田春林
- 作品数：61 被引量：163H指数：7
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- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学语言文字更多>>
- 弓形虫表面抗原SAG4基因的克隆、表达和鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的对弓形虫表面抗原SAG4基因进行克隆、表达和免疫反应性分析。方法根据弓形虫RH株SAG4基因序列(GenBank登录号为AF340224.1)设计引物,体外扩增目的基因,并将其克隆至pMD19-T载体,经PCR和双酶切鉴定并测序,亚克隆至pET28a(+)质粒,转化大肠埃希菌BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析SAG4重组蛋白的表达情况,蛋白质印迹(Westernblot-ting)分析该蛋白与弓形虫慢性感染小鼠血清的免疫反应性。结果扩增获得的目的基因片段为537bp。生物信息学分析表明重组基因编码产物为弓形虫SAG4抗原,是一种外膜蛋白。重组菌经IPTG诱导后,以包涵体的形式稳定表达SAG4。Westernblotting分析结果表明,诱导表达的蛋白能被弓形虫慢性感染小鼠血清识别,其相对分子质量(Mr)约为18740。结论重组蛋白SAG4有一定的免疫反应性。
- 杨雯万孝玲田春林王卫群刘晓泉
- 关键词：弓形虫克隆表达免疫反应性
- 元江县微小按蚊卵巢营养细胞多线性染色体观察被引量：1
- 2006年
- 云南省元江县采集的微小按蚊分别单只雌蚊驯养,解剖分离卵巢营养细胞,染色后光镜观察、记录染色体图谱。经观察365个卵巢多线染色体标本。其染色体由5臂共3条染色体组成:Ⅰ号染色体为具端着丝点的性染色体(X染色体),仅见一臂;Ⅱ号为1对具亚中着丝点的常染色体,分右臂(2R)和左臂(2L);Ⅲ号为1对具中着丝点的常染色体,含右臂(3R)和左臂(3L)。与广西微小按蚊卵巢营养细胞多线染色体比较,发现有12处差异。
- 石焕焕黄颉刚田春林袁志刚
- 关键词：微小按蚊多线染色体
- 人芽囊原虫分子遗传学研究概况被引量：1
- 2007年
- 万孝玲田春林
- 关键词：人芽囊原虫分子遗传学抗肿瘤治疗寄生原虫动物宿主术后应用
- 2004年南宁市小学生肠道线虫感染情况的调查研究被引量：4
- 2004年
- 目的了解南宁市小学生肠道线虫病的感染情况及相关流行因素。方法收集区、市郊两小学1～6年级学生粪便 ,用生理盐水涂片法和饱和盐水浮聚法镜检普查肠道寄生虫 ,阳性者再行水洗沉淀法检查。同时 ,以采访形式对检查对象进行相关流行因素调查。结果南宁市小学生肠道线虫总感染率为19.16 %,其中市郊从1年级至6年级依次为23.19 %、28.00 %、33.82%、31.89%、24.66%和27.14% ,平均为28.07% ;市区小学生依次为9.59 %、8.82%、13.75%、12.00 %、9.72%和10.59% ,平均为10.82%。结论南宁市郊小学生的肠道线虫感染率明显高于市区 ,以三年级的感染率最高。
- 覃晓玲刘园利胡文庆田春林
- 关键词：小学生肠道线虫感染感染率
- 弓形虫抗原基因真核表达质粒pVAX1-SAG1和pVAX1-SAG4的构建被引量：1
- 2014年
