毕春明
- 作品数：22 被引量：122H指数：6
- 供职机构：中国科学院动物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学环境科学与工程更多>>
- 哺乳动物异种克隆的研究进展被引量：2
- 2003年
- 哺乳动物异种克隆是通过异种核移植和异种妊娠两个关键技术来实现的.对哺乳动物异种克隆的原理,存在的问题和可能的解决办法进行了阐述,并对近年来本实验室以及国际上该领域中的研究进展作了介绍.
- 文端成毕春明陈大元
- 关键词：哺乳动物异种克隆异种核移植
- 钙离子信号对非细胞体系中小鼠卵母细胞游离生发泡减数分裂启动的影响
- 2002年
- 本文构建了包括HeLa裂解液和游离小鼠卵母细胞生发泡的实验体系,用于研究Ca^(2+)及其下游信号对小鼠卵母细胞减数分裂启动的影响。游离的卵母细胞生发泡可以在M期细胞裂解液中发生减数分裂启动,表现为染色质的凝集。进一步的研究表明,Ca^(2+)信号的存在对G_2期细胞裂解液促进减数分裂启动是至关重要的,G_2期中期的细胞裂解液只有经Ca^(2+)诱导后才具有启动生发泡减数分裂的作用,而G_2期晚期无论Ca^(2+)存在与否均诱发减数分裂的启动,但是G_2期早期的裂解液无启动减数分裂的作用。卵母细胞的体外培养实验分析也表明,抑制CaM和CaMKⅡ的活性可以阻止GVBD和抑制第一极体的释放。免疫沉淀及Western Blotting结果显示,HeLa细胞裂解液中的MPF从G_2期中期到M期均存在,且Cdc2亚基的Tyr由磷酸化向去磷酸化转变。结果进一步证明,卵母细胞减数分裂的启动可能是通过一种Ca^(2+)/CaM依赖的途径来推动的。
- 戴谷毕春明吴耀春赵东红陈彦张锡然李朝军
- 关键词：CA^2+HELA细胞减数分裂小鼠卵母细胞非细胞体系
- 镍对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响被引量：4
- 2000年
- 为了研究镍的生殖毒性 ,采用卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究镍对小鼠卵母细胞的成熟和体外受精率的影响。结果 :氯化镍对卵母细胞生发泡破裂没有影响 ,但抑制卵母细胞第一极体的排放 ,降低体外受精率 ,并降低卵母细胞的存活率。实验结果提示 ,氯化镍破坏小鼠卵母细胞的减数分裂 ,影响小鼠的生殖功能。
- 沈维干李朝军陈彦毕春明张锡然贡昌春
- 关键词：氯化镍卵母细胞体外受精小鼠
- 影响哺乳动物体细胞克隆效率因素的研究进展被引量：2
- 2003年
- 动物克隆技术的低效率在很大程度上限制了它的应用.克隆过程的多步骤决定了影响因素的多样性.综述了体细胞核的重编程、供体细胞的选择、受体胞质、活化方法、培养条件等对克隆效率的影响,对这些问题的认识将有利于对克隆机理的研究.
- 毕春明文端成陈大元
- 关键词：哺乳动物体细胞克隆体细胞核重编程供体细胞克隆效率
- 克隆牛过程中电融合条件对附植前胚胎发育的影响被引量：11
- 2004年
- 实验比较了克隆牛过程中电融合条件的改善对附殖前胚胎发育的影响.电融合强度为140V/mm,10μs/次对的效率要较100V/mm,20μs/次和180V/mm,10μs/次时高,可以降低融合后重构胚死亡率,提高克隆牛囊胚发育率.施加直流电脉冲前先给予5V交流电场预处理数秒钟,然后在电极之间通以两个直流脉冲(140 V/mm,10μs/次,间隔0.1 s)与不用交流电预处理对融合率和重构胚的发育率无显著差异.另外实验比较了甘露醇和山梨醇两种融合液对融合及重构胚发育的影响,结果表明囊胚发育率差异不显著,但山梨醇较甘露醇融合液更容易操作.实验生出的4头克隆牛存活至今.
