公共文化服务平台

共 4 条记录，以下是 1-4

全选清除导出

排序方式：

抗CTLA-4嵌合抗体的制备及生物学活性鉴定被引量：1: 2012年; 制备新型抗CTLA-4人鼠嵌合抗体并进行活性鉴定。通过杂交瘤技术获得高亲和力小鼠抗人CTLA-4单克隆抗体22G11和16C11;利用分子克隆技术将鼠源抗体可变区基因与人源抗体恒定区拼接后,最终通过CHO-K1工程株细胞表达高亲和力抗CTLA-4嵌合抗体。经SDS-PAGE电泳显示最终获得了纯度高于90%的CTLA-4嵌合抗体c22G11和c16C11,抗原结合活性结果表明两株嵌合抗体都能很好地与Jurkat细胞结合,竞争抑制实验表明它们都能与各自对应的鼠源抗体竞争。据此,本实验获得了两株抗人CTLA-4胞外区的高亲和力和特异性嵌合抗体。; 许静李晶杨扬郭怀祖钱卫珠张大鹏王皓; 关键词：CTLA-4 单克隆抗体免疫原性嵌合抗体

双功能VEGF受体融合蛋白突变体的生物学活性研究被引量：1: 2010年; 为了研制出能同时阻断肿瘤血管与淋巴管生成的抗肿瘤制剂,我们设计构建了同时包含VEGFR1和VEGFR3功能域的基因工程双功能融合受体(VEGFRIg)。为了改善VEGFRIg的血浆半衰期以增强其抗肿瘤疗效,我们选择VEGFRIg的3个碱性氨基酸进行突变诱导获得了双功能受体的突变体VEGFRIgm。研究结果表明,VEGFRIgm具有与VEGFRIg相似的与VEGF-A和VEGF-C结合的能力,能有效地抑制VEGF-A诱导的人脐静脉内皮细胞增殖及VEGF-C诱导的人皮肤淋巴内皮细胞增殖。进一步研究表明,VEGFRIgm在小鼠体内的半衰期比VEGFRIg显著延长,提示其可能发展成为一个新型的高效抗肿瘤药物。; 王韬张大鹏杨扬许静石金平钱卫珠李博华魏于全王皓; 关键词：血管内皮生长因子受体血管内皮细胞淋巴管内皮细胞半衰期抗肿瘤活性

一种适用于评价CD20抗体体内外抗肿瘤效应模型的建立: 2010年; 研究通过基因转染的方法建立了稳定表达不同水平人CD20分子的小鼠骨髓瘤细胞克隆:CD20高表达(NS1-CD20H)、中表达(NS1-CD20M)和低表达(NS1-CD20L)的NS-1细胞株。利用建立的CD20分子高、中、低表达的NS-1细胞系,我们初步研究了CD20分子表达水平与CD20抗体杀伤活性的关系。实验结果表明,随着CD20分子表达水平的提高,CD20抗体(Rituximab和2F2)的CDC和ADCC作用均相应增强。2F2抗体具有与Rituximab相似的ADCC作用。对于CD20高表达细胞,2F2抗体显示出和Rituximab相似的CDC活性。但对于CD20低表达的NS-1细胞,2F2的CDC活性远强于Rituximab。体内实验结果表明对于荷有NS1-CD20L的小鼠,Rituximab不能显示出抗肿瘤活性,而2F2则具有显著的抗肿瘤作用。由于这两个抗体有相似的ADCC活性,实验结果提示CDC可能是CD20抗体的重要作用机制之一。我们建立的不同程度表达CD20的NS-1细胞克隆可以成为一种新型的CD20抗体活性评价模型,并有助于进一步阐明CD20抗体的作用机制。; 刘广洛钱卫珠李博华杨扬许静王皓; 关键词：CD20 RITUXIMAB 单克隆抗体 B细胞非霍奇金淋巴瘤

半胱氨酸蛋白酶IdeS的原核表达、纯化及活性鉴定: 2014年; 酿脓链球菌来源的免疫球蛋白G降解酶(immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes,IdeS)是一种典型的半胱氨酸水解酶,可以在抗体铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab)2片段和Fc片段,由于其独特的酶活特异性和高活性,IdeS可以作为工具酶应用于IgG的亚单位制备、结构分析及表征分析。利用双标签(GST-tag及His6-tag)表达系统在E.coli中高效表达了可溶性重组蛋白酶GST-IdeS-His6,并在IdeS的氨基端与GST之间加上肠激酶酶切位点,以利于标签的去除。再利用亲和层析的纯化方法对目的蛋白进行纯化。使用SDS-PAGE、HPLC-SEC、LC-MS对纯化后的IdeS进行分析和鉴定。结果表明:本系统所表达的蛋白酶IdeS得率高,每1L菌液纯化可获得约25mg纯度为90%以上的蛋白酶IdeS,将此蛋白酶与抗体IgG以1∶100(m/m)比例混合,于37℃反应30min,即可酶切完全。能够满足蛋白质结构分析中对蛋白酶的高质量要求,并且适用于抗体类药物的表征分析。同时,蛋白酶IdeS也可以应用于生物仿制药、生物改良药和新一代抗体以及Fc-融合蛋白的研究。; 许静赵自叶徐进郭怀祖郑娟段树燕彭晓云王皓; 关键词：原核表达纯化

全选清除导出

共1页<1>

许静