杨志文
- 作品数：24 被引量：17H指数：2
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- 胱天蛋白酶募集域蛋白9在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用
- 2022年
- 目的探讨巨噬细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(card9)在胰腺腺泡细胞导管组织转化中的作用。方法构建3条靶向card9的小分子干扰RNA(siRNA-card9),荧光显微镜下观察转染巨噬细胞的荧光强度,采用实时定量PCR法检测巨噬细胞card9 mRNA表达量,筛选巨噬细胞的最佳转染效率。将5×10^(5)巨噬细胞和100μg/mlβ葡聚糖体外常规培养12、24 h后,分成阳性细胞组(巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9^(-/-)巨噬细胞)、β葡聚糖刺激阴性细胞组,采用蛋白质免疫印迹法检测各组巨噬细胞card9蛋白表达水平。取1×10^(5)巨噬细胞、1×10^(5)胰腺腺泡细胞加入Transwell小室上下层共培养120 h后,分为阳性细胞组(巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500μg/mlβ葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组(card9^(-/-)巨噬细胞+腺泡细胞)、100和500μg/mlβ葡聚糖刺激阴性细胞组,取下室的胰腺腺泡细胞,采用免疫荧光化学染色法检测腺泡细胞导管组织转化标志物CK19蛋白表达。结果siRNA-card9转染巨噬细胞24 h荧光强度最强,浓度为200 nmol/L时抑制效率最高。阳性细胞组、β葡聚糖刺激阳性细胞组、阴性细胞组、β葡聚糖刺激阴性细胞组培养24 h后,巨噬细胞card9蛋白表达量分别为0.81±0.05、1.46±0.05、0.42±0.06、0.46±0.06,β葡聚糖刺激阳性细胞组较阳性细胞组显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。100和500μg/mlβ葡聚糖刺激阳性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光较阳性细胞组明显增强,且呈β葡聚糖剂量依赖性;而阴性细胞组、100和500μg/mlβ葡聚糖刺激阴性细胞组腺泡细胞内CK19绿色荧光强度均较阳性细胞组显著降低。结论巨噬细胞card9表达水平升高可诱导腺泡细胞导管组织转化,提示可能存在card9介导的胰腺癌发病机制。
- 李清华杨志文
- 关键词：胰腺腺泡细胞
- CARD9在SAP大鼠腹腔巨噬细胞中的作用机制研究
- 田军徐萍杨志文何阳寰
- 一种检测人Card9基因多态性的试剂盒、检测方法及应用
- 本发明适用于基因多态性检测试剂盒技术领域，提供了一种检测人Card9基因多态性的试剂盒、检测方法及应用，通过采用TaqMan探针法试剂盒检测胰腺炎患者Card9基因rs10870077、rs4077515、rs10781...
- 杨志文徐萍王学敏王静盛阮妹
- Card9蛋白在疾病中的作用机制被引量：1
- 2014年
- 胱天蛋白酶寡集域蛋白（caspase recruitment domain containing protein 9,CARD9）是一个重要的衔接蛋白,位于细胞质内,存在于多种组织中,能选择性地结合到蛋白BCL10,并作为免疫受体酪氨酸激酶活化模体（ITAM）、TLR、NOD2通路的媒介物,
- 王海徐萍杨志文
- 关键词：胱天蛋白酶疾病BCL10免疫受体NOD2细胞质
- 胱天蛋白酶募集域蛋白9的新用途
- 本发明涉及胱天蛋白酶募集域蛋白9的新用途。本发明一方面公开了胱天蛋白酶募集域蛋白9作为生物标志物在制备诊断急性胰腺炎严重程度的试剂盒中的用途。另一方面，本发明还公开了一种诊断急性胰腺炎严重程度的试剂盒。本发明以胱天蛋白酶...
- 徐萍杨志文王静翁成钊孟潇潇
- 胱天蛋白酶募集域蛋白9基因多态性与急性胰腺炎及生长抑素临床疗效的关系
- 2022年
- 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,Card9)基因多态性与急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)及生长抑素临床疗效的关系。方法选取2019年6月至2020年5月上海市松江区中心医院就诊的86例AP患者为研究对象,同期选择健康志愿者81名为对照组,进行前瞻性队列研究。查阅国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)核苷酸数据库,筛选Card9的10个常见单核苷酸多态性位点。SNapShot微测序法检测Card9单核苷酸多态性位点。AP患者均给予生长抑素治疗,观察Card9单核苷酸多态性与AP患者临床症状、辅助检查指标的关系。正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验;非正态分布计量资料以M(Q1,Q3)表示,组间比较应用秩和检验。计数资料组间比较采用χ^(2)检验。结果AP组患者Card9 rs10870077 C>G单核苷酸多态性位点频率较健康对照组显著增加,差异有统计学意义(OR=1.934,95%CI=1.011~3.700,P=0.046)。与CC基因型相比,Card9 rs10870077 C>G中重症AP患者生长抑素治疗组腹痛腹胀消失时间明显延长[(5.64±2.06)d与(3.76±1.23)d,t=2.98,P=0.006],Card9 rs10870077 C>G重症AP患者生长抑素治疗组住院时间增加[(13.25±5.31)d与(9.00±3.68)d,t=1.51,P=0.170]。结论Card9 rs10870077 C>G是AP的易感因素,与重症AP生长抑素临床疗效的个体差异存在一定相关性。