- 张利生毕春明李劲松吴昱琪寇朝辉姜岩蒋满喜吕自力王小宁孙青原陈大元
- 关键词：克隆牛电融合胚胎发育核移植卵母细胞
- 香烟烟雾水溶物对小鼠卵母细胞成熟和IVF的影响被引量：6
- 2000年
- 采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究不同产地 3种香烟的烟雾水溶物对小鼠卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果显示 3种香烟烟雾水溶物对卵母细胞生发泡破裂都没有影响 ,但可以显著地抑制卵母细胞第一极体的释放、降低卵母细胞的体外受精率和体外存活率。结果提示 ,香烟烟雾中影响生殖作用的主要成分是其中的水溶性成分 ,它们可以破坏卵母细胞的成熟、降低卵细胞的受精能力 ,对生殖细胞和生育能力有一定的毒性作用 ;不同产地、不同品牌香烟烟雾水溶物毒性作用相似。
- 沈维干陈彦李朝军毕春明张锡然贡昌春
- 关键词：香烟烟雾水溶物卵母细胞体外受精
- 小鼠囊胚内细胞团置换被引量：2
- 2003年
- 运用显微操作和免疫手术法, 对昆明鼠和C57BL/6鼠的囊胚进行内细胞团置换. 以切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层为受体, 注射免疫手术得到的昆明鼠或C57BL/6鼠的内细胞团, 获得两种重构胚. 一种是由不同昆明鼠个体的滋养层和内细胞团构建的同品系异体重构胚, 共构建192枚. 移植入17只昆明鼠受体后, 生下2只昆明小鼠. 另一种重构胚是由切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层与C57BL/6鼠胚胎内细胞团构建的异品系重构胚. 对此重构胚的成活率、细胞骨架和细胞数目进行了分析, 说明至少从这3个方面来说, 这种重构胚具有一定的发育潜能. 但将115枚异品系重构胚移植入昆明鼠受体后, 目前还没有后代出生. 说明来自不同个体胚胎的同品系滋养层和内细胞团重组后能够建立细胞连接, 进行信息传递并发育为正常个体, 而异品系重构胚发育能力较低. 这项研究有可能为解决动物克隆中着床率低和胎盘异常等问题提供参考方法.
- 毕春明文端成徐营孙青原陈大元
- 关键词：小鼠重构胚哺乳动物克隆细胞骨架
- 卵裂球电脉冲融合制作昆明小鼠四倍体胚胎被引量：3
- 2003年
- 为制作四倍体小鼠胚胎 ,用 4种脉冲电压强度 (6 0 0、 80 0、 10 0 0和 12 0 0V/cm )和 3种脉冲宽度(10、 30和 5 0 μs)组合 ,对 2 -细胞昆明小鼠胚胎做了融合实验。 6 0 0V/cm× 5 0 μs和 12 0 0V/cm× 30 μs两种组合融合率最高 ,分别为 91 6 %和 93 0 % ;而 6 0 0V/cm× 10 μs和 12 0 0V/cm× 5 0 μs时均显著低于其他各种组合 ,融合率分别为 5 8 9%和 6 0 2 %。以上结果表明 ,一定的脉冲电压强度是胚胎融合的必要条件 ,而脉冲宽度是影响胚胎融合及其后期发育的关键因素。激光共聚焦显微镜对融合后两细胞核的观察暗示 ,细胞核的迁移。
- 文端成毕春明朱子玉雷蕾杨彩侠陈大元
- 关键词：昆明小鼠四倍体胚胎融合率囊胚率
- 锰对小鼠卵母细胞成熟和体外受精的影响被引量：1
- 2000年
- 目的 研究锰的生殖毒性。方法 采用小鼠卵母细胞体外培养、体外受精的方法研究了硫酸锰对小鼠卵母细胞成熟和受精能力的影响。结果 硫酸锰可以抑制卵母细胞第一极体的释放 ,降低小鼠平均超排卵的卵母细胞数和卵母细胞的存活率和体外受精率。对小鼠体内生发泡破裂 (GVBD)没有影响 ,但可以抑制体外培养卵母细胞的GVBD ;硫酸锰还可以抑制受精卵的卵裂。结论 本实验结果提示 ,硫酸锰可以破坏卵母细胞的成熟 ,降低卵母细胞的受精能力 。
- 沈维干陈彦李朝军毕春明薛德彬贡昌春
- 关键词：硫酸锰卵母细胞体外受精生殖毒性
- 香烟烟雾水溶物对雌性小鼠生殖作用的影响被引量：1
- 2000年
- [目的 ]探讨香烟对生殖作用的影响。 [方法 ]腹腔注射香烟烟雾水溶物后观察其对小鼠怀孕率、胚胎发育的影响 ,采用卵母细胞的体外培养和体外受精的方法 ,观察其对超排卵数、卵母细胞的成熟和受精能力影响。 [结果 ]香烟烟雾水溶物可以极显著地降低小鼠的妊娠率 ,抑制胚胎发育 ,还可以显著性地抑制卵母细胞的体内成熟 ,降低第一极体的释放率和卵母细胞的体外受精率 ,使卵母细胞在体外的生存能力明显降低。本实验结果还显示 ,香烟烟雾水溶物对小鼠生殖作用的损害和对卵母细胞成熟的抑制作用是可逆的 ,停止腹腔注射香烟烟雾水溶物和将卵母细胞或受精卵培养在正常的培养液中 ,小鼠的生育能力又能恢复、卵母细胞的第一极体的释放率以及体外受精率都明显提高。[结论 ]香烟烟雾水溶物可以破坏卵母细胞的成熟分裂 ,降低小鼠的生殖能力和生育能力 ,但这种毒性作用是可以逆转的 。
- 沈维干李朝军陈彦毕春明张锡然
- 关键词：卵母细胞
