贺斌
- 作品数：88 被引量：193H指数：8
- 供职机构：武汉大学人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学文化科学交通运输工程更多>>
- 羧甲基壳聚糖通过抑制线粒体途径保护氧化损伤诱导雪旺细胞凋亡
- [目的] 探讨线粒体凋亡途径在羧甲基壳聚糖(Carboxymethylated chitosan,CMCS)保护过氧化氢(H2O2)诱导雪旺细胞(Schwann cells,SCs)凋亡中的作用及机制。[方法] 体外分离...
- 贺斌陶海鹰卫爱林陶凤华李孝海杨俭
- 关键词：羧甲基壳聚糖雪旺细胞凋亡线粒体氧化应激
- 复合脂肪源性干细胞的VPA／PRGD组织工程神经修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究被引量：7
- 2017年
- 目的观察复合脂肪源性干细胞（ADSCs）的丙戊酸（VPA）／RGD多肽接枝聚（PRGD）组织工程神经对大鼠损伤坐骨神经功能恢复的影响。方法2013年2月至2014年8月．将大鼠ADSCs分离培养．诱导后与VPA／PRGD支架材料复合，用CCK-8检测细胞在支架材料上的增殖活性：建立大鼠坐骨神经缺损模型．分别用复合ADSCs的VPA／PRGD组织工程化神经导管（A组）、VPA／PRGD神经导管（B组）和自体神经移植（C组）修复缺损神经。术后12周分别对3组动物的有髓神经纤维进行组织形态学分析。结果CCK-8检测结果显示B组与C组ADSCs在3d、6d和9d的吸光度差异无统计学意义（P〉0．05）；术后12周，3组动物导管近端再生神经纤维轴突计数分别为A组（268±7．48）、B组（269±6．86）和C组（271±7．55）。三组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。A组、C组的导管中段再生神经纤维轴突计数分别为（257±6．19）和（260±5．60）．显著高于B组（229±5．08），差异有统计学意义（P〈0．05），A组与C组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。A组、C组的导管远端再生神经纤维轴突计数分别为（246±5．89）和（247±5．02），显著高于B组（214±7.55），差异有统计学意义（P〈0．05）．A组与C组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论复合ADSCs的VPA／PRGD组织工程化神经能有效促进大鼠缺损神经的再生。
- 吴飞邓明杨越张向阳刘丰贺斌
- 关键词：神经再生丙戊酸脂肪源性干细胞
- 人参皂苷Rb1对体外培养大鼠雪旺细胞增殖、细胞周期及PCNA表达的影响
- 目的 观察人参皂苷Rb1(GRb1)对体外培养大鼠雪旺细胞(SCs)增殖、细胞周期及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法 取3～5 d无特定病原体(SPF)级SD大鼠20只,雌雄不限,体质量25～30 g,分离双侧...
- 陶海鹰卫爱林陶凤华贺斌李孝海杨俭
- 关键词：人参皂苷RB1雪旺细胞增殖细胞周期
- P13K／Akt信号通路在吡咯喹啉醌促雪旺细胞增殖中的作用被引量：9
- 2010年
- 目的探讨磷脂酰肌醇-3激酶／蛋白激酶B（phosphoinositide-3 kinase／Akt，P13K／Akt）信号通路在吡咯喹啉醌促雪旺细胞增殖过程中的作用。方法体外分离培养雪旺细胞，S-100免疫荧光鉴定；Westernblot检测P13K下游因子Akt磷酸化激活形式（p-Akt）的表达，并通过P13K激酶抑制剂（wortmannin）阻断该通路后p-Akt的表达情况。结果吡咯喹啉醌可使雪旺细胞发生形态学变化，加入吡咯喹啉醌后30min即可检测到p-Akt的表达，4h达高峰，12h基本无表达；吡咯喹啉醌在1—100nmol／L范围内可使p-Akt表达增加；加入wortmannin阻断P13K后p-Akt上调表达消失（P〈0．05）。结论吡咯喹啉醌可使雪旺细胞发生形态学变化，P13K／Akt信号通路在吡咯喹啉醌促雪旺细胞增殖过程中发挥重要作用。
- 贺斌刘世清李皓桓
- 关键词：吡咯喹啉醌雪旺细胞
- 羧甲基壳聚糖对氧化损伤雪旺细胞BDNF、GDNF表达的影响
- 目的：研究羧甲基壳聚糖(Carboxymethylated chitosan,CMCS)对氧化应激诱导大鼠雪旺细胞(Schwann cells,SCs)损伤的保护作用,及脑源性神经营养因子(Brain derived n...