- 任大宾杨志文
- 关键词：急性胰腺炎基因多态性生长抑素
- 胱天蛋白酶募集域蛋白9基因多态性与脓毒症肝损伤易感性的相关性研究
- 2022年
- 目的探讨胱天蛋白酶募集域蛋白9(caspase recruitment domain protein 9,CARD9)基因多态性与脓毒症相关肝损伤风险的相关性。方法采用病例对照研究方法,招募重症监护室122例脓毒症患者,将其中伴有肝损伤者设为肝损害组(66例),不伴肝损伤者设为对照组(60例)。采用TaqMan法检测患者外周血CARD9基因的6个单核苷酸多态性位点,观察两组患者基线资料,比较两组基因型分布、等位基因频率的差异,计算其优势比(odds ratio,OR)。正态分布检验采用Kolmogorov-Smirnov检验,不符合正态分布的计量资料以M(Q_(1),Q_(3))表示,两组间比较采用Mann-WhitneyU检验。计数资料组间比较采用χ^(2)检验和Fisher精确概率法。采用χ^(2)检验判断基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡检验。结果与对照组相比,肝损害组患者CARD9基因rs10781500位点的CC基因型分布明显增加(19与36,χ^(2)=6.87,P=0.033),携带C等位基因的脓毒症患者诱发肝损伤的概率更大(OR=1.375,95%CI 1.024~1.846,P=0.023),CC基因型患者诱发肝损伤的风险更高(OR=2.696,95%CI 1.238~5.869,P=0.012)。肝损害组CC基因型者丙氨酸氨基转移酶、序贯性器官功能衰竭评分明显升高[310(213,648)U/L与187(114,304)U/L,Z=3.32,P=0.001和9(6,14)分与7(5,9)分,Z=2.49,P=0.013]。结论CARD9基因rs10781500位点多态性与脓毒症相关肝损伤有关,其C等位基因可能为易感基因。
- 盛阮妹杨志文翟宇宵王学敏
- 关键词：脓毒症肝损伤基因多态性
- 小热休克蛋白在70例结直肠癌患者中的表达及其临床意义
- 2017年
- 结直肠癌严重危害人类健康，全世界每年出现100万左右的新发病例，大约50万患者因此病死亡。结直肠癌发病率已位居我国恶性肿瘤的第3位，伴随饮食结构的改变及生活水平的提高，其发病率逐年升高。迄今为止，外科手术仍然是治疗结直肠癌的主要方法，其疗效取决于肿瘤的早期发现、早期诊断和早期治疗。
- 李清华杨志文王艳兰赖跃兴徐萍
- 关键词：直肠癌患者热休克蛋白结直肠癌恶性肿瘤癌发病率
- 一种检测人Card9基因多态性的试剂盒、检测方法及应用
- 本发明适用于基因多态性检测试剂盒技术领域，提供了一种检测人Card9基因多态性的试剂盒、检测方法及应用，通过采用TaqMan探针法试剂盒检测胰腺炎患者Card9基因rs10870077、rs4077515、rs10781...
- 杨志文徐萍王学敏王静盛阮妹
- 文献传递
- 端粒酶逆转录酶在急性坏死性胰腺炎大鼠中性粒细胞凋亡中的作用
- 2022年
- 目的探讨端粒酶逆转录酶(TERE)对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠中性粒细胞凋亡的影响。方法24只SD大鼠按数字表法随机分为正常对照组、ANP 3 h组、ANP 6 h组、TERT抑制剂BIBR1532干预组(BIBR1532组),每组6只。采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠构建ANP模型,分别在造模后3、6 h收集和分离大鼠外周血中性粒细胞BIBR1532组在造模前腹腔注射2 mg/kg BIBR1532,在造模后3 h处死大鼠,收集外周血中性粒细胞。应用荧光定量PCR法检测中性粒细胞TERT mRNA表达量;蛋白质免疫印迹法检测中性粒细胞TERT蛋白及凋亡相关蛋白Bcl-xL、Bax表达量;流式细胞术检测中性粒细胞的凋亡;ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-6水平。取大鼠胰腺组织行病理学检查。结果正常对照组、ANP 3 h组、ANP 6 h组、BIBR1532组大鼠外周血中性粒细胞TERT mRNA表达量分别为1.03±0.26、3.31±1.07、5.21±0.78、1.95±0.49;TERT蛋白表达量分别为0.09±0.03、0.43±0.12、0.58±0.11、0.22±0.07;Bcl-xL蛋白表达量分别为0.19±0.05、0.50±0.07、0.85±0.04、0.40±0.11;Bax蛋白表达量分别为0.29±0.08、0.23±0.03、0.17±0.02、0.43±0.12;细胞凋亡率分别为(10.03±0.74)%、(7.99±0.27)%、(6.65±0.36)%、(22.98±2.86)%。ANP 3、6 h组TERT mRNA和蛋白表达量、Bcl-xL蛋白表达量高于对照组,Bax蛋白表达量、细胞凋亡率低于对照组,而BIBR1532组TERT mRNA和蛋白表达量、Bcl-xL蛋白表达量低于ANP 3 h组,Bax蛋白表达量、细胞凋亡率高于ANP 3 h组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。正常对照组、ANP 3 h组、BIBR1532组血清TNF-α水平分别为(96.67±27.12)、(382.30±46.33)、(206.88±36.42)ng/L,IL-6水平分别为(43.34±14.50)、(134.21±16.13)、(88.06±13.05)ng/L,ANP 3 h组均高于正常对照组,而BIBR1532组均低于ANP 3 h组,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。BEBR1532组大鼠胰腺组织病理改变较ANP组明显改善。结论ANP大鼠外周血中性粒细胞TERT表达量显著升高
- 任大宾杨志文
- 关键词：端粒酶逆转录酶中性粒细胞细胞凋亡
