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王文东

作品数:33 被引量:61H指数:6
供职机构:吉林大学人兽共患病研究所更多>>
发文基金:国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域:农业科学生物学医药卫生交通运输工程更多>>

文献类型

  • 25篇期刊文章
  • 3篇学位论文
  • 3篇会议论文
  • 2篇科技成果

领域

  • 22篇农业科学
  • 7篇生物学
  • 5篇医药卫生
  • 1篇经济管理
  • 1篇机械工程
  • 1篇交通运输工程
  • 1篇社会学
  • 1篇文化科学

主题

  • 8篇克隆
  • 7篇鲤鱼
  • 5篇单胞菌
  • 5篇气单胞菌
  • 5篇克隆及序列分...
  • 5篇基因
  • 5篇杆菌
  • 4篇全长CDNA
  • 4篇维氏气单胞菌
  • 3篇毒力
  • 3篇毒力相关基因
  • 3篇学科
  • 3篇猪链球菌
  • 3篇猪链球菌2型
  • 3篇细胞
  • 3篇链球菌
  • 3篇白细胞
  • 3篇LPP
  • 2篇学科服务
  • 2篇疫苗

机构

  • 31篇吉林大学
  • 9篇军事医学科学...
  • 1篇临沂师范学院
  • 1篇黑龙江生物科...
  • 1篇临沂大学

作者

  • 33篇王文东
  • 15篇卢强
  • 14篇张俊辉
  • 14篇杨振国
  • 9篇陈义龙
  • 9篇贾生美
  • 9篇刘军
  • 9篇冯祥汝
  • 9篇孙真
  • 7篇冯书章
  • 6篇祝令伟
  • 5篇赵晓
  • 4篇刘爽
  • 4篇周博
  • 4篇孙洋
  • 4篇齐翀
  • 3篇翟新新
  • 3篇沈雪飞
  • 3篇陈玉江
  • 3篇李鹏

传媒

  • 6篇中国兽医学报
  • 6篇中国畜牧兽医
  • 3篇中国兽医科学
  • 2篇安徽农业科学
  • 2篇Agricu...
  • 2篇中国畜牧兽医...
  • 1篇中国水产科学
  • 1篇农业科技管理
  • 1篇吉林畜牧兽医
  • 1篇水产学报
  • 1篇农业与技术
  • 1篇中国人兽共患...