- 贺斌陶海鹰卫爱林陶凤华李孝海
- 关键词：羧甲基壳聚糖雪旺细胞BDNFGDNF
- 羧甲基壳聚糖对硝普钠诱导大鼠髓核细胞诱导型一氧化氮合酶和基质金属蛋白酶表达的影响
- [目的] 观察羧甲基壳聚糖(Carboxymethylated chitosan;CMCS)对硝普钠(Sodium nitroprusside,SNP)诱导的大鼠椎间盘髓核细胞增殖、诱导型一氧化氮合酶(inducible...
- 陶海鹰卫爱林陶凤华贺斌李孝海杨俭
- 关键词：羧甲基壳聚糖髓核细胞一氧化氮合酶基质金属蛋白酶-3
- 新生大鼠许旺细胞体外培养纯化的最佳培养条件被引量：2
- 2009年
- 背景：许旺细胞对促进外周神经的生长、发育和修复有重要作用，目前对于许旺细胞体外培养方法的优劣情况报道不一。目的：筛选许旺细胞最佳体外培养条件。设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2008-06／10在武汉大学人民医院中心实验室完成。材料：三四天龄SD大鼠24只，由武汉大学医学部实验动物中心提供。方法：无菌剥离大鼠双侧坐骨神经，应用低浓度酶快速消化法、差速贴壁法分离培养纯化许旺细胞。取处于指数生长期的细胞，调整密度为1×10^7L^-4接种到6孔培养板，然后分组实验。设定4个条件：培养基pH（6．8-8．8）、胎牛血清体积分数（2％-20％）、培养箱温度（34-39℃）、培养箱CO2浓度（3％-8％）。首先固定胎牛血清体积分数、培养箱温度和培养箱CO2浓度，改变培养基pH对细胞进行培养，从而确定最适培养基pH。然后依次改变胎牛血清体积分数、培养箱温度以及培养箱CO2浓度，进而得到其他3个指标的最佳值。镜下观察见明显克隆形成时终止培养，以含5个以上细胞的细胞团作为1个克隆，在倒置显微镜下进行克隆计数。主要观察指标：通过许旺细胞长势及克隆形成情况，筛选许旺细胞体外培养扩增的最适pH、胎牛血清体积分数、培养温度和培养箱C02浓度。结果：在以DMEM／F12（1：1）为基础培养基的情况下，培养基pH为7．0-7．2时克隆形成最多，〈7．0或〉7．2时克隆形成明显下降：胎牛血清体积分数为10％许旺细胞长势较好且克隆数明显增加，当血清浓度过高或过低时克隆形成相对较差：34-36℃细胞生长受到明显抑制，克隆形成较少，37℃时克隆形成最多，〉37℃细胞长势开始变差，克隆形成下降，至39℃时细胞已无法贴壁；培养箱CO2浓度为3％～8％时许旺细胞克隆形成无明显变化。结论：许旺细胞体外培养的最佳条件为
- 贺斌刘世清李皓桓
- 关键词：许旺细胞克隆
- 腰椎管肿瘤误诊12例分析被引量：3
- 2010年
- 目的探讨腰椎管肿瘤的诊断方法,以减少误漏诊率。方法回顾分析武汉大学人民医院2000-01-2008-12收治的23例腰椎管肿瘤病例。结果 23例患者入院后均通过详细询问病史及细致体格检查,并采集影像学资料,综合分析病情,发现12例在外院发生误诊或漏诊。结论详细的病史询问及体格检查,适合的辅助检查及加强对类似病症的鉴别力可减少误漏诊率。
- 邓明刘世清丁万军贺斌吴宇
- 关键词：腰椎误诊
