林海泓
- 作品数：17 被引量：20H指数：3
- 供职机构：复旦大学附属金山医院心内科更多>>
- 发文基金：上海市现代生物与新药产业发展基金上海市科委科研计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人骨髓间充质干细胞增殖、分泌、凋亡、迁移和黏附影响因素及机制
- 骨髓干细胞是一类具有高度自我更新和多向分化潜能的细胞,利用其可分化为多种细胞的能力,可作为受损心肌组织修复的供体细胞。骨髓间充质干细胞(mesenchymal stemcells,MSCs)是骨髓中除造血干细胞以外的另一...
- 林海泓
- 关键词：骨髓间充质干细胞信号传导通路细胞增殖诱导分化
- 抗血小板药物对人骨髓间充质干细胞增殖及分泌功能的影响
- 2008年
- 背景:有研究指出氯吡格雷、噻氯匹定可引起粒细胞减少,阿司匹林可抑制内皮祖细胞增殖。目前缺乏这些抗血小板药物会对移植入心肌的骨髓间充质干细胞产生何种作用的报道。目的:探讨氯吡格雷、噻氯匹定和阿司匹林对人骨髓间充质干细胞增殖及分泌功能的影响。设计、时间和地点:细胞学体外观察,于2006-03/12在上海市疾病预防控制中心毒理学实验室完成。材料:第2代人骨髓间充质干细胞由上海第九人民医院组织工程研究中心提供。氯吡格雷、噻氯匹定为杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司产品,批号分别为国药准字J20040006和国药准字H19980186。阿司匹林由拜耳医药有限公司生产,批号为国药准字20050059。方法:骨髓间充质干细胞解冻后,加入含100U/mL青霉素、100mg/L链霉素、10%胎牛血清的低糖DMEM体外扩增培养,传至第6代,分别用不同浓度的氯吡格雷、噻氯匹定、阿司匹林进行干预处理,并设立空白对照。主要观察指标:MTT比色法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达,ELISA法测定细胞培养液中血管内皮生长因子浓度。结果:反映骨髓间充质干细胞增殖变化的A570值在0.02,0.1,0.4,2,10,40μmol/L氯吡格雷或噻氯匹定作用后均明显高于空白对照(P<0.01);经60,600,2000μmol/L阿司匹林处理后则低于空白对照(P<0.05)。细胞表面抗原CD34、CD105、CD106阳性细胞百分率经3种抗血小板药物作用后与空白对照基本相似。与空白对照比较,经0.02μmol/L氯吡格雷及5,2000μmol/L阿司匹林处理后血管内皮生长因子含量无明显变化(P>0.05);40μmol/L氯吡格雷或噻氯匹定作用后血管内皮生长因子含量均显著降低;0.02μmol/L噻氯匹定作用后血管内皮生长因子含量显著升高(P<0.01)。结论:氯吡格雷和噻氯匹定对人骨髓间充质干细胞具有明显的促增殖作用,阿司匹林可抑制其增殖。高浓度氯吡格
- 林海泓施海明肖萍朱军罗心平
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化增殖分泌
- 促红细胞生成素基因修饰对H_2O_2诱导的小鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的观察EPO基因修饰对H2O2诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及相关细胞信号传导通路的影响。方法体外培养小鼠MSCs,制作慢病毒载体并转染EPO基因至第6代MSCs,进行细胞鉴定,ELISA法测定细胞上清液中EPO浓度,Western blot方法检测基因修饰前后PI3K/Akt及NF-κB通路蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡情况。结果成功地制作慢病毒载体,并将EPO基因转染至小鼠MSCs,转染前后细胞表面标志未发生明显变化,转染后细胞上清液中EPO浓度显著升高(P<0.01)。基因修饰可使小鼠MSCs的PI3K/Akt磷酸化水平及总的NF-κB水平升高,但对MSCs的NF-κB磷酸化水平和总的Akt水平无明显影响。转染组凋亡细胞所占百分率低于对照组(P<0.01)。结论 EPO基因修饰后提高了MSCs的分泌EPO能力,并且具有抑制H2O2诱导的MSCs凋亡的作用。其抗凋亡作用可能与PI3K/Akt及NF-κB信号通路有关。
- 林海泓罗心平施海明龚辉史益军