- 目的构建弓形虫抗原基因真核表达质粒pVAX1-SAG1和pVAX1-SAG4。方法根据弓形虫RH标准株SAG1和SAG4基因序列分别设计一对特异引物(分别含有HindⅢ/BamHⅠ和BamHⅠ/XbaⅠ内切酶位点),PCR扩增目的基因,并将这两段基因分别克隆至PEGM-T Easy载体,经菌落PCR和双酶切鉴定;用HindⅢ/BamHⅠ和BamHⅠ/XbaⅠ分别双酶切PEGM-T Easy-SAG1、PEGM-T Easy-SAG4和pVAX1,得到含内切酶位点的SAG1和SAG4基因片段,分别与pVAX1连接,构建pVAX1-SAG1和pVAX1-SAG4真核表达质粒,经菌落PCR和双酶切鉴定。结果PCR扩增得到目的基因SAG1和SAG4,测序结果分别与弓形虫RH标准株SAG1和SAG4基因比较,符合率均为100%。构建PEGM-T Easy-SAG1、PEGM-T Easy-SAG4克隆质粒和pVAX1-SAG1、pVAX1-SAG4真核表达质粒,分别经菌落PCR和双酶切鉴定,显示722bp的SAG1基因片段和511bp的SAG4基因片段均插入载体PEGM-T Easy和pVAX1中。结论成功克隆了pVAX1-SAG1、pVAX1-SAG4真核表达质粒,为弓形虫基因疫苗应用研究奠定了基础。
- 杜海娟卢作超刘晓泉吕国丽燕慧田春林
- 关键词：弓形虫基因疫苗真核表达质粒
- 广西、海南、云南微小按蚊3种同工酶谱比较研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探索我国微小按蚊复合体同工酶谱鉴别指标。 方法 选择广西微小按蚊 (A .m .G)、海南微小按蚊(A .m .H)和云南微小按蚊 (A .m .Y)的单雌线雌蚊匀浆 ,采用不连续性聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳法分离 ,特异性底物染色 ,比较观察乳酸脱氢酶 (LDH)、醇脱氢酶 (ADH)和酯酶 (EST) 3种同工酶谱。 结果 三地微小按蚊的LDH同工酶谱相同 ,均具 1条Rm14酶带 ;ADH酶谱中三地微小按蚊均显一条酶带 ,A .m .G与A .m .H具相同酶带Rm 3 4,而A .m .Y则是 1条Rm 40酶带 ;EST的主带谱A .m .G与A .m .H基本相似 ,前者显示Rm18、3 5和 61,后者显示Rm18、3 5、5 9和 61。而A .m .Y明显不同于A .m .G和A .m .H ,显示Rm18、3 9、43、5 0、5 6和 5 9六条主带。 结论 ADH和EST同工酶谱在不同种的微小按蚊中存在明显差别 ,可能在区别我国微小按蚊姐妹种中有较大的应用价值。
- 石焕焕田春林李艳文黄若密
- 关键词：微小按蚊同工酶电泳
- 1354例门诊腹泻病人人芽囊原虫感染情况调查被引量：18
- 2005年
- 目的了解消化门诊腹泻就诊者中人芽囊原虫感染情况及其特征.方法询问腹泻患者的病史、卫生习惯及生活环境等状况.收集患者当日新鲜大便,用生理盐水直接涂片和碘液染色镜检初筛后,将疑似阳性的标本制片及三色染色法染色,在油镜下观察形态并测量大小. 结果共查粪便1 354份,人芽囊原虫检出率为18.54%,男女腹泻者检出率分别为18.12%和19.18%,差异无显著性(P＞0.05).在人芽囊原虫混合其他寄生虫感染中,以肝吸虫占绝大多数(73.08%).粪检所见的原虫以空泡型为主,感染高峰在夏秋季节,高发年龄是21～50岁. 结论广西地区人芽囊原虫是引起腹泻的常见肠道寄生虫,其致病作用不容忽视.感染后可引发腹痛、腹泻等消化道症状.人芽囊原虫混合肝吸虫感染为广西地区人芽囊原虫感染的一个显著特点.