- 小干扰RNA特异性沉默CD44基因对羧甲基壳聚糖保护大鼠软骨细胞凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨小干扰RNA（siRNA）沉默大鼠软骨细胞的CD44基因后对细胞CD44基因表达的抑制作用及对软骨细胞在羧甲基壳聚糖（CMCS）作用下细胞生物学特性变化及其作用机制。方法构建针对CD44基因特异性的siRNA（siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3），Lipofectamine“2000转染软骨细胞。通过免疫荧光鉴定cD44基因特异性siRNA（CD44-siRNA）的转染情况，通过反转录-聚合酶链反应（FIT—PCR）及蛋白印迹法检测CD44-siRNA转染细胞中CD44基因及蛋白的表达情况；通过硝普钠诱导软骨细胞凋亡并通过流式细胞技术检测CMCS对硝普钠诱导正常及经CD44-siRNA转染软骨细胞凋亡的影响。采用单因素方差分析及SNK—q检验对结果进行统计学分析。结果免疫荧光检测发现CD44-siRNA成功转染进入软骨细胞，转染率在60％左右。RT—PCR检测结果表明，转染siRNA-1后的24、48及72h，与空白对照组（0．429±0．053，0．501±0．037，0．341±0．009）相比，CD44的mRNA表达明显减弱（分别为0．198±0．007，0．211±0．016，0．153±0．005；q=5．93，7．01，11．23；P〈0．01）。蛋白印迹法检测表明转染siRNA-1后24h，与空白对照组相比，CD44的蛋白表达明显减弱（0．231±0．064与0．675±0．113，q=13．09，P〈0．01）。流式细胞检测结果表明3mmol／L硝普钠可以成功诱导软骨细胞发生早期凋亡[（70±6）％]；50、100、200μg／mlCMCS对硝普钠诱导的凋亡有-定的抑制作用[凋亡率分别为（51±7）％，（30±4）％，（15±4）％；q=5．08，6．97，9．73；P〈0．01]；但CMCS对硝普钠诱导的CD44-siRNA-1转染的软骨细胞的凋亡抑制作用比未转染组明显减弱[凋亡率分别为（34±6）％和（15±4）％，q=6．95，P〈0．01]。结论CD44特异性siRNA-1转染体外培养的大鼠软骨细胞能显著下调CD44基因的表达；CD44基因在CMCS保护硝普钠诱导软骨细胞凋亡中发挥重要的作用。
- 陈庆贺斌刘世清
- 关键词：软骨细胞细胞凋亡CD44小分子干扰羧甲基壳聚糖
- 羧甲基壳聚糖对体外培养许旺细胞环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响
- 2015年
- 背景:已有研究证实羧甲基壳聚糖对许旺细胞增殖、分泌具有促进作用,但其对许旺细胞内环磷腺苷介导蛋白激酶A信号通路的影响仍需要进一步研究。目的:观察羧甲基壳聚糖对大鼠许旺细胞内环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路的影响。方法:取第2代新生大鼠许旺细胞,以1×109 L-1的细胞浓度接种于6孔板,分4组培养,空白对照组加入PBS,实验组分别加入50,100,200 mg/L的羧甲基壳聚糖溶液培养。培养24 h后,检测许旺细胞内环磷腺苷浓度、蛋白激酶A活性及环磷腺苷反应元件结合蛋白m RNA的表达。结果与结论:与空白对照组比较,羧甲基壳聚糖呈剂量依赖性提高许旺细胞内环磷腺苷浓度(P<0.05),呈剂量依赖性增强许旺细胞内蛋白激酶A活性(P<0.05),呈剂量依赖性提高许旺细胞内环磷腺苷反应元件结合蛋白m RNA的表达(P<0.05)。表明羧甲基壳聚糖可增加许旺细胞内环磷腺苷浓度、促进蛋白激酶A活性,从而激活环磷腺苷/蛋白激酶A信号通路。
- 贺斌陶海鹰卫爱林李孝海陈任
- 关键词：壳聚糖许旺细胞环AMP依赖性蛋白激酶类羧甲基壳聚糖