- 关键词：促红细胞生成素转染间充质干细胞凋亡信号途径
- 青年胸闷、气急伴晕厥
- 2009年
- 患者男，20岁。因胸闷，气急、乏力伴晕厥1次于2008年8月25日入院。患者8月24日晚8时左右，突发胸闷、气急，伴四肢乏力，期间出现黑喙，随即意识丧失，无四肢抽搐，无大小便失禁及口吐白沫，无外伤，持续约10S后自行苏醒，无胸骨后疼痛及烧灼感，但胸闷症状无明显缓解。至外院行心电图示：窦性心动过速，部分T波改变，
- 赵碧莲林海泓李剑严萍萍罗心平范维琥
- 关键词：胸闷症状气急晕厥窦性心动过速四肢乏力胸骨后疼痛
- 重组人促红细胞生成素对骨髓间充质干细胞增殖及分泌功能的影响被引量：5
- 2007年
- 目的观察重组人促红细胞生成素(rhEPO)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖及分泌功能的影响。方法体外扩增培养hMSCs,将rhEPO对hMSCs进行处理,MTT比色法检测细胞活性,ELISA法测定细胞VEGF的分泌,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达。结果hMSCs增殖变化的A570值在不同浓度rhEPO作用后明显高于对照组(P<0.01),hMSCs分泌的VEGF水平在高浓度(10U/mL)rhEPO作用后明显高于对照组及低浓度组(0.2U/mL)(P<0.01),而低浓度组VEGF水平亦高于对照组(P<0.05),细胞表面抗原CD34、CD105、CD106在rhEPO作用后与对照组相比无明显差异。结论rhEPO对hMSCs有明显的促进增殖作用,rhEPO有促进hMSCs分泌VEGF的作用,且与rhEPO浓度存在正相关趋势;rhEPO对hMSCs的分化影响不明显。
- 林海泓肖萍朱军施海明罗心平孙宇立田芳
- 关键词：骨髓间充质干细胞促红细胞生成素分泌
- 冠心病心绞痛不可拒服降脂药
- 2009年
- 近日，高血压病人张阿姨被医院确认为冠心病心绞痛，医生嘱她服用降脂药。服药一段时间后，她听人说，降脂药会损伤肝脏，而医院检查她的LDL（低密度脂蛋白）2.6毫摩/升并不高，
- 林海泓罗心平
- 关键词：冠心病心绞痛降脂药低密度脂蛋白医院检查高血压病人LDL
- 促红细胞生成素对骨髓间充质干细胞增殖及分泌功能的影响
- 2007年
- 目的观察重组促红细胞生成素(rhEPO)对人骨髓间充质干细胞(hMSC)增殖及分泌功能的影响。方法体外扩增培养hMSC, rhEPO处理hMSC,MTT比色法检测细胞,ELISA法测定细胞VEGF的分泌,流式细胞仪检测细胞表面抗原表达。结果不同浓度rhEPO作用后,hMSC增殖变化的A570值明显高于对照组(P<0．01), hMSC分泌的VEGF水平在高浓度(10 U／mL)rhEPO作用后明显高于对照组及低浓度(0．2 U／mL) rhEPO组(P<0．01),而低浓度rhEPO组VEGF水平亦高于对照组(P<0．05),rhEPO作用后细胞表面抗原CD34、CD105、CD106与对照组相比无明显变化(P>0．05)。结论rhEPO对hMSC有明显的促增殖作用,rhEPO有促进hMSC分泌VEGF的作用,且与rhEP0浓度存在正相关趋势。rhEPO对hMSC的分化影响不明显。
- 林海泓肖萍朱军施海明罗心平
- 关键词：RHEPO促增殖作用细胞表面抗原流式细胞仪检测
- 普伐他汀对人骨髓间充质干细胞增殖分化及分泌功能的影响被引量：3
- 2008年
- 背景：针对骨髓干细胞移植治疗心肌梗死及心力衰竭的效果报道不一，如何提高移植细胞在心肌的存活率，并促进其生长，从而增强移植的疗效，是一个值得深入研究且具有重要临床价值的问题。目的：观察普伐他汀在体外对人骨髓间充质干细胞增殖分化及分泌功能的影响。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2006—05／2007—05在上海市疾病预防控制中心毒理实验室完成。材料：人骨髓间充质干细胞由上海第九人民医院组织工程实验室提供。他汀类药物普伐他汀为旅贵宝制药公司产品，国药准字H10950315。方法：将冻存细胞解冻，加入含10^5U／L青霉素、100mg／L链霉素、10％胎牛血清的低糖DMEM，体外扩增培养骨髓间充质于细胞。传至第6代细胞随机分为2组：空白对照组换用低糖DMEM培养基，普伐他汀组分别加入含0．2，1，10，100μmol／L普伐他汀的低糖DMEM培养基，作用96h。