- 金群馨俞开敏唐连凤田春林卢作超
- 关键词：人芽囊原虫寄生虫病腹泻
- 阿奇霉素、乙酰螺旋霉素及青蒿琥酯抗小鼠弓形虫感染的研究被引量：8
- 2013年
- 目的观察阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯及联合用药对小鼠体内弓形虫的作用效果,探索治疗弓形虫病的有效药物及方法。方法小鼠腹腔接种RH株弓形虫速殖子5×104个/ml,建立急性弓形虫感染动物模型。设立阿奇霉素、乙酰螺旋霉素、青蒿琥酯单药治疗组以及阿奇霉素和乙酰螺旋霉素、阿奇霉素和青蒿琥酯、青蒿琥酯和乙酰螺旋霉素联合治疗组,分别于感染后2h给药,首次剂量加倍,疗程7d,以小鼠腹腔灌洗液虫体形态、小鼠生存时间和存活率作为观察指标,连续观察30d,评价单药和联合用药的治疗效果。实验设不治疗对照组。结果各治疗组小鼠体内的弓形虫速殖子形态发生改变,小鼠平均存活时间较对照组延长(P<0.05),以阿奇霉素单药、阿奇霉素和青蒿琥酯联合用药、青蒿琥酯单药治疗组最为显著,分别为(10.63±0.75)d、(7.37±0.36)d、(6.48±0.25)d,未治疗对照组为(4.33±0.22)d。结论 3种药物均有抗小鼠体内弓形虫作用,阿奇霉素、青蒿琥酯及二者联合用药作用效果更强。
- 王卫群田春林申继清杜海娟刘晓泉
- 关键词：阿奇霉素乙酰螺旋霉素青蒿琥酯弓形虫
- 人芽囊原虫保存方法的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察冻存剂、温度等因素对人芽囊原虫活力的影响,探索理想的人芽囊原虫保存方法。方法从患者阳性粪便中分离人芽囊原虫,分装到2 ml无菌冻存管内,分别加入10%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)、40%丙三醇(GL)和15%乙二醇(EG)作冻存剂,放置于不同的温度下保存,用台盼蓝染色法和原虫培养法测定细胞的活力和增殖能力。结果虫体在室温(18℃～20℃)下可存活3周,在4℃～6℃存活不到1周。加入冻存剂后,置-20℃和液氮(-196℃)下可存活3个月以上。用40%GL作冻存剂,于液氮低温下冻存的虫体保存半年后复苏,活力仍达41.7%,培养72 h后多见分裂相细胞。结论应用40%GL作为冻存剂,在液氮中低温保存人芽囊原虫效果较佳。4℃不适于保存人芽囊原虫。
- 田春林万孝玲刘登宇何登贤
- 关键词：人芽囊原虫温度
- 日本血吸虫新基因精氨酸酶的扩增及序列分析被引量：4
- 2004年
- 目的 获取并真核克隆日本血吸虫新基因精氨酸酶全长cDNA。方法 对本实验室曾获得精氨酸酶基因利用生物信息学进行分析 ,发现其 5’端尚缺一段序列 ;根据已知序列设计引物 ,用 5’端单巢式PCR从尾蚴文库中扩增 ,以获得精氨酸酶基因完整的阅读框 (ORF) ;用生物信息学技术对获得的精氨酸酶编码基因进行结构与功能的分析 ;并将新基因的完整编码阅读框克隆入真核表达载体pCDNA3 1。结果 用 5’端单巢式PCR从尾蚴文库中获得了精氨酸酶 5’端所缺序列 ,得到其完整的ORF ,其ORF长 10 95bp ,编码 36 4个氨基酸。利用生物信息学技术鉴定其为日本血吸虫精氨酸酶的完整cDNA序列。重组质粒经双酶切DCR及测序鉴定证明日本血吸虫精氨酸酶真核表达质粒构建成功。结论 成功获得、识别、扩增并克隆日本血吸虫精氨酸酶编码基因的全长cDNA。
- 李孜余新炳吴忠道徐劲彭寨玉田春林赵霞
- 关键词：日本血吸虫中国大陆株精氨酸酶克隆
