袁方
- 作品数：38 被引量：99H指数：7
- 供职机构：军事医学科学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新型重组鸡Ⅱ型胶原特异性耐受原表位肽rcCTE1-2表达纯化及对CIA小鼠治疗效应的研究
- <正>口服耐受是自九十年代国际上兴起治疗 RA的特异疗法之一。而研制小分子免疫活性肽诸如耐受原表位肽或变构肽进行其治疗则是该研究领域近年来的重大进展之一。这主要是因其具有空间结构较简单、稳定性较高、机体吸收利用快、无需消...
- 谭刘欣刘楠梁飞赵晓龙娟袁方骆媛薛红孙玉英奚永志
- 文献传递
- 支气管肺泡灌洗液与咽拭子荧光定量PCR法检测成人肺炎支原体感染的对比研究被引量：3
- 2014年
- 目的 用实时荧光定量PCR方法对肺部感染危重患者的咽拭子样本和支气管肺泡灌洗液（BALF）进行检测,探讨不同样本对检测结果的影响.方法 450例肺部感染危重患者纳入临床研究,用实时荧光定量PCR方法检测患者咽拭子样本和BALF样本,对检测结果进行比较.结果 在450例肺部感染危重患者中,肺炎支原体肺炎（MPP）患者1 15例,占25.6％.BALF样本检测的阳性率为69.56％,咽拭子样本检测的阳性率为13.04％.肺炎支原体（MP）感染的年龄段主要在20～39和50 ～59岁,以50-59岁年龄段人数最多.结论 MP是肺部感染主要病原体之一,采集BALF标本用实时荧光PCR检测MPP阳性率更高,是MPP诊断的有效手段.
- 金欣于农陈水平左向华佟利威许晓跃吴海涵姜雪丹袁方李占甲
- 关键词：肺炎支原体肺炎支气管肺泡灌洗液
- 造血干细胞移植供受体人群HLA-Cw基因遗传多态性研究被引量：7
- 2006年
- 目的调查了人类白细胞抗原(humanleucocyte antigen, HLA)Cw位点在中国汉族人群中的等位基因分布规律,为进一步研究Cw位点的遗传特征提供背景资料。方法采用序列特异性引物扩增技术对1285名无关个体进行HLA-Cw基因特异性分析,并对其分布规律进行统计学分析。结果共检测到23种HLA-Cw位点的等位基因,其中HLA-Cw*01、*03、*07、*08为主要基因型,其基因频率分别为0 .1529、0 .2385、0 .1747、0 .1004 ,并检出HLA-Cw*12、*14、*15、*16、*17等血清学方法不能鉴定的HLA-Cw基因;统计结果表明HLA-Cw位点的基因分布符合Hardy-Weinberg平衡(χ2=73 .74 ,df=98 ,P>0 .5)。结论本研究结果为中国汉族人群提供了一套较为完整HLA-Cw基因遗传学参数。
- 刘金锋孙玉英金荔梁飞刘楠袁方骆媛刘曙光宋新强奚永志
- 关键词：遗传多态性汉族人群
- 一种罕见的人类白细胞抗原HLA-B/Cw座位间的基因重组被引量：7
- 2006年
- 目的探讨人类白细胞抗原复合体HLA-B/C座位间的基因重组。方法采集拟进行造血干细胞移植的一例患者(男,39岁)及其妻女的外周血标本,首先对其HLA-Ⅰ、Ⅱ类区域的5个经典基因位点进行顺序特异引物PCR(PCR-SSP)低、高分辨基因分型及SBT分析,然后再进行遗传家系分析研究,确定HLA基因重组相关位点。结果HLA高分辨基因分型的结果证实患者(AML-M5患者)的2条单倍型分别为A2402101-Cw030401/0402-B1301-DRB10406-DQB1030302/0303与A02011-Cw150201/0202-B4002-DRB11405-DQB105031;其女儿的2条单倍型分别为A02011-Cw150201/0202-B1301-DRB10406-DQB1030302/0303与A2406-Cw0602-B1302-DRB1070101/0102-DQB10202;患者配偶的2条单倍型则分别为A330301/0302-Cw030201/0202-B5801-DRB117-DQB10202与A2406-Cw0602-B1302-DRB1070101/0102-DQB10202。从遗传家系分析显示,患者的女儿所携有的父源A02011-Cw150201/0202是源自父亲的一条染色单体,而B1301-DRB10406-DQB1030302/0303则源自父亲的另一条染色单体,这表明父亲的2条染色单体在减数分裂时HLA-B和-Cw基因座位间发生了重组,即2条染色体间发生了交换,重组后的单倍型又完整地遗传给了女儿。结论首次在国际上发现并证明了一例罕见的中国汉族人群HLA-B/C基因座位间的基因重组家系,这为更深入的研究HLA重组机制奠定了坚实基础。
