杨迪
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
- 供职机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：国家微生物菌种资源平台项目更多>>
- 相关领域：化学工程生物学轻工技术与工程理学更多>>
- 黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶基因的克隆及其在酵母中的表达被引量：2
- 2009年
- 以A.niger TCCC41013总RNA为模板,通过RT-PCR扩增含自身信号肽的脯氨酸蛋白内肽酶基因pep,将其克隆到pUCm-T载体上进行测序。测序结果表明基因全长1581bp,共编码526个氨基酸,包括22个氨基酸的信号肽序列和504个氨基酸的成熟肽序列。通过生物信息学方法对蛋白质的理化性质进行分析预测,脯氨酸蛋白内肽酶等电点为4.43,具有丝氨酸活性中心,属丝氨酸羧肽酶S28家族。以重组质粒pUCm-T-pep为模板,通过PCR扩增去除自身信号肽的pep,构建毕赤酵母表达栽体pPIC9-pep,电转酵母宿主菌GS115。SDS-PAGE分析显示表达产物的分子量为60000Da左右,酶特异性底物法测定酶活力最高可达2275.4 mU/mL。
- 向先长杨迪路福平高艳玲李玉
- 关键词：黑曲霉毕赤酵母
- 一种黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶及其制备方法
- 本发明涉及基因工程和酶学领域的一种黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶及其制备方法，其序列编码具有SEQ ID No.2的黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶的氨基酸序列，该氨基酸序列具有SEQ ID No.1中第1-1581位所示的核苷酸序列。该...
- 路福平杨迪王海宽李玉黎明王春霞周丽娜王斌哲向先长
- 文献传递
- 黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶基因的克隆与序列分析被引量：1
- 2008年
- 以黑曲霉(A.niger)TCCC41013的总RNA作为模板,通过RT-PCR扩增出含自身信号肽的脯氨酸蛋白内肽酶基因,将其插入pUCm-T载体上,经PCR和酶切鉴定后进行测序并分析。所克隆的PEP基因全长为1 581bp,编码526个氨基酸残基,成熟肽为504个氨基酸残基。与GeneBank中已报道的A.niger CBS513.88的PEP序列同源性最高,达到99.75%。脯氨酸蛋白内肽酶是一种新型的丝氨酸蛋白酶,黑曲霉PEP与已克隆的其他菌种的PEP同源性不高。
- 杨迪高艳玲路福平周丽娜
- 关键词：黑曲霉克隆
- 一种黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶及其制备方法
- 本发明涉及基因工程和酶学领域的一种黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶及其制备方法，其序列编码具有SEQ ID No.2的黑曲霉脯氨酸蛋白内肽酶的氨基酸序列，该氨基酸序列具有SEQ ID No.1中第1－1581位所示的核苷酸序列。该...
- 路福平杨迪王海宽李玉黎明王春霞周丽娜王斌哲向先长
- 文献传递
- 脯氨酰内肽酶水解啤酒蛋白的研究被引量：1
- 2008年
- 将脯氨酰内肽酶(PEP)添加在啤酒后酵液中,通过冷混浊实验分析脯氨酰内肽酶对啤酒非生物稳定性的影响。结果表明,添加5mg/L的脯氨酰内肽酶就能有效地提高啤酒的非生物稳定性;采用75%硫酸铵沉淀啤酒蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析,结果显示,啤酒蛋白电泳图谱的分布主要表现为8～14.4 ku的窄带和35～45 ku的宽带,而经脯氨酰内肽酶处理的啤酒蛋白电泳图谱中8～14.4 ku的条带消失,说明此蛋白被脯氨酰内肽酶水解。
- 周丽娜张鹭路福平杨迪向先长
- 关键词：脯氨酰内肽酶冷混浊SDS-PAGE电泳
- LYCD中多糖的提纯、含量测定、组分分析和结构鉴定被引量：7
- 2008年
- 以活酵母细胞衍生物(LYCD)中多糖为研究对象,经sevege法脱杂蛋白、乙醇沉淀得粗多糖,由苯酚-硫酸法测定LYCD中多糖含量;该粗多糖再经SephadexG-75柱层析分离纯化得到精制;薄层层析鉴定该多糖的单糖组分;采用红外光谱对此多糖进行了初步的结构鉴定。结果表明:用sevege法脱杂蛋白3次,可得到LYCD粗多糖,其多糖含量为8.21 mg/L。该多糖中只含有一种多糖,水解得到的单糖为葡萄糖,红外图谱结果表明LYCD多糖具有多糖的一般结构。
- 高艳玲杨迪张楠路福平杜连祥段少军
- 关键词：多糖
- 紫外分光光度法测定LYCD中维生素B_1含量的研究被引量：3
- 2008年
- 利用紫外分光光度法测定了LYCD中维生素B1含量，其最佳测试条件为：显色剂用量1．00mL，显色时间15min，碱性介质用量1．00mL，测定波长433nm。其线性回归方程为y=0．0479x＋2．5331，相关系数R^2=0．9989，线性范围2．0～10．0μg·mL^-1，平均回收率为100．7％，RSD为1。18％（n=5）。该方法简单、易操作、重现性好。
- 高艳玲杨迪路福平杜连祥
- 关键词：维生素B紫外分光光度法
