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合建立分泌抗体的杂交瘤细胞株.用ELISA法检测及鉴定单克隆抗体,酶联免疫吸附分析法初步判断抗体应用于检测试剂的可能性.得到4株与沙门氏菌C2、C3亚群菌株发生反应的单克隆抗体细胞株,分别命名为6F2、7A2、8D8和8D9;4株抗体与肠道正常细菌和常见的致病细菌无交叉反应;单克隆抗体免疫球蛋白类型分别为小鼠IgG_1、IgG_3、IgG_(2b)、IgM,轻链均为kappa;用单克隆抗体7A2和8D8研制的酶联免疫吸附分析试剂盒,对沙门氏菌C2亚群的纽波特沙门氏菌、波那雷恩沙门氏菌和C3亚群的肯塔基沙门氏菌的最低检出值均可达到10~5cfu/m L.获得的单克隆抗体具有较高的特异性,有可能应用于生产检测C2和C3亚群沙门氏菌的酶联免疫吸附分析试剂盒.
- 李珊珊张志龙刘丽王玉金杜迅胡宜亮周伏忠杨书豪
- 关键词:沙门氏菌单克隆抗体酶联免疫吸附分析
- 一种致病性沙门氏菌测试条的制备方法
- 本发明涉及致病性沙门氏菌测试条的制备方法,可有效解决现有检测方法费时、繁琐的问题,技术方案是,包括基材PVC、玻璃纤维和硝酸纤维膜,基材PVC板上固定有第一覆膜、引水玻璃纤维、载体玻璃纤维、硝酸纤维膜和吸水棉浆板,硝酸纤...
- 杨书豪王玉金李珊珊刘丽杜迅刁文涛胡宜亮宁萌向凌云王雪研冯菲
- 文献传递
- 一种通过共表达血红蛋白来提高毕赤酵母工程菌中α-半乳糖苷酶甲醇诱导表达量的方法
- 本发明涉及通过共表达血红蛋白来提高毕赤酵母工程菌中<I>α</I>‑半乳糖苷酶甲醇诱导表达量的方法,可有效解决提高毕赤酵母工程菌中<I>α</I>‑半乳糖苷酶甲醇诱导表达量及其应用的问题,方法是,构建表达质粒pPIC9K...
- 刁文涛李珊珊陈国参王雪妍周伏忠陈晓飞马焕杨文玲杜志敏权淑静刘德海王继雯张英涛解复红
- 文献传递