- 骆媛孙玉英金荔梁飞刘楠宋新强袁方刘曙光刘金锋奚永志
- 关键词：人白细胞抗原
- HLA-Cw位点低分辨基因分型“纯合子”的等位基因特性研究
- 2009年
- 目的研究HLA—Cw位点低分辨基因分型“纯合子”的等位基因特性，为临床移植配型提供精确资料。方法在43例血缘关系造血干细胞移植（HSCT）供受者中，对中国最常见的低分辨基因分型Cw＊03和Cw＊07的“纯合子”个体采用聚合酶链反应-序列特异性引物（PCR—SSP）高分辨基因分型方法进行等位基因定型，并采用自主研制的三维结构匹配软件系统（HLA Stnic Markversion 1.0）对其等位基因产物进行三维结构匹配，以预测不同分辨率分型结果对移植物抗宿主病（GVHD）发生的影响。结果低分辨基因分型Cw＊03、Cw＊07“纯合子”个体的高分辨基闵分型结果显尔Cw＊03及Cw＊07的纯合子分别为14％和43％，其余均为Cw＊03及Cw＊07杂合子个体。可见其低分辨基因分型易造成供受者间等位基因的错配；在有家系校正的情况下，标本的低分辨模糊结果可以通过家系遗传分析来校正定型；在无家系校正的情况下，应通过高分辨基因分型来确定等位基因，三维结构差异分析则显示这些错配有可能造成HSCT后GVHD的发生。结论当低分辨基因分型结果只出现Cw位点“纯合子”时，有家系的标本应当以家系分型结果校正定型，无家系校正的标本应当用高分辨基因分型方法进行核实，从而为临床移植提供棒确的配型报告，以防止无关供-受者HSCT后因等位基因错配而引起的严重GVHD。
- 梁飞刘楠金荔袁方刘金锋孙玉英奚永志
- 关键词：等位基因聚合酶链反应
- 中国大陆人群HLA-Cw基因遗传多态性研究
- ＜正＞目的研究中国人群人类白细胞抗原（human leucocyte antigen,HLA）Cw位点的遗传多态性。应用DNA分型技术,分析中国人群在HLA-Cw位点的基因分布频率,为进一步研究HLA-Cw与造血干细胞移...
- 刘金锋孙玉英金荔梁飞刘楠袁方骆媛刘曙光奚永志
- 文献传递
- HLA-A/B/C/DRB1/DQB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病关联分析被引量：4
- 2013年
- 目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-A/B/C/DRB1/DQB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的关联性。方法采用聚合酶链反应序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术对277例ALL患者以及1370例健康无血缘关系对照组进行HLA-A/B/C/DRB1/DQB1基因分型,并将结果采用病例对照研究方法进行基因频率、单倍型频率以及疾病发生相对危险率(RR)的研究。结果 ALL患者Cw7的基因频率较对照组升高(P<0.05),其RR为6.0202;而HLA-A30、B13及Cw4基因频率较对照组降低(P<0.05);其RR分别为0.5181、0.6907和0.4769。两位点单倍型B13-Cw6在疾病组较对照组频率显著性升高(P<0.05),其RR为4.7861。两位点单倍型A30-B13、A30-DR7、B13-DR7以及扩展单倍型A30-B13-Cw6-DR7-DQ2在疾病组均较对照组频率显著性降低(P<0.05),其RR分别为0.3566、0.4933、0.4824和0.4052。结论我们在中国汉族人群中通过大样本量的病例对照研究来探寻HLA基因多态性与ALL之间的关联性,并取得了初步结果。HLA-Cw7与ALL的易感性相关;HLA-A30、B13、Cw4基因频率则与ALL发生呈负相关,可能是ALL的保护性基因;某些HLA单倍型亦与ALL的发生有关。
- 刘楠林晓娥袁方梁飞代东发孙玉英奚永志
- 关键词：急性淋巴细胞白血病人类白细胞抗原基因型基因频率
- 鸡Ⅱ型胶原基因疫苗pcDNA-CCOL2A1能有效治疗大鼠类风湿性关节炎被引量：5
- 2006年