年份

  • 2篇2021
  • 1篇2020
  • 1篇2018
  • 1篇2014
  • 4篇2013
  • 7篇2012
  • 3篇2011
  • 7篇2010
  • 1篇2009
  • 3篇2008
  • 2篇2007
  • 1篇2001
33 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
吉林大学涉农学科SCIE收录论文的统计分析被引量:1
2018年
为客观评价吉林省涉农高校科研生产力水平和研究现状,本文采用文献计量学方法,以SCIE收录吉林大学涉农学科论文为研究对象,针对吉林大学农学部近10a SCIE收录的涉农科技论文数量、类型、合作机构、研究方向、期刊来源、被引频次等指标进行统计与分析,旨在为本校涉农学科建设及科学研究提供一个可以量化的客观评定依据。
王重阳王文东
关键词:统计分析
Stx1A-LHRH融合毒素基因的构建及高效表达
2010年
通过PCR方法,从肠出血性大肠杆菌O157:H7的基因组DNA中扩增出Stx1A基因序列,并将之与编码LHRH的基因序列连接起来,构建编码Stx1A-LHRH的重组融合基因片段,并定向克隆到表达质粒pET28a的NcoⅠ和EcoRⅠ位点之间,构建重组表达质粒pET28a::stx1A-LHRH,将重组质粒转化到宿主菌BL21(DE3)中。对重组菌株用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明重组菌株表达出了23700的目的融合蛋白Stx1A-LHRH,目的蛋白为包涵体表达,经薄层扫描分析表明表达量约占菌体总蛋白的37.6%。为了将来更好的进行目的蛋白的功能研究,本研究再将融合基因片段克隆到表达质粒pMAL-p2x中实现了重组蛋白的可溶性表达,表达的重组蛋白经amylose亲和层析柱一步纯化后纯度可达93.4%,为下一步进行重组蛋白的活性分析及其生物学作用研究奠定了基础。
王文东刘军孙洋祝令伟郭学军周博冯书章
关键词:志贺毒素LHRH
Cloning and Sequence Analysis of Interleukin 10 (IL-10) Full-length cDNA from Cyprinus carpio L.
2012年
[Objective] This study aimed to obtain IL-10 (interleukin 10) full-length cDNA of common carp (Cyprinus carpio L.) and conduct the sequence analysis. [Method] The differentially expressed cDNA fragment was obtained by DD-RTPCR (differential display RT-PCR). The cDNA library of peripheral blood leukocytes which were separated from common carp and stimulated by mitogen was screened with a probe labeled with DIG (digoxigenin). The IL-10 full-length cDNA was cloned from 0.8×104 pfu of recombinant phages, and the sequence analysis and homology comparison were carried out. [Result] Sequence analysis indicated that the IL-10 full-length cDNA of common carp was 1 117 bp long, containing a 55 bp 5’-UTR, a 522 bp 3’-UTR, and a 540 bp open reading frame(ORF) encoding 179 amino acids. In addition, there were three mRNA instability motifs (ATTTA) in the 3’-untranslated region. The deduced protein sequence shared typical sequence features of the IL-10 family. Homology comparison indicated that the obtained sequence shared 89.1% homology with the carp IL-10 gene from GenBank. [Conclusion] This study laid foundation for further study of the expression manner, functional characteristic and regulation mechanism of IL-10 in vivo and the interaction mechanism in the inflammatory reaction and immune response.
冯祥汝陈义龙赵晓王文东张俊辉杨振国孙真贾生美卢强
关键词:CLONING
猪链球菌2型新毒力相关基因lin缺失菌株的构建被引量:7
2010年
利用温度敏感型穿梭自杀质粒pSET4s,定点敲除猪链球菌2型野生型强毒株ZY458的lin基因,构建基因缺失突变菌株458Δlin,利用家兔感染模型对ZY458及其突变菌株的生物学特性进行比较研究。家兔感染试验表明,接种ZY458菌株的家兔体质量下降,出现明显的临床症状,5只家兔4d内全部死亡;而458Δlin感染组家兔生长正常,未出现任何明显临床症状。结果表明,lin基因是猪链球菌2型新发现的一种毒力相关基因,在猪链球菌2型的致病过程中具有重要作用。
李鹏刘军祝令伟齐翀周博孙洋纪雪刘爽王文东冯书章
关键词:猪链球菌2型毒力因子
