范小勇
- 作品数：67 被引量：122H指数：6
- 供职机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市青年科技启明星计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- mazG基因缺失的抗结核重组卡介苗
- 本发明提供了一种mazG基因缺失的重组卡介苗菌株(BCGΔmazG)，其基因组中的mazG基因被潮霉素抗性基因替换。本发明也提供了BCGΔmazG的制备方法及其在制备预防结核病重组疫苗中的应用。本发明的BCGΔmazG皮...
- 范小勇吕亮东赵国屏马辉吴康
- 文献传递
- 新型分枝杆菌荧光报告噬菌体的构建及其在结核分枝杆菌药敏检测中的应用
- 2023年
- 目的设计基于纳米荧光素酶(Nluc)的新型荧光报告系统,构建新型分枝杆菌荧光报告噬菌体ΦFN,分析该噬菌体检测结核分枝杆菌耐药性的能力。方法构建P_(furAma)启动子控制表达的Nluc荧光报告系统,将其整合至耻垢分枝杆菌基因组中,测试其在分枝杆菌的荧光报告能力;随后将P_(furAma)-nluc报告系统整合到TM4分枝杆菌噬菌体基因组中,构建新型分枝杆菌荧光报告噬菌体ΦFN;通过调整药物预处理时间、感染时间等条件,建立ΦFN检测分枝杆菌耐药性的快速检测流程,在96孔板中检测52株已知耐药性的结核分枝杆菌临床分离株对3种一线抗结核药物耐药的耐药性。结果整合型表达荧光报告系统P_(furAma)-nluc的耻垢分枝杆菌可报告下限达到100菌落形成单位(colony-forming unit,CFU),低于已报道的P_(left)启动子表达nluc系统。新型分枝杆菌荧光报告噬菌体ΦFN可通过孔板读值法在24 h内检测到分枝杆菌的存在,检测下限达到100 CFU。药物与待测菌预培养48 h后再加入噬菌体孵育24 h,敏感菌在105 CFU以下均无法检测到荧光信号,可有效区分敏感株并进行耐药性的快速检测。以罗氏药敏实验作为金标准,使用ΦFN检测52株结核分枝杆菌临床菌株对利福平、异烟肼和链霉素的耐药性,检测准确性分别是51/52、48/52、49/52。结论利用新型重组荧光报告噬菌体检测结核分枝杆菌对利福平、异烟肼、链霉素的耐药性具有极高的准确性,报告时间仅需3 d,有望成为一种快速简便的结核分枝杆菌耐药性检测新方法。
- 钱程成马瑞青郭明权范小勇
- 关键词：结核分枝杆菌耐药结核
- 结核分支杆菌PPE蛋白质家族免疫原性初探被引量：1
- 2012年
- 结核病(Tuberculosis,TB)是一种由结核分枝杆菌(Mycobactium tuberculosis,简称结核杆菌)感染引起的人畜共患慢性传染病,仍然是当今威胁人类健康的最主要疾病之一。结核病的传统诊断方法易受多种因素的干扰而产生较高的假阳性或假阴性结果,不利于结核病的早期确诊与治疗,发展新颖有效、灵敏度高和特异性强的诊断技术非常必要。
- 王娅丹范小勇张耀洲童富淡
- 关键词：免疫原性结核分支杆菌假阴性结果蛋白质家族候选抗原
- 单管一步产物增强性逆转录反应的建立及其对疫苗生产用细胞基质逆转录酶活性的检测
- 出于安全需要,人用生物制品不能有造成潜在健康危险因素的存在.世界卫生组织最新标准提出,疫苗生产用的任何传代细胞都必须没有外源性病毒,尤其是逆转录病毒的污染.最近,一种超敏感的逆转录酶反应,我们称之为产物增强性逆转录酶反应...
- 范小勇吕国贞吴丽娜陈静华张秀娟徐闻青郭盛淇
- 关键词：逆转录病毒生物制品细胞基质疫苗
- 文献传递
- 一种分支杆菌差异表达系统及其制备方法与应用
- 本发明属微生物和生物工程领域。涉及一种分支杆菌差异表达系统及其制备方法。本发明采用结核杆菌furA基因启动子/操纵子序列(pfurA)及其突变体为启动子构建分支杆菌差异表达的载体系统-pMFA系列，利用BCG为宿主菌差异...