- 已证明Ⅱ型胶原(CII)是类风湿性关节炎(RA)最主要的自身免疫抗原,采用口服鸡Ⅱ型胶原蛋白(CCII)诱导免疫耐受治疗RA标志着RA治疗策略的重大进展之一.在国际上克隆成功鸡Ⅱ型胶原蛋白基因(CCOL2A1)的基础上,探讨了采用pcDNA-CCOL2A1基因疫苗策略治疗RA的科学性和可行性.将克隆的CCOL2A1基因连接于真核表达载体pcDNA3.1(+)上,即为基因疫苗pcDNA-CCOL2A1.然后将该表达载体pcDNA-CCOL2A1转染COS-7细胞,经Western blot分析显示,pcDNA-CCOL2A1在COS-7细胞中是以分泌型来表达CCII多肽链的α亚单位.随后,以CCII诱导的Wistar大鼠为RA模型即CIA,系统观察一次性尾部静脉注射20,200,400μg/kg3个不同剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗对CIA关节炎的治疗作用.结果表明,在注射后第5天200μg/kg组就可观察到大鼠关节肿胀程度明显减轻,与空载体组比较有显著性差异(P<0.05),而20,400μg/kg两剂量组与空载体组比较未观察到治疗效果(P>0.05).注射后6周,CIA大鼠血清中抗CII抗体浓度水平、TNF-α浓度在200μg/kg治疗组较空载体组明显降低(P<0.05),而400μg/kg组则显著的升高,20μg/kg组则无明显变化.此外,细胞因子TGF-β,IL-10浓度水平在200μg/kg组较空载体组明显升高(P<0.05),而20与400μg/kg两组则无显著性差异.脾细胞淋巴细胞增殖实验表明,200μg/kg剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗治疗组大鼠脾细胞对CII的反应能力较空载体组明显下降(P<0.05).此结果表明,200μg/kg剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗能明显抑制CIA大鼠关节肿胀程度,降低抗CII抗体、TNF-α水平,提高细胞因子TGF-β,IL-10水平,降低脾细胞增殖反应能力,对CIA大鼠关节炎有显著的治疗作用.
- 宋新强骆媛王丹刘曙光刘金锋袁方薛红刘楠梁飞孙玉英奚永志
- 关键词：类风湿性关节炎免疫耐受
- 基于鸡Ⅱ型胶原基因的全新型DNA疫苗的研制及其在治疗大鼠类风湿关节炎中的疗效观察
- <正>业已证明II型胶原(CII)是类风湿性关节炎( RA)最主要的自身免疫抗原,采用口服鸡II型胶原蛋白(CCII)诱导免疫耐受治疗 RA标志着 RA治疗策略的重大进展之一。新近我们在国际上克隆成功鸡II型胶原蛋白基因...
- 龙娟赵晓宋新强骆媛薛红袁方刘楠梁飞孙玉英奚永志
- 文献传递
- 中国汉族白血病患者及其相关人群罕见的HLA-DR/DQ连锁不平衡研究
- 2006年
- 目的研究中国汉族白血病患者及其相关人群罕见的HLA-DR/DQ连锁不平衡单倍型。方法对2000-2005年在我院进行异基因造血干细胞移植前HLA配型的白血病患者及与患者有血缘关系的家系供者共1500例的血液标本,采用低分辨序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)方法进行HLA-DR/DQ基因分型,并对两位点间连锁不平衡参数进行统计学分析。1500例中患者650例,平均年龄25岁;家系供者850例,平均年龄42岁。结果在41例的血液标本中发现13种罕见的连锁不平衡单倍型,主要为HLA-DQ8或HLA-DQ9与不同DR位点的连锁。其中DR14/DQ4、DR4/DQ5、DR9/DQ6、DR9/DQ7、DR8/DQ8、DR9/DQ8、DR12/DQ8、DR13/DQ8和DR14/DQ9共9种单倍型尚未见报道。650例白血病患者中有20例存在12种罕见的连锁不平衡单倍型,850例家系供者中有21例存在8种罕见的连锁不平衡单倍型。DR8/DQ8单倍型只见于家系供者,而DR14/DQ4、DR12/DQ6、DR11/DQ8、DR13/DQ8和DR14/DQ9单倍型则只见于白血病患者。41例HLA-DR/DQ基因分型结果显示,连锁不平衡单倍型与DR52(DRB3)宽抗原相关联者占58.5%(24/41),与DR53(DRB4)宽抗原相关联者占36.6%(15/41),而与DR51(DRB4)宽抗原相关联者仅占4.9%(2/41)。所发现单倍型频率最高的为DR12/DQ8(0.0023)和DR9/DQ8(0.0023),其次为DR11/DQ9(0.0020)和DR12/DQ9(0.0017)。13种连锁不平衡单倍型的绝对及相对连锁不平衡参数均为负值,说明它们在中国汉族人群中较为罕见,并处于连锁不稳定状态。结论发现了罕见的DR/DQ连锁不平衡单倍型,对补充中国汉族人群HLA-DR/DQ基因的连锁不平衡类型,提高HLA分型结果的准确性具有一定意义;同时,DR/DQ连锁不平衡单倍型在不同人群中的差异为疾病关联研究提供了思路。
- 梁飞罗卫东刘楠金荔袁方孔繁华孙玉英奚永志
- 关键词：HLA基因分型单倍型