维氏气单胞菌脂蛋白Lpp基因缺失株的构建及其部分生物学特性分析被引量:1
2020年
为了探究维氏气单胞菌毒力因子脂蛋白的致病机制,在全基因测序的基础上,通过同源重组缺失脂蛋白基因。首先扩增脂蛋白基因的上下游同源臂,通过重叠PCR连接后,凝胶回收DNA片段;连接克隆载体pMD18-T,转化DH5α感受态细胞,测序成功后提取质粒进行双酶切,连入相同酶切的Pre112自杀性质粒;依次转化DH5α-λpir、WM3064感受态细胞,作为供体菌;和受体菌野生株进行同源重组,并筛选鉴定。结果显示,成功缺失了维氏气单胞菌脂蛋白基因。生物学特性分析结果发现,缺失株和野生株的生长速度相似,生物膜形成能力降低,鞭毛缺失,游动能力减弱,细菌的毒力降低,溶血活性没有明显变化。因此,成功构建了维氏气单胞菌脂蛋白基因缺失株,并分析了其部分生物学特性,为进一步研究脂蛋白基因的功能奠定了一定的基础。
宋格格盛天鸽张俊辉王文东杨振国卢强
关键词:维氏气单胞菌基因缺失
出血性大肠杆菌O157菌壳的制备研究被引量:4
2010年
目的利用温度控制噬菌体PhiX174裂解基因E的表达,制备出血性大肠杆菌O157∶H7菌壳,鉴定其裂解效率并观察其形态。方法利用PCR技术扩增得到噬菌体PhiX174裂解基因E并克隆到质粒pBV220中,将重组质粒导入出血性大肠杆菌O157∶H7。重组菌株O157∶H7(pBV220::E)培养温度从28℃突升至42℃,每20min检测菌液OD600值,绘制重组菌株生长曲线。体外菌落计数计算裂解效率,并通过电镜观察菌壳结构。结果获得了PhiX174裂解基因E全长基因及重组质粒,构建了大肠杆菌的重组菌株。重组菌菌液OD600值在温度突升至42℃后40min后开始显著下降,80min后OD600值趋于平稳。细菌的裂解效率为98.4%。电子显微镜观察显示,经诱导后,O157∶H7细菌内容物可以通过细菌表面的孔道流出,从而形成菌壳。结论本研究成功制备了大肠杆菌O157∶H7菌壳,为将来进一步研究O157菌壳的特性奠定了基础。
刘爽刘军周博王文东李鹏祝令伟纪雪冯书章
关键词:出血性大肠杆菌
鲤鱼肿瘤坏死因子受体相关因子6全长cDNA克隆及序列分析
2013年
本试验以鲤鱼外周血白细胞肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)EST序列为基础,经地高辛标记后作为探针,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从重组噬菌体中经过两轮筛选获得阳性克隆。序列分析结果显示,该序列包含有5′-非编码区(5′-UTR)25bp;3′-非编码区(3′-UTR)535bp,存在2个mRNA不稳定基序ATTTA;开放阅读框ORF长1632bp,编码543个氨基酸。预测蛋白质等电点为5.88,分子质量大小为61.773ku。序列同源性比对结果表明,所获得的序列与GenBank上登录的鲤鱼TRAF6a基因同源性达99%。蛋白质序列分析结果发现,其具有TRAF家族的典型序列特征。
贾生美孙真冯祥汝陈义龙沈雪飞翟新新张俊辉杨振国王文东卢强
关键词:鲤鱼肿瘤坏死因子受体相关因子6克隆
吉林地方猪种繁殖、生长与肉质性状基因标记的研究
张嘉保张树敏高妍袁宝肖书奇李毅赵中利陈玉江王文东曹阳金鑫李娜
本项目紧密结合吉林省养猪生产实际,运用分子生物学技术,系统研究了群体的分子遗传结构和与生长发育、繁殖、肉质性状相关的基因标记。明确了吉林主要猪种群体中ESR、FSHβ、IGF-I、H-FABP和ob等基因的遗传变异规律;...
关键词:
关键词:猪种繁殖肉质性状基因标记
维氏气单胞菌脂蛋白Lpp/LppB双基因缺失株的构建与验证
2021年
在维氏气单胞菌单基因缺失株ΔLpp的基础上,通过同源重组方法获得脂蛋白LppB基因上、下游同源臂连接片段,依次构建重组克隆载体pMD18-T-L-UD1225和重组自杀性载体Pre112-L-UD1225,随后转入WM3064感受态细胞中作为供体菌,与受体菌ΔLpp进行结合转移,构建双基因缺失株ΔLpp/LppB,通过反转录验证并检测其遗传稳定性。结果显示,成功构建了遗传稳定性良好的双基因缺失株ΔLpp/LppB,其生长速率和生物被膜形成能力较野生株WT均下降。结果表明,协同缺失脂蛋白基因Lpp和LppB后,双基因缺失株ΔLpp/LppB的生长和生物被膜变化更显著,这有利于进一步推测脂蛋白基因的功能,为之后研究维氏气单胞菌的致病机制奠定了基础。
盛天鸽宋格格张俊辉王文东杨振国卢强
关键词:维氏气单胞菌基因缺失生物被膜
维氏气单胞菌脂蛋白的原核表达及其抗血清的抗菌作用研究
2021年
为了探究维氏气单胞菌毒力因子脂蛋白的生物学功能,对脂蛋白基因进行原核表达,对表达产物进行鉴定并制备多克隆抗体研究其抗菌效应。通过PCR扩增脂蛋白基因,连接至pET-32a(+)载体,构建重组质粒pET-32a(+)-Lpp。将重组质粒pET-32a(+)-Lpp转化入感受态细胞BL21(DE3),用IPTG诱导表达。利用His标签镍离子蛋白纯化柱对表达产物进行纯化,并采用SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组蛋白的表达产物。用纯化后的重组脂蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,多抗经皮下接种小鼠研究其抗菌效应。结果显示,经酶切鉴定和序列测定发现重组质粒pET-32a(+)-Lpp构建成功。通过SDS-PAGE检测发现,重组蛋白LPP在原核表达系统中以可溶性形式表达,分子质量约为69 ku。Western-blot结果显示,纯化后的重组蛋白LPP为单一条带。制备的多克隆抗体的效价为102 400,该多抗可提高荷菌小鼠的生存率,减少脾荷菌量。因此,本实验成功构建了重组质粒pET-32a(+)-Lpp,表达并纯化了重组蛋白LPP,制备的多抗具有抗菌作用,为该蛋白生物学功能的研究及疫苗的制备奠定了基础。
宋格格岳涛涛盛天鸽张俊辉王文东杨振国卢强
关键词:维氏气单胞菌原核表达抗菌作用
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