- 范小勇赵国屏
- 文献传递
- 耻垢分枝杆菌黏膜接种对小鼠过敏性哮喘的免疫调节作用被引量：5
- 2011年
- 目的观察耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)对过敏性哮喘小鼠防御素β-2(Defb2)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)、IFN-γ、IL-4及过敏原特异性IgE、IgG1、IgG2a表达的影响,探讨Ms黏膜接种干预哮喘的免疫调节机制。方法 SPF级BALB/c小鼠随机分为哮喘组、干预组、对照组3组。以卵清蛋白(OVA)致敏,气道激发建立哮喘模型。OVA致敏前7 d鼻黏膜接种Ms进行干预。以Real-time荧光定量PCR法检测肺组织Defb2、MIP1、MIP2 mRNA的表达,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)、纵膈淋巴结细胞培养上清中MIP1、MIP2、IFN-γ、IL-4的浓度,ELISA法检测血清总IgE以及OVA特异性IgE、IgG1、IgG2a水平。结果 Ms干预可以显著增高哮喘小鼠Defb-2 mRNA的表达(31.21±1.56对0.78±0.11,P<0.01);Ms干预可使哮喘小鼠表达增高的MIP1 mRNA降低(9.80±1.56对2.44±0.96,P<0.05),但对MIP2 mRNA的影响不明显(P>0.05);Ms干预可使BALF和淋巴结培养上清中MIP1、MIP2降低,使BALF和淋巴结培养上清中IL-4降低(97.43±7.83对153.80±5.20,150.75±54.58对625.81±55.98,P均<0.01),使BALF中IFN-γ升高(78.92±11.41对44.88±3.26,P<0.01);Ms干预可以显著降低哮喘小鼠血清总IgE、OVA-IgE、OVA-IgG1,升高OVA-IgG2a,降低哮喘小鼠OVA特异性IgG1/IgG2a比值(1.09±0.03对1.42±0.04,P<0.01)。结论 Ms黏膜免疫可以通过促进Defb-2表达增强哮喘小鼠抗感染能力,通过降低巨噬细胞炎症蛋白表达、调节Th1/Th2平衡、抑制过敏原特异性IgE表达等途径干预哮喘,耻垢分枝杆菌有望继卡介苗之后成为哮喘预防的另一候选疫苗。
- 郭盛吴良霞范小勇郝春莉马辉陈凌张建华
- 关键词：哮喘耻垢分枝杆菌巨噬细胞炎症蛋白防御素
- 人乳头瘤病毒疫苗的研究进展
- 2003年
- 戴玲媛范小勇
- 关键词：人乳头瘤病毒疫苗肿瘤
- 结核分枝杆菌潜伏感染相关抗原Rv2028c鉴别诊断结核潜伏感染的潜力
- 目的表达与纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)潜伏感染相关抗原Rv2028c,并对其免疫生物学特性进行研究分析。方法原核表达并纯化重组Rv2028c抗原,用ELISA检测抗原...
- 赵慧敏李海聪李根李春玲卢永辉吉萍施理敏韩伟靖吴康范小勇
- 关键词：结核分枝杆菌
- 文献传递
- 一种结核杆菌ESAT-6重组二聚体及其制备方法和应用
- 本发明属生物工程和诊断医学领域。具体涉及一种结核杆菌ESAT-6重组二聚体及其制备方法、抗原性分析及其在结核病血清学诊断中的应用。本发明以含有两个esat-6拷贝的嵌合基因核酸疫苗HG856A质粒DNA为模板，通过PCR...
- 范小勇郭建卢水华吴文娟
- 文献传递
- 趋化因子与结核病被引量：2
- 2017年
- 趋化因子参与了机体控制MTB感染的关键过程，其作用包括招募免疫细胞、激活适应性免疫应答、辅助形成保护性肉芽肿及增强疫苗保护效应等。
- 吉萍胡志东范小勇
- 关键词：趋化因子结核病MTB感染免疫细胞免疫应答肉芽肿
