王帅
- 作品数：47 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 一种棘球蚴病微生物标志物及其筛选方法和应用
- 本发明提供了一种棘球蚴病微生物标志物及其筛选方法和应用，属于疾病诊断技术领域。本发明通过对健康人和棘球蚴病患者粪便中真菌组分进行ITS1区域测序，获得真菌的丰度，通过筛选运算找到特定种属的真菌作为微生物标志物，利用带类标...
- 王帅才学鹏郭爱疆王玉桂刘仲藜邹扬
- 文献传递
- 猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂B6基因的鉴定、表达及抗原性分析被引量：6
- 2016年
- 目的鉴定、表达猪带绦虫(Taenia solium)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Tsserpin B6),探索其作为诊断抗原的可行性。方法利用猪带绦虫基因组和转录组数据设计Tsserpin B6特异引物,RT-PCR扩增获得Tsserpin B6基因,对其DNA、氨基酸序列进行生物信息学分析,利用Clustal X1.83进行序列比对,并用MEGA6.0进行系统进化分析。构建pET-30a-Tsserpin B6重组表达载体,在大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导表达。纯化表达的蛋白进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),用猪囊尾蚴阳性血清进行蛋白质印迹(Western blotting)鉴定。结果Tsserpin B6开放阅读框为1 131 bp,编码376个氨基酸。其编码的氨基酸序列具有serpin较为保守的反应中心环和特征性结构域(NEEGAE和FTVDHPFLF),存在9个潜在的线性B淋巴细胞抗原表位。Tsserpin B6的表达产物相对分子质量(M_r)为53 000,主要以包涵体形式存在。Western blotting检测结果显示,所表达的蛋白可与猪囊尾蚴阳性血清发生特异性反应,在M_r 53 000处产生特异条带。结论克隆了Tsserpin B6基因,其表达产物能被猪囊尾蚴阳性血清所识别。
- 刘光学张少华郭爱疆侯俊玲魏艳玲王帅骆学农
- 关键词：猪带绦虫抗原性分析
- 猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂Tsserpin570的克隆表达与酶活性分析
- 2021年
- 为阐明猪带绦虫(Taenia solium)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Tsserpin570)对蛋白酶的抑制作用,通过RT-PCR从猪带绦虫成虫cDNA扩增获得Tsserpin570(TsM000807300)的完整CDS序列,并构建了pColdTsserpin570原核表达载体,利用发色底物法检测可溶性重组蛋白Tsserpin570对蛋白酶活性的抑制作用。结果显示:RT-PCR扩增获得的Tsserpin570基因片段长1 206 bp,其蛋白的分子质量为46 ku,含有serpin家族特有的反应中心环及DEEGAE和FIVDHPFLFFI家族保守序列。qRT-PCR结果显示,Tsserpin570基因在猪带绦虫成虫和囊尾蚴阶段均有表达,且在成虫的表达量显著高于囊尾蚴的。pCold-Tsserpin570原核表达载体经IPTG诱导表达后获得可溶性重组蛋白Tsserpin570,可被猪囊尾蚴阳性血清识别。基于发色底物法检测Tsserpin570对牛α-胰糜蛋白酶、猪胰弹性蛋白酶、猪胰蛋白酶、人白细胞组织蛋白酶G、人血浆凝血酶、猪胃蛋白酶和木瓜蛋白酶等蛋白酶的活性抑制作用发现,其对牛α-胰糜蛋白酶、胰蛋白酶及弹性蛋白酶的活性均有明显的抑制作用。以上结果提示,Tsserpin570对多种丝氨酸蛋白酶均具有较强的抑制作用。
- 毕研丽刘仲藜郭爱疆张少华王帅才学鹏
- 关键词：猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂原核表达酶活性
- Ddi1样蛋白在猪带绦虫上蛋白酶活性研究
- DNA损伤诱导蛋白1(DNA damage-inducible protein 1,Ddi1)蛋白,与HIV蛋白酶同属于反转录型天冬氨酸蛋白酶。该类蛋白在哺乳动物上,作用广泛且重要,不具酶切活性。但在利什曼原虫具有酶切活...
