谭明典
- 作品数:3 被引量:2H指数:1
- 供职机构:扬州大学医学院更多>>
- 发文基金:江苏省环境监测科研基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 快速筛选雌激素类化合物全酵母细胞发光传感器的研究
- 通过分子生物学技术,将可高效表达人雌激素受体基因(hER cDNA)的酵母表达载体重组于酵母细胞(W303-1A),使其稳定表达,再将ERE调控yEGFP报告载体重组该酵母细胞,使yEGFP表达位于雌激素调控之下,用双质...
- 李湘鸣罗方妮汪霄张娟谭明典
- 关键词:环境雌激素酵母细胞雌激素受体绿色荧光蛋白
- 酵母CYC1启动子TATA框对ERE调控的报告基因的影响被引量:1
- 2011年
- 人工合成两条雌激素效应元件(ERE)重复的核苷酸序列,并在5′和3′端设计HindⅢand SphⅠ黏性末端。将两条互补的ERE溶液加热至95℃,然后冷却至室温使其形成双股DNA,将双股ERE插入到pERE-CYC-yEGFP载体的细胞色素C(CYC1)启动子相应的酶切位点,生成pERE-CYC-αyEGFP载体。pERE-CYC-yEGFP和pERE-CYC-αyEGFP载体的不同之处是ERE位于CYC1启动子的位置,前者ERE下游的CYC1启动子含有α和β-TATA框,而后只含有-αTATA框。将两者分别转化于可表达人雌激素受体的酵母细胞,构建成两种受雌激素调控的重组酵母细胞。将该重组酵母细胞经6种不同的雌激素化合物作用4 h,发现重组pERE-CYC-αyEGFP的酵母细胞的绿色荧光蛋白(GFP)表达量与受试物间剂量效应关系较差,而含有pERE-CYC-yEGFP载体重组酵母细胞,与受试物具有明显的剂量效应关系。因此,在用于快速、高通量筛选雌激素类化合物生物评价中,其CYC1基本启动子中的α和-βTATA框是必须的。
- 谭明典罗方妮葛宜枝李晶晶徐海荣李湘鸣
- 关键词:酵母细胞绿色荧光蛋白生物评价
- 基因重组酵母测评系统在筛选环境样品雌激素活性中的应用研究被引量:1
- 2009年
- 目的用重组酵母测评系统研究DDTs和汽车尾气提取物的拟雌激素活性。方法将终浓度为10-9~10-15mol/L的17β-雌二醇、终浓度为10-4~10-9mol/L的DDTs(p,p’-DDT、o,p’-DDT、p,p’-DDD、p,p’-DDE)和终浓度为0.25~8.00ml/ml的汽车尾气提取物加入酵母细胞培养液,作用4h,通过定量测定β-半乳糖苷酶活力表达受试物的雌激素作用强度。结果DDTs是一类可直接象配体一样与雌激素受体(ER)结合并发挥雌激素效应的环境雌激素,单独作用时o,p’-DDT雌激素活性较高,p,p’-DDE的雌激素活性较低;汽油燃料车尾气在终浓度为2.00~4.00ml/ml时,其β-半乳糖苷酶活力与DMSO对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05),天然气尾气各剂量组的β-半乳糖苷酶活力与对照组(蒸馏水)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论DDTs是经ER介导的环境雌激素,其中o,p’-DDT的拟雌激素活性最高。汽车尾气提取物中汽油燃料车尾气具有弱雌激素活性,天然气燃料车尾气未检出雌激素活性。
- 陈秀云祝娉婷孙鹏玲谭明典
- 关键词:基因DDT