MTT比色法检测细胞增殖情况，流式细胞仪检测细胞表面抗原表达，ELISA法测定细胞上清液中血管内皮生长因子含量。主要观察指标：普伐他汀对人骨髓问充质于细胞形态、增殖、表面抗原、血管内皮生长因子分泌的影响。结果：传代后细胞贴壁生长，呈梭形或条形，形态较均一，经100μmol／L普伐他汀作用24h后细胞形态无明显变化。细胞传代后潜伏期约为48h，对数增殖期为接种后第4～6天，7d后进入平台期。与空白对照组比较，0．2，1，10μmol／L普伐他汀组均可明显刺激骨髓问充质干细胞增殖（t=3．154～5．837，P〈0．05或0．01）。空白对照组CD34呈阴性表达，CD105及CD106阳性细胞百分率分别为32．55％，39．30％；普伐他汀作用2周后细胞表明抗原的表达无明显变化。与空白对照组比较，0．2μmol／L普伐他汀组血管内皮生长因子浓度无明显变化（t=-1．449，P〉0．05）；100μmol／L�
- 林海泓施海明肖萍朱军罗心平
- 关键词：骨髓间充质干细胞普伐他汀增殖分泌
- 重组人促红细胞生成素在体外抑制H2O2诱导的骨髓间充质干细胞凋亡被引量：1
- 2012年
- 目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对H2O2诱导的人骨髓间充质干细胞（MSC）凋亡的影响及其机制。方法体外培养MSC，培养至第6代，分为5组。rhEPO＋Ly294002组、rhEPO＋U0126组和rhEPO＋anisomycin组分别使用Ly294002、U0126和anisomycin处理后，换用含rhEPO的培养基培养；rhEPO组始终用含rhEPO的培养基培养；对照组使用普通培养基培养。一部分MSC在培养1h后，用H2O2处理，然后在显微镜下观察细胞形态，用流式细胞术检测细胞凋亡情况；一部分MSC继续用含rhEPO的完全培养基培养，用蛋白质印迹法检测各组rhEPO作用前后MSC中细胞外调节蛋白激酶（ERK1／2）、丝裂原活化蛋白激酶p38（p38MAPK）及磷脂酰肌醇3-激酶／蛋白激酶B（P13K／Akt）通路蛋白的表达情况。结果rhEPO可使MSC的P13K／Akt通路磷酸化水平升高，抑制p38MAPK通路磷酸化水平，但对MSC的ERK通路和总Akt、总p38MAPK水平无明显影响。rhEPO组中凋亡细胞所占百分率低于对照组（P〈0．01），rhEPO＋anisomycin组凋亡细胞所占百分率也低于对照组（P〈0．01）；但rhEPO＋Ly294002组凋亡细胞所占百分率高于rhEPO组（P〈0．01）。结论rhEPO可激活人骨髓间充质干细胞的P13K／Akt通路，并抑制p38MAPK通路，具有抑制H2O2诱导的人骨髓间充质干细胞凋亡作用。P13K／Akt通路的激活参与了其抗凋亡作用的调控。
- 林海泓龚辉
- 关键词：促红细胞生成素细胞凋亡信号途径
- 普伐他汀对骨髓间充质干细胞迁移和黏附能力的影响
- 2013年
- 目的观察普伐他汀干预对人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)迁移和黏附能力的影响及其相关细胞信号传导通路。方法使用普伐他汀干预体外培养的第6代人BMMSCs,Western blotting检测作用前后ERK1/2、p38MAPK及PI3K/Akt通路蛋白的表达情况。将10μmol/L普伐他汀预处理人BMMSCs1h后,通过Transwell小室进行细胞迁移实验,并进行细胞黏附性测定,进一步用特异的细胞信号通路抑制剂或激动剂阻断或激活ERK1/2、p38MAPK及PI3K/AKT途径,观察其对普伐他汀作用的影响。结果普伐他汀可使人BMMSCs的PI3K/Akt通路磷酸化水平升高,抑制p38MAPK通路磷酸化水平,而其对人BMMSCs的ERK通路和总Akt、总p38MAPK水平无显著影响。经普伐他汀作用后迁移细胞显著增多(P<0.05),Ly294002预处理后这种作用消失,anisomycin预处理对这种作用影响不明显。普伐他汀作用后贴壁细胞显著增多(P<0.05),但Ly294002或anisomycin预处理对这种作用影响均不明显。结论普伐他汀具有增强人BMMSCs迁移和黏附能力的作用。其增强迁移能力的作用与激活人BMMSCs的PI3K/Akt通路有关。但是它对黏附能力的作用与PI3K/Akt和p38MAPK通路均无关。
- 林海泓罗心平施海明龚辉
- 关键词：普伐他汀间充质干细胞迁移信号途径
