林金萍
- 作品数:64 被引量:111H指数:6
- 供职机构:华东理工大学生物工程学院更多>>
- 发文基金:霍英东基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
- 羰基还原酶的定制:基于大分子底物催化的活性口袋改造
- 羰基还原酶能够将前手性酮不对称还原为手性醇,是一类具有重要应用价值的工业生物催化剂。我们基于对氧化葡萄糖酸杆菌基因组数据的挖掘,报道了一种新的羰基还原酶(GoCR)。该酶属于短链醇脱氢酶超家族,严格依赖NAD/NADH。...
- 邓健林金萍魏东芝
- 文献传递
- 手性化合物的生物催化
- 本文将通过实例,对手性药物等产品的研发、利用生物催化的手性合成与手性拆分技术制备手性中间体的研究、开发一酶多用的生物催化剂等方面,就我们开展的工作做一简述。
- 林金萍高克亮刘书来魏东芝
- 关键词:手性化合物生物催化氧化还原酶
- 文献传递
- 一种微生物不对称拆分制备(S)-苯乙二醇的方法
- 本发明提供了一种微生物不对称拆分制备(S)-苯乙二醇的方法,本发明使用氧化葡萄糖酸菌属(Gluconobacter)微生物选择性氧化外消旋苯乙二醇中的(R)-苯乙二醇,从而获得(S)-苯乙二醇。使用本发明提供的方法制备(...
- 魏东芝林金萍高琼
- 文献传递
- 一种产5-酮果糖的氧化葡萄糖酸杆菌基因工程菌及其构建方法以及应用
- 本发明提供一种产5‑酮果糖的氧化葡萄糖酸杆菌基因工程菌及其构建方法以及应用。所述氧化葡萄糖酸杆菌基因工程菌是通过将含有果糖脱氢酶基因fdh的重组载体转化氧化葡萄糖酸杆菌构建而成,所述果糖脱氢酶基因fdh的核苷酸序列如SE...
- 林金萍魏东芝赵晨休
- 文献传递
- 面包酵母中羰基还原酶的表达和鉴定
- @@生物催化不对称还原拨基化合物现己广泛用于制备手性醇。在众多的生物催化剂中,面包酵母是迄今为止在前手性酮醋不对称还原中使用最广泛的微生物之一。基于序列相似性的研究表明,S. cerevisiae中至少存在49种潜在的N...
- 林金萍魏东芝
- 关键词:面包酵母羰基还原酶
- 文献传递
- 一种大肠杆菌基因工程菌、构建方法以及全细胞催化生产(R)-香茅醛的方法
- 本发明提供一种大肠杆菌基因工程菌、构建方法以及全细胞催化生产(R)‑香茅醛的方法。该大肠杆菌基因工程菌是以大肠杆菌E.coli BL21(DE3)为出发菌株,对其基因组上的醇脱氢酶基因adhE进行敲除,还通过质粒pET2...
- 林金萍魏东芝张宝琪
- 一种来源于红螺菌科细菌新型卤醇脱卤酶的克隆表达及其酶学性质鉴定被引量:1
- 2021年
- 作为一类多功能生物催化剂,卤醇脱卤酶在手性β-取代醇和环氧化合物合成应用方面备受关注。目前催化功能较为清楚的卤醇脱卤酶不足40种,且绝大部分催化性能并不能满足科学研究和实际应用的要求,因此挖掘并鉴定更多的卤醇脱卤酶具有重要意义。本文克隆表达了来源于红螺菌科细菌Rhodospirillaceaebacterium中一个假定卤醇脱卤酶(HHDH-Ra)并对其催化特性以及酶学性质进行研究。将HHDH-Ra基因克隆到表达宿主大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),结果显示目的蛋白为可溶性表达。底物特异性研究显示HHDH-Ra对1,3-二氯-2-丙醇(1,3-DCP)和4-氯-3-羟基丁酸乙酯(CHBE)具有良好的特异性。以1,3-DCP为反应底物获得HHDH-Ra的最适pH和最适温度分别为8.0和30℃。pH稳定性结果显示HHDH-Ra在pH 6.0-8.0具有较好的稳定性且经过100 h处理以后仍能保持70%左右的酶活。温度稳定性结果显示HHDH-Ra在30℃、40℃条件下的半衰期为60h,且当温度提高到50℃时,该酶的半衰期仍有20h,远高于已报道的酶。因此,来源于Rhodospirillaceae bacterium新型卤醇脱卤酶具有较好的温度、pH稳定性以及催化活性,在合成关键化学、医药中间体中具有一定的应用潜力。
- 徐纹静陈志陈磊林金萍魏东芝
- 一种硝基还原酶在芳香族硝基化合物降解还原中的应用
- 本发明提供一种硝基还原酶在芳香族硝基化合物降解还原中的应用,所述硝基还原酶具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸残基序列。本发明提供的硝基还原酶在芳香族硝基化合物降解还原中的应用,当苯环上硝基取代基的数目大于等于1时,...
- 林金萍魏东芝杨圆圆
- 氧化葡萄糖酸杆菌实时定量PCR检测方法的建立与应用
- 2011年
- 选取氧化葡萄糖酸杆菌16S rRNA作为看家基因,利用Primer Premier 5 0软件设计特异性引物,以总基因组为模板,建立氧化葡萄糖酸杆菌实时定量PCR方法。选取山梨醇脱氢酶大亚基.sldA和小亚基sldB为研究对象,以看家基因16S rRNA的表达作为内参,测得山梨醇脱氢酶大小亚基的转录水平一致,均为看家基因的68%。
- 刘旭魏东芝林金萍
- 关键词:氧化葡萄糖酸杆菌荧光定量PCR
- 大肠杆菌—面包酵母种间耦合ATP再生系统中生物合成谷胱甘肽被引量:8
- 1999年
- 利用混合悬浮培养的方法,构建了一个由重组大肠杆菌的谷胱甘肽生物合成酶系与面包酵母的糖酵解途径组成的ATP再生系统,验证了该系统用于谷胱甘肽(GSH)生物合成的可行性.研究了葡萄糖浓度、细胞量对耦合系统合成GSH 能力的影响,讨论了所构建的ATP再生系统中GSH 合成能力较低的可能原因.
- 李华钟林金萍李寅陈坚
- 关键词:谷胱甘肽大肠杆菌面包酵母