谷辉杰
- 作品数:4 被引量:2H指数:1
- 供职机构:同济大学更多>>
- 发文基金:上海市卫生局科技发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用被引量:2
- 2008年
- 以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得156个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,潜在的与STCH相互作用的蛋白有:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白。基于各候选蛋白与神经系统疾病的关系,选择RanBP9作进一步验证实验。经体外GST-Pulldown和体内免疫共沉淀实验证实RanBP9和STCH能够相互作用,明确RanBP9的羧基端为相互作用的最小功能域。此结果为我们进一步揭示STCH作用的分子机制提供了线索。
- 吕立夏李学礼谷辉杰郑莉李静琪徐磊
- 关键词:酵母双杂交人脑
- 一种特异检测ApoE4基因型的试剂盒及其应用
- 本发明涉及一种特异检测ApoE4基因型的试剂盒及其应用,试剂盒由以下试剂组成:4%蔗糖水、10mmol/L NaOH溶液、1mol/L Tris-HCl(pH 7.5)溶液、DMSO、试剂I、试剂II、Hha I内切酶、...
- 吕立夏张介平谷辉杰邓佳齐徐国彤
- 文献传递
- 建立快速、特异检测ApoE4基因型方法
- 2008年
- 目的:建立快速、特异检测载脂蛋白E(ApoE)基因型的方法。方法:采用碱裂解法抽提漱口水来源的颊粘膜上皮细胞的基因组DNA;优化各种改善高GC含量的的添加剂种类和浓度,包括二甲亚枫、甘油、甲酰胺、甜菜硷等,PCR产物进行HhaI酶切并DNA垂直电泳从而分析个体的ApoE基因型。结果:漱口水来源的基因组DNA能替代外周血DNA进行PCR扩增。甜菜碱、甲酰胺、甘油等对于ApoE4基因的扩增效果并不明显,而5%DMSO能显著提高ApoE4基因的扩增效率,并显著提高PCR扩增的特异性。结论:无创的简单的ApoE4基因分型被建立,极大易化了对ApoE4相关疾病的分子流行病的研究,对于其它基因的基因型研究提供有益的线索。
- 张介平郑莉谷辉杰毕婉容李学礼徐磊吕立夏
- 关键词:载脂蛋白E聚合酶链式反应DMSO
- 一种特异检测ApoE4基因型的试剂盒及其应用
- 本发明涉及一种特异检测ApoE4基因型的试剂盒及其应用,试剂盒由以下试剂组成:4%蔗糖水、10mmol/L NaOH溶液、1mol/L Tris-HCl(pH 7.5)溶液、DMSO、试剂I、试剂II、Hha I内切酶、...
- 吕立夏张介平谷辉杰邓佳齐徐国彤
- 文献传递