- 何伟岳生赟王帅才学鹏
- 关键词：真核表达酶活蛋白酶抑制剂
- 文献传递
- 猪带绦虫胰岛素受体的特征及其对囊尾蚴生长代谢的抑制研究
- 目的开展猪带绦虫胰岛素/胰岛素受体的相关研究,探索猪囊虫病防控的新技术和新手段。方法根据已完成的猪带绦虫基因组序列,以猪带绦虫的cD NA为模板,扩增猪带绦虫的两条胰岛素受体基因(Ts IR-1316和Ts IR-481...
- 王莉杰魏艳玲刘光学郭爱疆张少华侯俊玲王帅骆学农
- 关键词：猪带绦虫胰岛素受体免疫组化免疫保护
- 文献传递
- 病原感染引起的肠道菌群失调机制研究
- 食源性寄生虫常入侵宿主肠道皮层,引起粘膜免疫反应。刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)感染C57BL/6J小鼠可致CD4T细胞/IFN-γ介导的致死性回肠炎,并引起肠道菌群严重失调。肠杆菌科细菌(如大肠杆菌,...
- 王帅朱兴全才学鹏Christopher A.HunterDaniel P.Beiting
- 关键词：弓形虫肠道菌群免疫菌群失调
- 文献传递
- 日本血吸虫胰岛素样多肽的真核表达及其多克隆抗体的制备
- 2017年
- 为克隆和表达日本血吸虫胰岛素样多肽基因(Sjilp)并制备特异性多克隆抗体,根据基因组注释信息,设计特异性引物,利用RT-PCR技术从日本血吸虫成虫m RNA中成功扩增出长度为588 bp的特异性c DNA序列,其CDS序列长393 bp。基于毕赤酵母密码子偏好性,对Sjilp基因密码子进行优化,构建p PIC9KSjilp重组表达载体,并在毕赤酵母GS115中进行诱导表达。SDS-PAGE与Western-blot检测结果显示,重组蛋白Sj-ILP获得高效表达,其大小约为15 ku,与预期结果一致。利用合成肽技术,设计并合成得到2条特异性的肽段,偶联KLH,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,间接ELISA检测其效价达到1︰51 200,Western-blot鉴定表明这2条特异性多肽具有良好的免疫原性。本试验为后续验证Sj-ILP与其结合蛋白的功能奠定了良好的基础。
- 岳生赟王帅何伟王力刘仲藜曾巧英才学鹏
- 关键词：日本血吸虫真核表达多克隆抗体
- 一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9及其用途
- 本发明提供了一种豆状带绦虫SUMO化修饰系统基因TpUBC9及其用途，涉及基因工程技术领域。本发明所述基因TpUBC9的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述基因TpUBC9编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID N...
- 张少华才学鹏骆学农郭爱疆王帅侯俊玲梁盼红
- 文献传递
- 一种棘球蚴病微生物标志物及其筛选方法和应用
- 本发明提供了一种棘球蚴病微生物标志物及其筛选方法和应用，属于疾病诊断技术领域。本发明通过对健康人和棘球蚴病患者粪便中真菌组分进行ITS1区域测序，获得真菌的丰度，通过筛选运算找到特定种属的真菌作为微生物标志物，利用带类标...
- 王帅才学鹏郭爱疆王玉桂刘仲藜邹扬
- 脱氧胆酸在制备抗婴儿链球菌的产品中的应用
- 本发明提供了脱氧胆酸在制备抗婴儿链球菌的产品中的应用，属于生物制药技术领域。本发明首次证明脱氧胆酸具有良好的抑制婴儿链球菌活性，提供了脱氧胆酸在制备抗婴儿链球菌产品中的应用，为婴儿链球菌引起的疾病提供了新思路。
- 王帅郭爱疆王玉桂张睿
